Hepatitída C je názov choroby, ktorá postihuje extrémne najdôležitejší orgán- pečeň. Vírus hepatitídy C je patogén obsahujúci RNA. Tento mikroorganizmus bol prvýkrát identifikovaný koncom 80. rokov dvadsiateho storočia.
Spôsoby šírenia choroby možno rozdeliť do skupín:
Ľudia ktorí:
Krvný test na HCV je laboratórna metóda diagnostika hepatitídy C, jej mechanizmus účinku je založený na identifikácii protilátok typu Ig G a Ig M, ktoré sa začnú aktívne produkovať, keď sa v krvi objavia protilátky proti vírusu. Čo to je? Toto patogénne mikroorganizmy, ktoré sa objavujú niekoľko týždňov alebo dokonca mesiacov po infikovaní osoby.
Prepis analýzy
Štúdiom štruktúry HCV vedci dospeli k záveru, že tento patogén je genóm, ktorý patrí živočíšnym aj rastlinným vírusom. Pozostáva z jedného génu, ktorý obsahuje informácie o deviatich proteínoch. Prvý z nich je poverený úlohou preniknúť vírusom do bunky, druhý je zodpovedný za vytvorenie vírusovej častice a tretí v tomto čase prepína prirodzené funkcie bunky na seba. Patria do štruktúrnej skupiny proteínov, pričom ostatných šesť je neštrukturálnych.
HCV genóm je jedno vlákno RNA uzavreté vo vlastnej kapsule (kapside), tvorené nukleokapsidovým proteínom. To všetko je zabalené v obale pozostávajúcom z proteínov a lipidov, čo umožňuje vírusu úspešne sa naviazať na zdravú bunku.
Akonáhle sa vírus dostane do krvného obehu, začne cirkulovať po celom tele cez krvný obeh. Keď sa genóm dostane do pečene, aktivuje svoje funkcie a pripojí sa k pečeňovým bunkám a postupne do nich preniká. Hepatocyty (ako sa tieto bunky nazývajú) počas svojho fungovania podliehajú poruchám. Ich hlavnou úlohou je „pracovať pre vírus“, počas ktorého potrebujú syntetizovať vírusové proteíny a ribonukleovú kyselinu.
Čím dlhšie HCV zostáva v pečeni, tým viac buniek v orgáne je postihnutých a odumiera, čo ohrozuje ich degeneráciu do zhubného nádoru.
HCV má niekoľko genotypov, to znamená kmeňov. Zapnuté tento moment Je známych 6 genotypov a každý druh má svoj vlastný poddruh. Všetky 
sú označené v závislosti od číslovania od 1 do 6. Existujú informácie o lokalizácii konkrétneho vírusu v rámci zemegule. Napríklad genotypy 1, 2 a 3 sa vyskytujú na celom svete, zatiaľ čo genotyp 4 sa vyskytuje väčšinou na Strednom východe a v Afrike, genotyp 5 sa nachádza v južná Afrika a 6 je v juhovýchodnej Ázii.
Základom pre predpísanie liečby by mal byť pozitívny výsledok krvného testu na HCV, ako aj určitý genotyp.
Vysvetlenie analýzy HCV:
- Anti-HCV Ig M - marker aktívnej replikácie vírusu hepatitídy C;
- Anti-HCV Ig G - pravdepodobná prítomnosť vírusu hepatitídy C;
- Ag HCV - pozitívny výsledok naznačujúci prítomnosť vírusu hepatitídy C;
- HCV RNA - vírus hepatitídy C je prítomný v tele a aktívne postupuje.
Falošne pozitívny výsledok
Zapnuté lekárska prax Hoci sú zriedkavé, vyskytli sa prípady falošne pozitívnych výsledkov HCV testov. To je možné v situácii s tehotnými ženami as ľuďmi, ktorí majú iné infekčné choroby.
Je ešte menej pravdepodobné, že sa hovorí o falošne negatívnych výsledkoch, ktoré sú zaznamenané u pacientov užívajúcich imunosupresíva, alebo je to ovplyvnené charakteristikami ich imunitný systém. Rovnaký výsledok sa očakáva, ak je zapnutá hepatitída C počiatočná fáza rozvoj.
