हेपेटाइटिस सी के लिए सकारात्मक आईएफए। हेपेटाइटिस सी का प्रयोगशाला निदान। सामान्य संकेतक और व्याख्या

हेपेटाइटिस को पृथक किया गया है अलग समूह सूजन संबंधी बीमारियाँजिगर। उनके अलग-अलग एटियलजि और रूप हो सकते हैं। ऐसी बीमारियों के पहले संदेह पर, डॉक्टर उचित परीक्षण निर्धारित करते हैं। लेकिन चूंकि विकृतियों की प्रकृति अलग-अलग होती है, इसलिए वायरस का पता लगाने के तरीके भी अलग-अलग होते हैं।

सबसे आम तौर पर दर्ज किए गए हेपेटाइटिस वायरस ए, बी, सी, डी, ई, एफ, जी हैं, जो मात्रात्मक के कारण होते हैं विषाणुजनित संक्रमण. इसके अलावा, रोग के संकेतक कब देखे जा सकते हैं पीला बुखार, कण्ठमाला, एपस्टीन-बार रोग, हर्पीस, रूबेला, साइटोमेगालोवायरस, लासा बुखार, एड्स।

रक्तगुल्म निषेध

यह विधि कब कासंदर्भ विधि पर विचार किया गया। यह सरल, संवेदनशील और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है। यह सेरोपोसिटिविटी अध्ययन के लिए उपयुक्त विधि है। हालाँकि, यह विधि सीरोटाइप की पहचान नहीं करती है, और परस्पर प्रतिक्रियाएँअन्य फ़्लैविवायरस के साथ इसके उपयोग को सीमित करें। सामान्य तौर पर, दो अनुक्रमिक सीरा होना काफी दुर्लभ है, और निदान अक्सर पूर्वव्यापी होता है।

पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया

इस तकनीक का सिद्धांत सभी वायरस के लिए समान है। अत: इस पद्धति का हित सापेक्ष है।

हेपेटाइटिस के लिए एंजाइम इम्यूनोएसे

सेरोन्यूट्रलाइज़ेशन की सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली विधि वायरस के कारण होने वाले लाइसिस प्लाक को कम करना है। लेखकों के अनुसार, लसीका अंतराल के प्रतिशत का निषेध 50% या 90% पर निर्धारित है। 90% अवरोध आमतौर पर प्राथमिक संक्रमण के बराबर होता है, जबकि 50-70% अवरोध द्वितीयक बुखार से अधिक जुड़ा होता है। इसके अलावा, यह आपको प्राथमिक संक्रमण के दौरान वायरस के सीरोटाइप को निर्धारित करने की अनुमति देता है। यह संवेदनशील एवं विशिष्ट विधि है महत्वपूर्णटीके की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए।

जीवाणुजन्य कारणपैथोलॉजी का विकास सिफलिस, लेप्टोस्पायरोसिस, विषाक्त - शराब, नशीली दवाओं और रासायनिक नशा की उपस्थिति में देखा जाता है। हेपेटाइटिस के कारण भी होते हैं विकिरण बीमारीऔर ऑटोइम्यून पैथोलॉजी। इनमें से प्रत्येक प्रकार की विकृति के लिए उपचार के लिए एक व्यक्तिगत दृष्टिकोण की आवश्यकता होती है।

इसलिए, यदि रोगी के पास है नैदानिक ​​लक्षणरोग की स्थिति में, मार्करों के लिए रक्त परीक्षण निर्धारित किया जाता है विभिन्न प्रकार केरोग।

हालाँकि, यह महंगा है, समय लेने वाला है, इसे लागू करना कठिन है और इसके लिए सेल कल्चर नियंत्रण की आवश्यकता होती है। इसलिए, दिनचर्या में उनका प्रमुख स्थान है, भले ही वे विश्वसनीय निदान प्रदान नहीं करते हैं और वायरस की महामारी विज्ञान निगरानी के लिए आवश्यक सभी डेटा प्रदान नहीं करते हैं। दो सिद्धांत विकसित किए गए हैं: अप्रत्यक्ष तरीकेऔर इम्यूनोकैप्चर।

तालिका 1 डेंगू बुखार के सीरोलॉजिकल निदान के लिए उपयोग की जाने वाली प्रमुख व्यावसायिक किट। दुर्भाग्य से, दुनिया के अन्य क्षेत्रों, विशेषकर अन्य विदेशी क्षेत्रों में ऐसा नहीं है। उनकी उपस्थिति लगातार संक्रमण को स्थापित नहीं होने देती, लेकिन हालिया संक्रमण तीन महीने से कम का है। परिणामस्वरूप, स्वास्थ्यवर्धक सीरम का विश्लेषण करके निदान की पुष्टि करने की सिफारिश की जाती है।

हेपेटाइटिस के प्रकार (वायरल, गैर-वायरल, तीव्र, क्रोनिक या फैलाना) को सटीक रूप से निर्धारित करने के लिए, रोगियों को एंटीबॉडी के लिए रक्त दान करना चाहिए। लेकिन ऐसी प्रक्रिया अनिवार्यप्रारंभिक उच्च गुणवत्ता वाली तैयारी की आवश्यकता है।

इसलिए, विश्लेषण करने से पहले आपको निम्नलिखित बातों पर विचार करना चाहिए:

  1. रक्तदान खाली पेट करना चाहिए, क्योंकि पूरे दिन इसकी विशेषताएं काफी भिन्न होती हैं।
  2. अंतिम भोजन परीक्षण से कम से कम आठ घंटे पहले खाया जाना चाहिए। कॉफ़ी, जूस, चाय और अन्य समान पेय पीने की अनुमति नहीं है, केवल पानी पीने की अनुमति है।
  3. परीक्षण से दो दिन पहले तक आपको वसायुक्त या वसायुक्त भोजन नहीं खाना चाहिए। तले हुए खाद्य पदार्थ, शराब पीने।
  4. प्रक्रिया से पहले कई घंटों तक धूम्रपान वर्जित है।
  5. एक्स-रे, अल्ट्रासाउंड, मसाज, फिजियोथेरेपी के बाद भी हार नहीं मानता।
  6. प्रक्रिया से एक दिन पहले, दवाओं का उपयोग पूरी तरह से बंद कर दिया जाता है, शारीरिक और भावनात्मक तनाव कम हो जाता है।
  7. यदि रद्द करना संभव नहीं है दवाएं, विश्लेषण से पहले इन निधियों की सूची अलग से इंगित की जानी चाहिए।

लगातार दो सीरा प्राप्त करने की कठिनाई का सामना करते हुए, प्रयोगशालाएँ संदेह के लिए एक ही सकारात्मक खोज पर भरोसा करती हैं मामूली संक्रमण. यह जानकारी क्लिनिकल और फिजियोपैथोलॉजिकल अध्ययन के लिए उपयोगी है। संशोधित एलिज़ा को इम्युनोग्लोबुलिन के अन्य वर्गों का पता लगाने के लिए विकसित किया गया था। यह संग्रह, जो बच्चों या वंचित सेटिंग्स में आसान है, सेरोपोसिटिविटी के अध्ययन के लिए रुचिकर हो सकता है। अंत में, संक्रमण के लिए जिम्मेदार सीरोटाइप को निर्धारित करने के लिए एलिज़ा पद्धति को अपनाया गया।

वह अवधि जब हेपेटाइटिस के प्रकार की पुष्टि के लिए रक्त दान करना आवश्यक होता है, अलग-अलग होती है। इस प्रकार, समूह ए वायरस के मार्करों को पैथोलॉजी के पहले लक्षणों पर भी पहचाना जा सकता है, क्योंकि इसमें एंटीबॉडी की अधिकतम मात्रात्मक एकाग्रता तीस दिनों के भीतर देखी जाती है।

हेपेटाइटिस सी वायरस का पता संदिग्ध संक्रमण के डेढ़ महीने से पहले नहीं चलता है।

प्रत्यक्ष निदान विधियाँ

हालाँकि, यह विधि द्वितीयक डेंगू बुखार के मामलों में कम विश्वसनीय है।

वायरल एंटीजन का पता लगाना

प्रयोग मोनोक्लोनल प्रतिरक्षीविभिन्न फ्लेविवायरस के बीच क्रॉस-प्रतिक्रियाओं को कम करके विशिष्टता में सुधार करने की अनुमति दी गई। उनकी संवेदनशीलता और विशिष्टता का मूल्यांकन करने के लिए कई अध्ययन किए गए हैं विभिन्न मानदंडविश्लेषण: के साथ तुलना पारंपरिक तरीकेनिदान, संक्रमण के लिए जिम्मेदार सीरोटाइप, शुरुआत के बीच का समय चिकत्सीय संकेतऔर नमूना, रोगी की प्रतिरक्षा स्थिति, या रोग की गंभीरता।

आप वायरस के लिए अस्पताल में रक्तदान कर सकते हैं या घर पर डॉक्टर को बुला सकते हैं। किसी भी मामले में, प्रक्रिया के दौरान, चिकित्सक को आवश्यक बाँझ उपायों का पालन करना चाहिए, अर्थात डिस्पोजेबल सामग्री और उपकरणों का उपयोग करना चाहिए।

विश्लेषण के लिए रक्तदान करने का क्रम:

  1. बांह के अग्र भाग में मेडिकल टूर्निकेट से पट्टी बांधी गई है। इसके कारण, वाहिका में रक्त की गति रुक ​​जाती है और कोहनी क्षेत्र में नस का भाग उत्तल हो जाता है। डॉक्टर इस स्थान पर सुई डालेंगे।
  2. रक्त से भरे कोहनी मोड़ के क्षेत्र को शराब में भिगोए कपास झाड़ू से अच्छी तरह से कीटाणुरहित किया जा सकता है।
  3. एक सुई को सिरिंज से जोड़ा जाता है और नस में डाला जाता है। इसके तुरंत बाद, टूर्निकेट को हटा दिया जाता है।
  4. तरल की आवश्यक मात्रा का चयन होने के बाद, सुई को बर्तन से हटा दिया जाता है, और शराब में भिगोया हुआ कपास झाड़ू घाव पर लगाया जाता है। रक्तस्राव को तुरंत रोकने और हेमेटोमा के गठन को रोकने के लिए, इसे मजबूती से दबाया जाता है, फिर हाथ को मोड़कर शरीर के खिलाफ झुका दिया जाता है।

दरअसल, के अनुसार बहुकेन्द्रीय अध्ययनगुज़मैन एट अल। पैन-ई और प्लैटिलिया किट की संवेदनशीलता क्रमशः 52 और 66% है। इसलिए, डेंगू बुखार के जैविक निदान के लिए इस पद्धति का सटीक स्थान निर्धारित करने के लिए मानकीकरण और भविष्य के मूल्यांकन की आवश्यकता है। इसकी गति और कार्यान्वयन में आसानी के कारण, इसका उपयोग संदिग्ध गंभीर डेंगू बुखार के लिए अस्पताल में भर्ती मरीजों की आपातकालीन जांच के लिए किया जा सकता है। वांग और सेकरन के अध्ययन में पाया गया कि किट, जिसका उपयोग पूरे रक्त पर भी किया जा सकता है, में 88.6% की संवेदनशीलता और 98.7% सीरम की विशिष्टता थी।

सामान्य संकेतक और व्याख्या

हेपेटाइटिस ए वायरस का निर्धारण करने के लिए, आईजी जी वायरस मार्करों की पहचान करने के लिए एक इम्यूनोकेमिलिमिनसेंट विधि का उपयोग किया जाता है। मानक 1 एस/सीओ से कम है। यदि परिणाम अधिक हैं, तो यह वायरस या पिछली बीमारी की उपस्थिति का संकेत दे सकता है।

हेपेटाइटिस बी मार्कर एलजी एम एंटीबॉडी की उपस्थिति से निर्धारित होता है। उनका कोई भी मात्रात्मक मान हेपेटाइटिस बी के निदान की पुष्टि का आधार है।

ये भी हो सकता है बडा महत्वडेंगू बुखार के गैर-स्थानिक क्षेत्रों में निदान के लिए। सकारात्मक परिणामआपको और अधिक करने की अनुमति देता है शीघ्र निदानसीरोलॉजी और बेहतर चिकित्सा प्रबंधन की तुलना में। तथापि नकारात्मक परिणामआणविक जीव विज्ञान तकनीकों का उपयोग करके निरंतर निदान करना चाहिए, क्योंकि "झूठी नकारात्मक" का जोखिम नगण्य नहीं है।

चार विधियाँ हैं: नवजात चूहों का इंट्रासेरेब्रल टीकाकरण, स्तनधारी कोशिका रेखाओं पर संवर्धन, मच्छरों का अंतर्गर्भाशयी टीकाकरण, और कोश पालनमच्छर, जिनमें से अंतिम दो सबसे संवेदनशील हैं। इन कोशिकाओं को सीरम, प्लाज्मा, जैविक तरल पदार्थ या ऊतक अर्क से टीका लगाया जाता है। वायरल कल्चर बहुत कम विरेमिया से प्रभावित हो सकता है, जो संग्रह और नैदानिक ​​लक्षणों की शुरुआत के बीच की देरी पर निर्भर करता है: आदर्श रूप से यह समय पांच दिनों से कम और जितनी जल्दी हो सके होना चाहिए।

हेपेटाइटिस सी वायरस का निदान एलिसा का उपयोग करके किया जाता है। आम तौर पर, एंटी-एचसीवी एंटीबॉडी अनुपस्थित होनी चाहिए। यदि उनका पता चल जाता है, तो दोबारा परीक्षण की आवश्यकता होती है। अगर अतिरिक्त शोधएक सकारात्मक परिणाम दिया, हेपेटाइटिस सी वायरस की पुष्टि की गई है।

मार्करों हेपेटाइटिस डी-जीके माध्यम से भी स्थापित किये गये हैं एंजाइम इम्यूनोपरख. वायरस और उनके पुनः संयोजकों के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति के मामले में, दो सकारात्मक नमूनों के बाद निदान की पुष्टि की जाती है।