Ak sa vyskytnú nejaké nedorozumenia, môžete sa uchýliť k testu PCR na hepatitídu C, ak má pozitívny výsledok, potom vykonajte ďalší test na určenie vírusového genotypu.
Doba platnosti a ako sa vrátiť
Test na hepatitídu C spočíva v odbere krvi pacientovi nalačno, pričom treba brať do úvahy, že večeru by mal mať najneskôr 8 hodín pred odberom materiálu. Po prebudení môžete piť len trochu obyčajnej neperlivej vody. Bude lepšie, ak v predvečer štúdie budete sledovať svoju stravu, aby bola čo najľahšia a najjednoduchšia. Vyprážané a tučné jedlá by mali byť úplne vylúčené, rovnako ako alkohol. Ťažký fyzická práca a šport môže ovplyvniť platnosť výsledkov testov, preto sa tomu snažte vyhnúť. 
Ak sa chystáte na vyšetrenie krvi na zistenie hepatitídy C, mali by ste o tom povedať lieky môže skresliť skutočné hodnoty, takže vykonajte prieskum buď predtým, ako začnete užívať lieky, alebo niekoľko týždňov po ich vysadení. Ak prestanete medikamentózna liečba nie je možné podľa pokynov lekára, potom na to upozornite sestru, ktorá testuje. Musí zaznamenať meno prijímaného. liek a dávkovanie, v ktorom vám ho predpísali.
Pre laboratórny výskum je potrebné krvné sérum. Ako dlho sú materiály platné? Môžu sa skladovať menej ako päť dní teplotné podmienky od 2 do 8 stupňov Celzia a viac ako päť dní za predpokladu, že skladovacia teplota je -20 stupňov Celzia.
Krvný test HCV sa robí v povinné pre ľudí s stavy imunodeficiencie, najmä s HIV.
Enzýmová imunoanalýza na hepatitídu
Enzýmová imunoanalýza na hepatitídu priradený presná diagnóza infekčná choroba, určenie konkrétneho kmeňa vírusu, ako aj výber liečebnej metódy.
Táto štúdia ukazuje:
- má pacient hepatitídu?
- Ako dlho sa infekcia objavila?
- typ vírusu, ktorý človek nesie.
Všetkým pacientom s podozrením na toto ochorenie sa odporúča aj vyšetrenie bilirubínu. To vám umožní posúdiť stupeň poškodenia pečene a nepriamo naznačiť štádium ochorenia (akútne alebo chronické).
Krvné testy na hepatitídu sa vykonávajú v dvoch fázach. V prvom rade metóda PCR určuje prítomnosť patogénov. Potom sa uskutočnia enzýmové imunotesty na hľadanie špecifických markerov konkrétny typ vírus, ich množstvo. Niekedy sú nariadené testy na vyhodnotenie účinnosti očkovania alebo predpísanej liečby. V tomto prípade sa PCR nevykonáva, skúma sa iba krvné sérum na obsah a koncentráciu protilátok.
Príprava na enzýmovú imunoanalýzu
Na stanovenie markerov hepatitídy sa vyšetruje krvné sérum. Pravidlá prípravy sú rovnaké ako pri biochemickom teste. Ak je test predpísaný na vyhodnotenie účinnosti liečby, je potrebné darovať krv pred prvým ranný termín drogy. O dlhodobé užívanie iné lieky je potrebné oznámiť špecialistovi pred testom.
Falošne pozitívne výsledky testov sa vyskytujú u osôb:
- s chronické choroby obehový systém,
- infikovaných inými infekciami,
- s ARVI alebo chrípkou akútna forma,
- c metabolické poruchy,
- s hormonálnymi alebo autoimunitnými patológiami,
- mať dieťa,
- so zhubnými nádormi.
Pozitívna reakcia enzýmový imunotest u takýchto pacientov vyžaduje opakované vyšetrenie. Iba na základe výsledkov niekoľkých testov možno predpísať liečbu.
Špecifické laboratórna diagnostika vírusová hepatitída je založená na použití imunochemických a molekulárno-biologických výskumných metód. Hlavnými imunochemickými metódami sú rádioizotopové alebo rádioimunitné (RIA) a enzýmová imunoanalýza (ELISA). Imunochemické diagnostické metódy sú založené na špecifickej interakcii antigén-protilátka, po ktorej nasleduje detekcia komplexu pomocou špeciálnych značiek. Najbežnejší je enzýmový imunotest.