सभी वायरस की तरह, निष्कर्षण चरण आज वाणिज्यिक और स्वचालित किट के रूप में उपलब्ध है। तकनीक को एक चरण और एक ट्यूब में अनुकूलित किया गया है, जिससे यह संदूषण के कम जोखिम के साथ तेज हो गई है और साथ ही समतुल्य या बेहतर संवेदनशीलता भी बनी हुई है। यह संपूर्ण रक्त या परिधीय रक्त कोशिकाओं के उपयोग के लिए भी अभिप्रेत है।

प्रारंभ में, इन प्रोटोकॉल में कई चरणों और एक ट्यूब प्रकार प्राइमर जोड़ी, प्रति नमूना चार ट्यूब का उपयोग किया गया था। फिर जोड़-तोड़ को सरल बनाया गया ताकि प्रति नमूना केवल एक चरण और एक ट्यूब हो। इसे एक साथ कई नमूनों को संसाधित करने और तरीकों की संवेदनशीलता को सीमित किए बिना क्रॉस-संदूषण के जोखिम को काफी कम करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। अधिकांश अध्ययनों में सीधे तौर पर चार सीरोटाइप के लिए विशिष्ट प्राइमर या जांच का उपयोग किया गया।

विषैले, स्वप्रतिरक्षी, विकिरण की परिभाषा, अर्थात् नहीं वायरल हेपेटाइटिसजरा हटके।

ऐसे मामलों में, निदान की पुष्टि के अप्रत्यक्ष तरीकों का उपयोग किया जाता है:

  1. फाइब्रिनोजेन परीक्षण. इस प्रोटीन का मान 1.8 - 3.5 ग्राम/लीटर की सीमा में है। कम संख्या हेपेटाइटिस और यकृत ऊतक क्षति का संकेत देती है।
  2. एएसटी और एएलटी के लिए परीक्षण। एएसटी के लिए मानक 0 से 75 यू/एल तक है, एएलटी के लिए लगभग 50 यू/एल तक है। संकेतकों में मात्रात्मक वृद्धि रोग की उपस्थिति को इंगित करती है।
  3. बिलीरुबिन के लिए विश्लेषण. सामान्य सीमा 5-21 µmol/l है। बड़ी संख्या पैथोलॉजी के विकास को इंगित करती है।
  4. कुल मट्ठा प्रोटीन. वयस्कों के लिए मानक 66 - 83 ग्राम/लीटर है; यदि संख्यात्मक मान कम है, तो यह एल्ब्यूमिन में कमी, यानी एक बीमारी की उपस्थिति को इंगित करता है।

ऑटोइम्यून हेपेटाइटिस की पुष्टि के लिए लीवर बायोप्सी की सूक्ष्म जांच की जाती है। यह विश्लेषण हमें मात्रात्मक की पहचान करने की अनुमति देता है विशिष्ट घावअंग। ऐसा करने के लिए, एक विशेष सुई का उपयोग करके यकृत ऊतक का एक टुकड़ा लिया जाता है। फिर सामग्री को विशेष अभिकर्मकों से उपचारित किया जाता है और माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। इसके अलावा, ऑटोइम्यून हेपेटाइटिस की पुष्टि की जाती है यदि विश्लेषण कहता है कि गामा ग्लोब्युलिन जी का स्तर 1.5 गुना अधिक है और जब उच्च अनुमापांक में एंटी-स्मूथ मांसपेशी, एंटी-न्यूक्लियर, एंटी-माइटोकॉन्ड्रियल एंटीबॉडी का अनुपात 1:80 से अधिक होता है।

फिर जोड़-तोड़ सिम्प्लेक्स, डुप्लेक्स या क्वाड्रिप्लेक्स होते हैं। अन्य लोगों ने सर्वसम्मत प्राइमरों का उपयोग करना चुना है। वे निस्संदेह परीक्षण नमूनों के चयन की विधि पर निर्भर करते हैं। कई कार्य इस विकल्प को चुनने के लिए सीरोलॉजी का उपयोग करते हैं। परिणामस्वरूप, जो अध्ययन सबसे कम संवेदनशीलता प्रदान करते हैं वे वे हैं जो नमूने के लिए सीरोलॉजी पर निर्भर होते हैं। 70 से अधिक रोगियों और प्रति सीरोटाइप एक दर्जन से अधिक नमूनों का परीक्षण करने वाला केवल एक अध्ययन सभी सीरोटाइप के लिए 85% से अधिक की संवेदनशीलता दर्शाता है।

इसके अलावा, इस निदान के साथ, रोगी में यकृत ऊतक में सूजन और यकृत विफलता के लक्षण दिखाई देते हैं।

केवल एक अनुभवी विशेषज्ञ ही विश्लेषण को समझने की सभी बारीकियों को जान सकता है, उदाहरण के लिए, एक अलग मात्रात्मक वृद्धि कुल प्रोटीनयह आवश्यक रूप से यकृत रोग की पुष्टि नहीं है, और एल्ब्यूमिन में कमी गुर्दे की विकृति का संकेत दे सकती है।