Prvé správy o používaní enzýmový imunotest, ako metódu na stanovenie akýchkoľvek látok, publikovali v roku 1971 súčasne dve výskumné skupiny - B. Van Weemen, A. Schuurs a E. Engvall, P. Perlmann. Enzýmová imunoanalýza je založená na ďalší princíp: na tuhej fáze, ktorou je najmä povrch jamiek polystyrénovej tablety, sa fixuje antigén infekčného agens alebo protilátky (často zmes protilátok) k antigénom, ktoré je potrebné zistiť. Tento antigén alebo protilátky, ktoré sú fixované na pevnej fáze, sa nazývajú imunosorbent.
V dôsledku inkubácie imunosorbent a testovaného séra v prítomnosti detegovateľného činidla sa viažu do komplexu antigén-protilátka. Po premývacom postupe, ktorý odstráni nenaviazané antigény a protilátky, sa uskutoční inkubácia s konjugátom. Anti-HBs sa používa ako konjugát na dôkaz HBsAg na dôkaz protilátok proti vírusu hepatitídy C, protilátky proti ľudským imunoglobulínom (protidruhový konjugát) značené chrenovou peroxidázou. V dôsledku tejto inkubácie sa dodatočne zavedený konjugát spojí s existujúcimi komplexmi antigén-protilátka. Po odstránení nenaviazaného konjugátu (premytí) sa do jamiek pridá substrát. Pri použití peroxidázového konjugátu sa ako substrát používa peroxid vodíka v kombinácii s indikátorom, ktorý sa najčastejšie používa ako ortofenyléndiamín (OPD) alebo tetrametylbenzidín (TMB). Výsledok sa hodnotí fotometricky.
Kvalita a spoľahlivosť analýzy možnosti metódy enzýmovej imunoanalýzy charakterizované množstvom kritérií vrátane citlivosti, špecifickosti, presnosti a reprodukovateľnosti.
Citlivosť- To minimálne množstvo látka, ktorú možno detegovať pomocou enzýmového imunotestu. Zároveň spodná hranica citlivosti túto metódu je koncentrácia testovanej látky vo vzorke, ktorá zodpovedá najnižšej pozitívny výsledok stanovenie, ktoré je štatisticky významne odlišné od ukazovateľov zjavne negatívnych vzoriek. Citlivosť IFTS závisí od množstva okolností súvisiacich s dizajnom testovacieho systému (afinita imunosorbentu, kvalita extrakčných a pufrovacích systémov), ako aj s rozlíšením a presnosťou metódy registrácie.
Špecifickosť- schopnosť presne identifikovať tie zložky, pre ktoré je tento enzýmovo viazaný imunosorbentný testovací systém určený. Špecifickosť je určená do značnej miery krížová reakcia protilátky alebo antigény (to znamená kompozícia používaná ako imunosorbent), s blízko príbuznými zlúčeninami, ako aj zloženie inkubačného média (matrixový efekt).
Správny- súlad priemernej hodnoty výsledkov opakovaných stanovení tej istej kontrolnej vzorky so skutočnou hodnotou meraného parametra. Správnosť stanovenia ELISA závisí od kvality samotného testovacieho systému a kontrolnej vzorky. Pre dobré enzýmové imunotestovacie systémy sa miera presnosti pohybuje od 90 do 110 %. Charakteristickým znakom biomedicínskeho výskumu v ELISA je nemožnosť stanoviť presnú hodnotu, a preto sa za skutočnú hodnotu berie priemer z viacerých odborných laboratórií. Štatistickým kritériom správnosti je aritmetický priemer a miera jeho odchýlky skutočný význam, vyjadrené v percentách.
Reprodukovateľnosť- schopnosť testovacieho systému vykazovať rovnaké hodnoty počas opakovaných štúdií tej istej vzorky. Reprodukovateľnosť závisí tak od náhodných chýb (chyby) počas reakčného postupu, ako aj od kvality testovacích systémov a presnosti metódy zaznamenávania výsledkov. Predpokladá sa, že reprodukovateľnosť tých istých kontrolných vzoriek od jednej spoločnosti v rôznych laboratóriách by nemala presiahnuť variačný koeficient 15 %.
Existuje niekoľko špecifických schém ELISA na stanovenie markerov vírusovej hepatitídy: a) priamy enzýmový imunotest; b) nepriamy enzýmový imunotest; c) kompetitívna inhibícia; c) metóda „pasce“ alebo „zachytenia“.
Z molekulárnych biologických metód diagnostika vírusovej hepatitídy polymeráza sa používa častejšie reťazová reakcia a hybridizácia. Tieto metódy, najmä PCR, umožňujú detegovať veľmi malé množstvá špecifickej vírusovej DNA alebo RNA a tak posúdiť replikáciu a v niektorých prípadoch aj replikačnú aktivitu.
Hepatitída je izolovaná v samostatná skupina zápalové ochorenia pečeň. Môžu mať rôzne etiológie a formy. Pri prvom podozrení na takéto ochorenia lekár predpíše vhodné testy. Ale keďže sa patológie líšia svojou povahou, metódy detekcie vírusu sa tiež líšia.
Najčastejšie zaznamenané vírusy hepatitídy sú A, B, C, D, E, F, G, ktoré sú spôsobené kvantitatívnymi vírusová infekcia. Okrem toho je možné pozorovať ukazovatele choroby, keď žltá zimnica, mumps, Epstein-Barrova choroba, herpes, rubeola, cytomegalovírus, horúčka Lassa, AIDS.
Bakteriálne príčiny vývoja patológií sa pozorujú v prítomnosti syfilisu, leptospirózy, toxických - pri alkoholizme, drogovej a chemickej intoxikácii. Existujú aj hepatitídy spôsobené choroba z ožiarenia a autoimunitné patológie. Každý z týchto typov patológie si vyžaduje individuálny prístup k liečbe.
Ak teda pacient má klinické príznaky choroby je predpísaný krvný test na markery rôzne druhy choroby.
Na presné určenie typu hepatitídy (vírusovej, nevírusovej, akútnej, chronickej alebo difúznej) by pacienti mali darovať krv na protilátky. Takýto postup si však nevyhnutne vyžaduje predbežnú kvalitnú prípravu.
Preto pred vykonaním analýzy by ste mali zvážiť nasledujúce body:
- Darovanie krvi by sa malo uskutočniť nalačno, pretože jej charakteristiky sa počas dňa výrazne líšia.
- Posledné jedlo by sa malo zjesť najmenej osem hodín pred testom. Pitie kávy, džúsu, čaju a iných podobných nápojov nie je povolené, povolené je len pitie vody.
- Dva dni pred testom by ste nemali jesť mastné alebo mastné jedlá. vyprážané jedlá, piť alkohol.
- Niekoľko hodín pred zákrokom je zakázané fajčiť.
- nevzdáva sa po röntgene, ultrazvuku, masáži, fyzioterapii.
- Deň pred zákrokom sa užívanie liekov úplne zastaví, zníži sa fyzický a emocionálny stres.
- Ak nie je možné vysadiť lieky, zoznam týchto liekov by sa mal pred analýzou uviesť samostatne.
Obdobia, kedy je potrebné darovať krv na potvrdenie typu hepatitídy, sú rôzne. Markery vírusu skupiny A možno teda identifikovať už pri prvých príznakoch patológie, pretože maximálna kvantitatívna koncentrácia protilátok proti nemu sa pozoruje do tridsiatich dní.
Vírus hepatitídy C sa zistí najskôr jeden a pol mesiaca po podozrení na infekciu.
Krv na vírus môžete darovať buď v nemocnici, alebo zavolať lekára domov. V každom prípade počas postupu musí lekár dodržiavať potrebné sterilné opatrenia, to znamená používať jednorazové materiály a nástroje.
Poradie darovania krvi na analýzu:
- Rameno v oblasti predlaktia je obviazané lekárskym turniketom. Z tohto dôvodu sa pohyb krvi v cieve zastaví a časť žily v oblasti lakťa sa stane konvexnou. Lekár vloží ihlu do tohto miesta.
- Oblasť ohybu lakťa naplnená krvou sa dá dobre dezinfikovať vatovým tampónom namočeným v alkohole.