सामान्य तौर पर, विभिन्न प्रकाशनों में बताए गए संवेदनशीलता के परिणाम ख़राब होते हैं और परीक्षण किए गए नमूनों की संख्या कम होती है, जिसमें अक्सर चार सीरोटाइप के बीच असंतुलन होता है। निर्धारण पैरामीटर नैदानिक ​​लक्षणों की शुरुआत और नमूने के बीच का समय है। प्राथमिक संक्रमण के दौरान विरेमिया अधिक और अधिक टिकाऊ होता है।

केवल दो प्रयोगशालाओं को अधिकतम अंक प्राप्त हुए। परिणामों से पता चला कि डेंगू बुखार के आणविक निदान में 28 प्रयोगशालाओं में सुधार की आवश्यकता है। केवल पाँच विधियाँ संवेदनशीलता और विशिष्टता के सभी मानदंडों को पूरा करती हैं, जबकि चार अन्य ने स्वीकार्य परिणाम प्राप्त किए हैं। इससे प्राप्त परिणाम एक प्रयोगशाला से दूसरी प्रयोगशाला में भिन्न-भिन्न होते हैं।

अतिरिक्त परीक्षण

केवल एक रक्त परीक्षण हमेशा किसी को सही ढंग से निदान स्थापित करने और पता लगाने की अनुमति नहीं देता है सटीक कारणरोग। कुछ मामलों में, ब्रोमसल्फेलिन परीक्षण किया जाता है। यह अध्ययन आपको लीवर की कार्यप्रणाली का विश्लेषण करने की अनुमति देता है।

ब्रोमसल्फेलिन को रक्त में पेश किया जाता है, वहां से यह यकृत में प्रवेश करता है, फिर पित्त में प्रवेश करता है और उत्सर्जित होता है सहज रूप में. इसके अलावा, यदि किसी विकृति का संदेह है, तो अल्ट्रासाउंड जांचजिगर। इससे अंग का आकार (बड़ा हुआ या नहीं), उसके ऊतकों की विविधता (फाइब्रोसिस, हाइपरट्रॉफी, आदि की उपस्थिति), और आकृति की अशुद्धि निर्धारित करना संभव हो जाएगा। ऐसे परिवर्तन बिल्कुल हेपेटाइटिस की विशेषता हैं।

आज बाजार में कई किट उपलब्ध हैं और उनके परिणाम निराशाजनक ही रहे हैं। मूल्यांकन दिशानिर्देश हाल ही में प्रकाशित किए गए हैं नैदानिक ​​परीक्षणडेंगू बुखार। मार्टीनिक में डेंगू बुखार मौसमी चोटियों के साथ एक स्थानिक महामारी है और महामारी के दौरान रोगियों की भारी आमद होती है आपातकालीन क्षण. हम बुखार शुरू होने की तारीख के आधार पर एक डायग्नोस्टिक एल्गोरिदम का उपयोग करते हैं।

सीरोलॉजिकल परीक्षण केवल निदान के लिए उपयोगी होते हैं देर से मंचसंक्रमण. इसलिए, डेंगू बुखार के निदान के लिए आणविक जीवविज्ञान विधियां पसंद का उपकरण हैं अत्यधिक चरण. हालाँकि, उनकी संवेदनशीलता और विशिष्टता अभी भी इष्टतम नहीं है और उन्हें मानकीकृत करने की आवश्यकता है। चतुर्भुज टीका विकास में प्रगति से डेंगू बुखार पर बेहतर नियंत्रण का पता चलता है और बड़े पैमाने पर प्रभावकारिता परीक्षणों के परिणाम वर्तमान में लंबित हैं।

आजकल किसी वायरस की पहचान करने के लिए अक्सर इस पद्धति का उपयोग किया जाता है। आणविक निदान, पोलीमरेज़ की तरह श्रृंखला अभिक्रिया(पीसीआर)। इसका फायदा यह है उच्च संवेदनशील, जिसका अर्थ है महान सटीकता।

यह परीक्षण एंजाइम क्रिया के माध्यम से डीएनए या आरएनए के एक विशिष्ट भाग को बार-बार कॉपी करने पर आधारित है। परिणामस्वरूप, आनुवंशिक श्रृंखला के डुप्लिकेट खंड बनते हैं, जिससे रोगज़नक़ की थोड़ी मात्रा का भी पता लगाया जा सकता है।

पीसीआर अध्ययन हमें वायरस की पहचान करने और निदान करने की अनुमति देता है सटीक निदानबस कुछ ही घंटों में. यह विधि रोगज़नक़ की पहचान करती है, जबकि अन्य परीक्षण केवल वायरस के प्रति शरीर की प्रतिक्रिया निर्धारित करते हैं। लेकिन इस विधि की अपनी कमियां भी हैं। सभी अध्ययन केवल बाँझ परिस्थितियों में ही किए जाने चाहिए। यहां तक ​​कि थोड़ा सा भी संदूषण परिणामों को प्रभावित कर सकता है।