- Ihla je pripojená k injekčnej striekačke a vložená do žily. Ihneď potom sa turniket odstráni.
- Po vybratí potrebného množstva tekutiny sa ihla vyberie z cievy a na ranu sa aplikuje vatový tampón namočený v alkohole. Na rýchle zastavenie krvácania a zabránenie vzniku hematómu sa pevne zatlačí, potom sa paže ohne a oprie sa o telo.
Normálne ukazovatele a interpretácia
Na stanovenie vírusu hepatitídy A sa na identifikáciu markerov vírusu Ig G používa imunochemiluminiscenčná metóda. Norma je menšia ako 1 S/CO. Ak sú výsledky vyššie, môže to znamenať prítomnosť vírusu alebo predchádzajúce ochorenie.
Marker hepatitídy B je určený prítomnosťou protilátok Lg M. Každá z ich kvantitatívnych hodnôt je základom pre potvrdenie diagnózy hepatitídy B.
Vírus hepatitídy C sa diagnostikuje pomocou ELISA. Normálne by anti-HCV protilátky nemali chýbať. Ak sa zistia, je potrebný opakovaný test. Ak dodatočný výskum pozitívny výsledok, vírus hepatitídy C je potvrdený.
Markery hepatitída D-G sú tiež stanovené enzýmovým imunotestom. V prípade prítomnosti protilátok proti vírusom a ich rekombinantom je diagnóza potvrdená po dvoch pozitívnych odberoch.
Definícia toxickej, autoimunitnej, radiačnej, teda nevírusovej hepatitídy, je trochu iná.
V takýchto prípadoch sa používajú nepriame metódy na potvrdenie diagnózy:
- Fibrinogénový test. Norma tohto proteínu sa pohybuje v rozmedzí 1,8 – 3,5 g/l. Nízke číslo indikuje hepatitídu a poškodenie pečeňového tkaniva.
- Testy na AST a ALT. Norma pre AST je od 0 do 75 U/l, pre ALT od cca do 50 U/l. Kvantitatívne zvýšenie ukazovateľov naznačuje prítomnosť ochorenia.
- Analýza bilirubínu. Normálny rozsah je 5-21 µmol/l. Väčšie číslo naznačuje vývoj patológie.
- Celkový srvátkový proteín. Norma pre dospelých je 66 - 83 g / l, ak je číselná hodnota nižšia, znamená to pokles albumínu, to znamená prítomnosť ochorenia.
Na potvrdenie autoimunitnej hepatitídy sa vykoná mikroskopické vyšetrenie biopsie pečene. Táto analýza nám umožňuje identifikovať kvantitatívne špecifické lézie organ. Na tento účel sa pomocou špeciálnej ihly odoberie kúsok pečeňového tkaniva. Potom sa materiál ošetrí špeciálnymi činidlami a skúma sa pod mikroskopom. Autoimunitná hepatitída je tiež potvrdená, ak analýza hovorí, že hladina gamaglobulínu G je 1,5-krát vyššia a keď protilátky proti hladkému svalstvu, antinukleárne, antimitochondriálne protilátky vo vysokom titri majú pomer väčší ako 1:80.
Navyše s touto diagnózou má pacient príznaky zápalu pečeňového tkaniva a zlyhania pečene.
Iba skúsený odborník môže poznať všetky jemnosti dešifrovania analýzy, pretože napríklad samostatné kvantitatívne zvýšenie celkový proteín nie je nevyhnutne potvrdením ochorenia pečene a zníženie albumínu môže naznačovať patológiu obličiek.
Dodatočné testy
Samotný krvný test nie vždy umožňuje správne stanoviť diagnózu a zistiť presný dôvod choroby. V niektorých prípadoch sa vykonáva bromsulfaleínový test. Táto štúdia vám umožňuje analyzovať fungovanie pečene.
Bromsulfaleín sa zavádza do krvi, z nej vstupuje do pečene, potom do žlče a vylučuje sa prirodzene. Okrem toho, ak je podozrenie na patológiu, a ultrazvukové vyšetrenie pečeň. To umožní určiť veľkosť orgánu (zväčšený alebo nie), heterogenitu jeho tkanív (prítomnosť fibrózy, hypertrofie atď.) A nepresnosť obrysov. Takéto zmeny sú presne charakteristické pre hepatitídu.
V súčasnosti sa táto metóda často používa na identifikáciu vírusu. molekulárna diagnostika ako je polymerázová reťazová reakcia (PCR). Jeho výhodou je vysoká citlivosť, čo znamená veľkú presnosť.
Tento test je založený na opakovanom kopírovaní špecifickej časti DNA alebo RNA prostredníctvom pôsobenia enzýmu. V dôsledku toho sa vytvárajú zdvojené segmenty genetického reťazca, vďaka čomu je možné odhaliť aj malé množstvo patogénu.
Štúdie PCR nám umožňujú identifikovať vírus a diagnostikovať presná diagnóza už za pár hodín. Táto metóda identifikuje patogén, zatiaľ čo iné testy určujú iba reakciu tela na vírus. Ale táto metóda má aj svoje nevýhody. Všetky štúdie sa musia vykonávať len za sterilných podmienok. Aj najmenšia kontaminácia môže ovplyvniť výsledky.
Okrem toho takéto testy a dekódovanie môže robiť iba lekár s rozsiahlymi skúsenosťami v oblasti genetiky.
Ak vezmeme do úvahy všetky vyššie uvedené faktory, nemožno povedať, že metóda ČĽR je vždy presná. Vie ukázať nesprávny výsledok v pozitívnom aj negatívnom smere.
Na kvalitnú liečbu vírusových typov hepatitídy, imunomodulátory a antivirotiká. Ale keďže tieto lieky majú dosť silný účinok na telo, pred ich predpísaním si musí byť lekár úplne istý, že príčinou patológie je vírusová infekcia. Preto môžu byť priradené dodatočné testy a výskum.
Strana 2 z 2
Porovnanie výsledkov molekulárnej a ELISA diagnostiky CHC
Vzhľadom na nedostatočný informačný obsah klinických a laboratórnych testov je obzvlášť dôležité, ak je podozrenie na hCG a jeho použitie v prvej fáze vyšetrenia pacientov s reumatickými ochoreniami virologická štúdia krvné sérum pomocou enzýmovej imunoanalýzy a PCR.
Ako upozorňujú niektorí autori, pri dostupnom enzýmovom imunoteste sú možné falošne pozitívne výsledky, čo je najčastejšie dôsledok prítomnosti protilátok proti superoxiddismutáze v analyzovanej vzorke, spolu s ktorými sa c100-3 syntetizuje v rekombinantných kvasinkových bunkách, ktorý sa používa ako antigén v enzýmové imunotestovacie systémy na identifikáciu HCV. Výsledky testov ovplyvňuje aj hypergamaglobulinémia v dôsledku systémových ochorení spojivové tkanivo nedávne očkovania (najmä proti osýpkam), kryoglobulinémia, pretože HCV môže tvoriť kryoprecipitát. Nahlásené falošne pozitívne výsledky po opakovanom rozmrazovaní vzoriek alebo po dlhodobom skladovaní pri nestabilných teplotách. Protilátky proti HCV sa tvoria v priemere 8 až 20 týždňov od okamihu infekcie alebo 15 týždňov od začiatku hepatitídy u niektorých pacientov trvá tvorba protilátok približne rok; Absencia protilátok proti HCV nevylučuje diagnózu HCV. Okrem toho 20 % pacientov s chronickou HCV môže byť séronegatívnych, pretože obsahujú nízke titre protilátok proti HCV v dôsledku imunodeficiencie alebo imunosupresívnej liečby.
PCR pečeňového tkaniva v parafínových rezoch sme vykonali v 44 prípadoch, z ktorých 23 (52,3 %) zaznamenalo negatívny výsledok, v 20 (45,5 %) - pozitívny, v jednom prípade (2,3 %) bol v tkanive zaznamenaný negatívny výsledok PCR s pozitívnou PCR v krvi pacienta, čo sme interpretovali ako skoré obdobie vírusová hepatitída C na pozadí RA.