इसके अलावा, आनुवंशिकी के क्षेत्र में व्यापक अनुभव वाला केवल एक चिकित्सक ही ऐसे परीक्षण और डिकोडिंग कर सकता है।

उपरोक्त सभी कारकों को ध्यान में रखते हुए, यह नहीं कहा जा सकता कि पीआरसी पद्धति हमेशा सटीक होती है। वह दिखा सकता है ग़लत परिणामसकारात्मक और नकारात्मक दोनों दिशाओं में।

वायरल प्रकार के हेपेटाइटिस के उच्च गुणवत्ता वाले उपचार के लिए, इम्युनोमोड्यूलेटर और विषाणु-विरोधी. लेकिन चूंकि इन दवाओं का शरीर पर काफी मजबूत प्रभाव पड़ता है, इसलिए उन्हें निर्धारित करने से पहले, डॉक्टर को पूरी तरह से आश्वस्त होना चाहिए कि पैथोलॉजी का कारण एक वायरल संक्रमण है। इसलिए उन्हें नियुक्त किया जा सकता है अतिरिक्त परीक्षणऔर अनुसंधान.

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सीएचसी के आणविक और एलिसा निदान के परिणामों की तुलना

नैदानिक ​​​​और प्रयोगशाला परीक्षणों की अपर्याप्त सूचना सामग्री के कारण, यदि एचसीजी पर संदेह है और आमवाती रोगों वाले रोगियों की जांच के पहले चरण में इसका उपयोग किया जाता है, तो यह विशेष प्रासंगिकता का है विषाणु विज्ञान अध्ययनएंजाइम इम्यूनोएसे और पीसीआर का उपयोग करके रक्त सीरम।

जैसा कि कुछ लेखक बताते हैं, उपलब्ध एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख के साथ, गलत-सकारात्मक परिणाम संभव हैं, जो अक्सर विश्लेषण किए गए नमूने में सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज के एंटीबॉडी की उपस्थिति का परिणाम होता है, जिसके साथ c100-3 को संश्लेषित किया जाता है। पुनः संयोजक खमीर कोशिकाएं, जिसका उपयोग एचसीवी की पहचान के लिए एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परीक्षण प्रणालियों में एनीजन के रूप में किया जाता है। प्रणालीगत बीमारियों के कारण हाइपरगैमाग्लोबुलिनमिया से भी परीक्षण के परिणाम प्रभावित होते हैं संयोजी ऊतक, हाल के टीकाकरण (विशेषकर खसरे के लिए), क्रायोग्लोबुलिनमिया, क्योंकि एचसीवी क्रायोप्रेसिपिटेट बना सकता है। की सूचना दी गलत सकारात्मक परिणामनमूनों को बार-बार डीफ़्रॉस्ट करने के बाद या अस्थिर तापमान पर दीर्घकालिक भंडारण के बाद। एचसीवी के प्रति एंटीबॉडी संक्रमण के क्षण से औसतन 8 से 20 सप्ताह में या कुछ रोगियों में हेपेटाइटिस की शुरुआत से 15 सप्ताह में बनती हैं, एंटीबॉडी बनने में लगभग एक वर्ष लगता है; एचसीवी के प्रति एंटीबॉडी की अनुपस्थिति एचसीवी के निदान को बाहर नहीं करती है। इसके अलावा, क्रोनिक एचसीवी वाले 20% मरीज सेरोनिगेटिव हो सकते हैं, क्योंकि उनमें इम्युनोडेफिशिएंसी या इम्यूनोस्प्रेसिव थेरेपी के कारण एंटी-एचसीवी एंटीबॉडी के कम टाइटर्स होते हैं।

हमने 44 मामलों में पैराफिन वर्गों में यकृत ऊतक का पीसीआर किया, जिनमें से 23 (52.3%) में एक नकारात्मक परिणाम दर्ज किया गया, 20 (45.5%) में - सकारात्मक, एक मामले में (2.3%) एक नकारात्मक पीसीआर परिणाम दर्ज किया गया। रोगी के रक्त में सकारात्मक पीसीआर वाले ऊतक में, जिसकी हमने व्याख्या की शुरुआती समयआरए की पृष्ठभूमि पर वायरल हेपेटाइटिस सी।

136 रक्त पीसीआर अध्ययनों में से, 74 रोगियों (54.4%) में परीक्षण सकारात्मक और 62 (45.6%) मामलों में नकारात्मक था। तीन मामलों (2.2%) में, आरए के रोगियों में एक सकारात्मक पीसीआर रक्त परीक्षण को नकारात्मक एलिसा डेटा के साथ जोड़ा गया था, जिसे एंजाइम इम्यूनोएसे के गलत नकारात्मक परिणाम माना गया था। दो (0.6%) नकारात्मक पीसीआर परीक्षणों के साथ एक सकारात्मक एलिसा निष्कर्ष भी आया प्रतिक्रियाशील गठिया, जिसने हमें परिणाम को गलत सकारात्मक के रूप में व्याख्या करने की अनुमति दी, तालिका 3।

अध्ययन समूह में 332 रोगियों में हेपेटाइटिस सी वायरस के लिए एलिसा परीक्षण किया गया। 176 मामलों में परीक्षण सकारात्मक (53%) और 139 (41.9%) में नकारात्मक था, 17 मामलों में परीक्षण के परिणाम गोलमोल (5.1%) थे, तालिका 2।

तालिका 2 - एलिसा द्वारा हेपेटाइटिस सी वायरस के लिए गलत-सकारात्मक और गलत-नकारात्मक निष्कर्ष प्राप्त करने की आवृत्ति जब विभिन्न रोग

नाउज़लजी

झूठी सकारात्मक

नाउज़लजी

झूठी नकारात्मक बातें

गतिविधि

जैसा कि तालिका 2 से देखा जा सकता है, एलिसा डायग्नोस्टिक्स के लिए सबसे बड़ी संख्या में गलत-सकारात्मक निष्कर्ष (0.9%) एसएलई सी और आरए सी वाले रोगियों के समूह में प्राप्त किए गए थे, जो हमारी राय में, की उपस्थिति के कारण है। बड़ी संख्या में घूम रहा है प्रतिरक्षा परिसरोंऔर रोगियों के लिए पहली और दूसरी पीढ़ी की एलिसा तकनीक की अपूर्णता ऑटोइम्यून पैथोलॉजी.

प्राप्त आंकड़ों से संकेत मिलता है कि आमवाती रोगों की पृष्ठभूमि के खिलाफ सीएचसी का निदान करते समय, कोई एक परीक्षण के परिणामों पर भरोसा नहीं कर सकता है। यह सब परिणामों की तुलना के लिए एक शर्त के रूप में कार्य करता है विभिन्न तरीकों सेहेपेटाइटिस सी वायरस का प्रयोगशाला निदान।

हमने 33 रोगियों का चयन किया जिनके पास एलिसा, पीसीआर और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल डायग्नोस्टिक्स (तालिका 3) में हेपेटाइटिस सी वायरस की उपस्थिति के संबंध में निष्कर्षों में स्पष्ट व्याख्या और दिशा नहीं थी।

ऊतक में एक अनुकूलित पीसीआर तकनीक का उपयोग करते हुए, उन मामलों में बायोप्सी अध्ययन किया गया जहां सीएचसी की प्रयोगशाला और सीरोलॉजिकल निदान ने हेपेटाइटिस सी वायरस की उपस्थिति का विश्वसनीय रूप से न्याय करना संभव नहीं बनाया और नैदानिक ​​​​निदान निश्चित रूप से स्थापित नहीं किया जा सका।

सामान्य तौर पर, बायोप्सी नमूने के आणविक निदान के परिणामों को ध्यान में रखते हुए अंतिम निदान में परिवर्तन 169 पंचर रोगियों में से 15 रोगियों में किए गए, जो कि 8.9% है।

तालिका 3 - विवादित एचसीवी परीक्षण परिणामों का अनुपात

विशेष रूप से चिंताजनक एलिसा परीक्षण प्रणालियों का उपयोग करके सीएचसी का अति निदान है इस मामले मेंहम या तो सबसे अधिक के साथ व्यवहार कर रहे हैं प्राथमिक अवस्थासी.एच.सी. और इसके असाधारण प्रसार, या शुद्ध अति निदान के साथ इस बीमारी का. निष्कर्षों में मौजूदा मतभेद इस तथ्य के कारण हैं कि पीसीआर को एलिसा परीक्षणों की तरह, प्रतिरक्षा परिसरों की वर्षा की आवश्यकता नहीं होती है, इसलिए व्यावहारिक रूप से कोई झूठी-सकारात्मक प्रतिक्रिया नहीं होती है। जैसा कि आरएनए वाले 100 रोगियों के कुछ लेखकों ने उल्लेख किया है एचसीवी एंटीबॉडीज 66% मामलों में क्लास आईजी एम से एचसीवी का पता चला, जबकि नकारात्मक पीसीआर डेटा वाले 171 सीरा में से 45 मामलों में एचसीवी के लिए क्लास आईजी एम एंटीबॉडी का पता चला, जो या तो गलत सकारात्मक परिणाम, या उतार-चढ़ाव वाले विरेमिया, या एक्स्ट्राहेपेटिक वायरल प्रतिकृति का संकेत देता है। . हमारे अध्ययन में, 4 रोगियों (2 - एसएलई सी, 1 - आरए सी, 1 - सीएचसी) के रक्त में एचसीवी आरएनए के लिए सकारात्मक परीक्षण थे, लेकिन यकृत ऊतक में नकारात्मक परीक्षण, जो वायरस के एक्स्ट्राहेपेटिक प्रतिकृति की पुष्टि भी हो सकता है। , या प्रारंभिक चरणसी.एच.सी. का कोर्स.