Zo 136 krvných PCR štúdií bol test pozitívny u 74 pacientov (54,4 %) a negatívny v 62 (45,6 %) prípadoch. V troch prípadoch (2,2 %) bol pozitívny krvný test PCR u pacientov s RA kombinovaný s negatívnymi údajmi ELISA, čo sa považovalo za falošne negatívne výsledky enzýmového imunotestu. Dva (0,6 %) negatívne testy PCR boli sprevádzané pozitívnym záverom ELISA, keď reaktívna artritída, čo nám umožnilo interpretovať výsledok ako falošne pozitívny, tabuľka 3.
ELISA na vírus hepatitídy C bola vykonaná v študijnej skupine u 332 pacientov. Test bol pozitívny v 176 prípadoch (53 %) a negatívny v 139 (41,9 %), v 17 prípadoch boli výsledky testu nejednoznačné (5,1 %), tabuľka 2.
Tabuľka 2 – Frekvencia získania falošne pozitívnych a falošne negatívnych záverov pre vírus hepatitídy C pomocou metódy ELISA, keď rôzne choroby
Nozológia
Falošné pozitíva
Nozológia
Falošné negatívy
činnosť
Ako je zrejmé z tabuľky 2, najväčší počet falošne pozitívnych záverov (0,9 %) pre diagnostiku ELISA sme získali v skupine pacientov so SLE C a RA C, čo je podľa nášho názoru spôsobené prítomnosťou tzv. veľké množstvo cirkulujúcich imunitné komplexy a nedokonalosť techniky ELISA 1. a 2. generácie u pacientov s autoimunitná patológia.
Získané údaje naznačujú, že pri diagnostikovaní CHC na pozadí reumatických ochorení sa nemožno spoliehať na výsledky jedného testu. To všetko slúžilo ako predpoklad na porovnanie výsledkov rôznymi spôsobmi laboratórna diagnostika vírus hepatitídy C.
Vybrali sme 33 pacientov, ktorí nemali jednoznačnú interpretáciu a smer v záveroch ohľadom prítomnosti vírusu hepatitídy C v ELISA, PCR a imunohistochemickej diagnostike (tab. 3).
S použitím adaptovanej techniky PCR v tkanive bola vykonaná bioptická štúdia v prípadoch, keď laboratórna a sérologická diagnostika CHC neumožňovala spoľahlivo posúdiť prítomnosť vírusu hepatitídy C a klinickú diagnózu nebolo možné definitívne stanoviť.
Vo všeobecnosti sa zmeny v konečnej diagnóze zohľadňujúce výsledky molekulárnej diagnostiky bioptickej vzorky urobili u 15 pacientov zo 169 punktovaných pacientov, čo je 8,9 %.
Tabuľka 3 - Podiel sporných výsledkov testu HCV
Alarmujúca je najmä nadmerná diagnostika CHC pomocou testovacích systémov ELISA, v v tomto prípade máme do činenia buď s najviac skoré štádium CHC a jeho extrahepatálnej proliferácii, alebo s čistou nadmernou diagnózou tohto ochorenia. Existujúce rozdiely v záveroch sú spôsobené tým, že PCR nevyžaduje precipitáciu imunitných komplexov, ako pri testoch ELISA, preto prakticky neexistujú žiadne falošne pozitívne reakcie. Ako poznamenali niektorí autori 100 pacientov s RNA HCV protilátky triedy Ig M proti HCV boli zistené v 66 % prípadov, pričom zo 171 sér s negatívnymi údajmi PCR boli protilátky triedy Ig M proti HCV detegované v 45 prípadoch, čo naznačuje buď falošne pozitívne výsledky, alebo kolísajúcu virémiu, alebo extrahepatálnu replikáciu vírusu . V našej štúdii mali 4 pacienti (2 - SLE C, 1 - RA C, 1 - CHC) pozitívne testy na HCV RNA v krvi, ale negatívne testy v pečeňovom tkanive, čo môže byť aj potvrdenie extrahepatálnej replikácie vírusu , alebo skorá fáza priebeh CHC.
Senzitivita a špecifickosť testov na detekciu HCV v krvi a tkanivách je uvedená v tabuľke 4, z ktorej vyplýva, že molekulárne diagnostické metódy sú vysoko citlivé a špecifické.