रक्त और ऊतकों में एचसीवी का पता लगाने के लिए परीक्षणों की संवेदनशीलता और विशिष्टता तालिका 4 में प्रस्तुत की गई है, जिससे यह पता चलता है कि आणविक निदान विधियां अत्यधिक संवेदनशील और विशिष्ट हैं।

तालिका 4 - रक्त और ऊतकों में एचसीवी का पता लगाने के लिए परीक्षणों की संवेदनशीलता और विशिष्टता

संवेदनशीलता (%)

विशिष्टता (%)

खून में पीसीआर

ऊतक में पीसीआर

इम्युनोहिस्टोकैमिस्ट्री

मानते हुए बड़ी संख्याविभिन्न स्वप्रतिपिंड, रक्त परीक्षणों का उपयोग करके वायरल हेपेटाइटिस के आणविक निदान के तरीके सीटीडी वाले व्यक्तियों में एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख की तुलना में अधिक उचित हैं, और ऊतकों में एचसीवी के गैर-संरचनात्मक प्रोटीन का सत्यापन केवल आणविक निदान विधियों (ऊतक में पीसीआर) का उपयोग करके संभव है। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री)।

निष्कर्ष

उपास्थि का फोकल विनाश और हड्डी का ऊतक- आरए में संयुक्त क्षति का प्रमुख तंत्र। के दौरान होने वाले सूजन संबंधी परिवर्तनों को बनाए रखने में आमवाती रोग, एक महत्वपूर्ण भूमिका न्यूट्रोफिल और लिम्फोसाइटों की है। यह दिखाया गया है कि न्यूट्रोफिल की गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाशीलता की उपस्थिति उनके रोगजनक महत्व और एचसीवी के लिए चयनात्मक प्रतिरोध को दर्शाती है। नैदानिक ​​तस्वीरकई मामलों में, सीएचसी की विशेषता न केवल यकृत ऊतक को नुकसान है, बल्कि विभिन्न अतिरिक्त अभिव्यक्तियां भी हैं, जो प्रतिरक्षा जटिल तंत्र के कारण हो सकती हैं। क्रोनिक में प्रणालीगत अभिव्यक्तियों के रोगजनन की अधिक संपूर्ण समझ विषाणुजनित संक्रमणहेपेटाइटिस वायरस की एक्स्ट्राहेपेटिक प्रतिकृति के तथ्य को स्थापित करने में मदद मिलेगी, जिसकी पुष्टि अत्यधिक विशिष्ट पीसीआर और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री विधियों का उपयोग करके लिम्फोसाइटों में एचसीवी एंटीजन का पता लगाने से होती है।

आणविक निदान विधियों ने यकृत के अलावा एचसीवी के ट्रॉपिज़्म को भी स्थापित किया है गुर्दे का ऊतक, और दोनों अंग एक साथ प्रभावित होते हैं। गैर-संरचनात्मक प्रोटीनमें एचसीवी भी पाया गया फेफड़े के ऊतक(ब्रोन्कियल एपिथेलियम), परिधीय रक्त और पोर्टल पथ के लिम्फोसाइट्स, पित्त नलिकाओं के उपकला। चिकित्सकीय रूप से अस्पष्ट स्थितियों में उच्च स्तरहेपेटोस्पेसिफिक एंजाइम, ऊतकों में एचसीवी को सत्यापित करने के लिए यकृत बायोप्सी के एक रूपात्मक अध्ययन का संकेत दिया जाता है। क्रिप्टोजेनिक हेपेटाइटिस के लिए बायोप्सी नमूने की इम्यूनोहिस्टोकेमिकल जांच से निदान करना संभव हो जाता है विषाणुजनित संक्रमणलीवर, जिसमें सी.एच.सी. भी शामिल है, जो रक्त में आरएनए-एचसीवी की उपस्थिति के बिना होता है। दूसरी ओर, पीबीपी किसी को सीएचसी के निदान को बाहर करने की अनुमति देता है। सीटीडी वाले रोगियों के समूह में, एचसीवी की उपस्थिति के लिए स्क्रीनिंग विषयों के लिए एलिसा विधि मुख्य रूप से स्वीकार्य है, और आणविक निदान विधियों को प्राथमिकता दी जानी चाहिए।

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