Tabuľka 4 - Citlivosť a špecifickosť testov na detekciu HCV v krvi a tkanivách
Citlivosť (%)
Špecifickosť (%)
PCR v krvi
PCR v tkanive
Imunohistochémia
Berúc do úvahy veľké číslo rôznych autoprotilátok, metódy molekulárnej diagnostiky vírusových hepatitíd pomocou krvných testov sú opodstatnenejšie ako enzýmová imunoanalýza u osôb s CTD a overenie neštrukturálnych proteínov HCV v tkanivách je možné len pomocou metód molekulárnej diagnostiky (PCR v tkanive a imunohistochémia).
Záver
Ohnisková deštrukcia chrupavky a kostného tkaniva- hlavný mechanizmus poškodenia kĺbov pri RA. Pri udržiavaní zápalových zmien, ktoré sa vyskytujú počas reumatické ochorenia, významnú úlohu majú neutrofily a lymfocyty. Ukázalo sa, že prítomnosť nešpecifickej reaktivity neutrofilov odráža ich patogenetický význam a selektívnu rezistenciu voči HCV. Klinický obraz V mnohých prípadoch je CHC charakterizovaná nielen poškodením pečeňového tkaniva, ale aj rôznymi extrahepatálnymi prejavmi, ktoré môžu byť spôsobené mechanizmami imunitného komplexu. Kompletnejšie pochopenie patogenézy systémových prejavov u chronických vírusová infekcia pomôže preukázať skutočnosť extrahepatálnej replikácie vírusov hepatitídy, ktorá je potvrdená detekciou HCV antigénov v lymfocytoch pomocou vysoko špecifických metód PCR a imunohistochémie.
Molekulárne diagnostické metódy preukázali okrem pečene aj tropizmus HCV obličkové tkanivo a oba orgány sú postihnuté súčasne. Neštrukturálne HCV proteíny boli tiež nájdené v pľúcne tkanivo(bronchiálny epitel), lymfocyty periférnej krvi a portálnych ciest, epitel žlčových ciest. V klinicky nejednoznačných situáciách s vysoký stupeň hepatošpecifické enzýmy, je indikovaná morfologická štúdia biopsie pečene na overenie HCV v tkanivách. Imunohistochemické vyšetrenie bioptickej vzorky na kryptogénnu hepatitídu umožňuje diagnostikovať vírusová infekcia pečene, vrátane CHC, ktorá sa vyskytuje bez prítomnosti RNA – HCV v krvi. Na druhej strane PBP umožňuje vylúčiť diagnózu CHC. V skupine pacientov s CTD je metóda ELISA prijateľná najmä pre skríning jedincov na prítomnosť HCV a uprednostňujú sa molekulárne diagnostické metódy.
Literatúra
1. Ivaškin, V.T. Choroby kĺbov. propedeutika, odlišná diagnóza, liečba / V. T. Ivaškin, V. K. Sultanov. M.: Litterra, 2005. 544 s.
2. Sérum Hladiny HCV RNA korelujú s histologickým poškodením pečene a zhodujú sa so steatózou pri progresii chronickej hepatitídy C / L. Adinolfi // Dig. Dis. Sci. 2001. Zv. 46. č. 8. P. 1677-1683.
3. Zmiznutie HCV-RNA v sére po krátkodobej liečbe prednizolónom u pacienta s chronickou hepatitídou C spojenou so sérologickými prejavmi podobnými autoimunitnej hepatitíde / M. Yoshikawa // J. Gastroenterol. 1999. Vol. 34. Číslo 2. S. 269-274.
4. Falošne pozitívne anti-HCV testy pri reumatoidnej artritíde / L. Theilmann // Lancet. 1990. Vol. 335. Číslo 8701. S. 1346.
5. Amarapurkar, D.Úloha autoimunity pri nevírusovom chronickom ochorení pečene / D. Amarapurkar, A. Amarapurkar // J. Assoc. Lekári z Indie. 2000. Vol. 48. Číslo 11. S. 1064-1069.
6. Boyer, N. Patogenéza, diagnostika a liečba hepatitídy C / N. Boyer, P. Marcellin // J. Hepatol. 2000. Vol. 32. č.2. suppl. S. 98-112.
7. Andreas, C. Chisariho patogenéza chronickej hepatitídy C: Imunologické znaky poškodenia pečene a perzistencie vírusu / C. Andreas, V. Francis // Hepatológia. 1999. Vol. 30. Číslo 3. S. 595-601.
