La structure et les principales parties d'un microscope optique. Types de microscopes : description, principales caractéristiques, fonction. En quoi un microscope électronique est-il différent d'un microscope optique ? Apprenez les parties d'une description de microscope

Cours de laboratoire de botanique n°1

Sujet : « Structure d'un microscope. Préparation des préparations temporaires. La structure d'une cellule végétale. Plasmolyse et déplasmolyse.

Objectif : 1. Étudier la structure d'un microscope (marques - MBR, MBI, Biolam), la fonction de ses pièces. Apprenez les règles du travail avec un microscope.

• 2. Apprenez la technique de préparation des préparations temporaires.
• 3. Étudier les principaux composants structurels d'une cellule végétale : membrane, cytoplasme, noyau, plastes.
• 4. Familiarisez-vous avec le phénomène de plasmolyse et de déplasmolyse.
• 5. Apprenez à comparer les cellules de différents tissus entre elles, à y trouver des caractéristiques identiques et différentes.

Matériel : microscope, kit de microcopie, solution de chlorure de sodium ou de saccharose, solution d'iode dans l'iodure de potassium, bandes de papier filtre, glycérine, bleu de méthylène, tranches de pastèque, tomate, oignon anthocyanique. cellule de préparation de microscope

• 1. Familiarisez-vous avec la conception du microscope biologique MBR-1 ou Biolam. Notez le but des parties principales.
• 2. Familiarisez-vous avec la conception des microscopes stéréoscopiques MBS-1.
• 3. Notez les règles pour travailler avec un microscope.
• 4. Apprenez la technique de réalisation des préparations temporaires.
• 5. Réalisez une préparation de l'épiderme à partir d'écailles d'oignon juteuses et examinez à faible grossissement une coupe de l'épiderme constituée d'une seule couche de cellules avec des noyaux bien visibles.
• 6. Étudiez la structure de la cellule à fort grossissement, d'abord dans une goutte d'eau, puis dans une solution d'iode dans de l'iodure de potassium.
• 7. Induire la plasmolyse dans les cellules de cochenilles d'oignon en traitant avec une solution de chlorure de sodium. Passer ensuite à un état de déplasmolyse. Esquisser.

Remarques générales

Un microscope biologique est un appareil avec lequel vous pouvez examiner diverses cellules et tissus d'un organisme végétal. La conception de cet appareil est assez simple, mais une mauvaise utilisation du microscope entraîne des dommages. C'est pourquoi il est nécessaire de comprendre la structure d'un microscope et les règles de base pour travailler avec lui. Dans un microscope de n'importe quelle marque, on distingue les parties suivantes : optique, éclairage et mécanique. La partie optique comprend : les lentilles et les oculaires.

Les lentilles servent à agrandir l'image d'un objet et consistent en un système de lentilles. Le degré de grossissement de l'objectif dépend directement du nombre d'objectifs. Un objectif à fort grossissement comporte 8 à 10 lentilles. La première lentille faisant face à la préparation est appelée lentille frontale. Le microscope MBR-1 est équipé de trois lentilles. Le grossissement de l'objectif y est indiqué par des chiffres : 8x, 40x, 90x. L'état de fonctionnement de la lentille est distingué, c'est-à-dire la distance entre le verre de protection et la lentille frontale. La distance de travail avec un objectif 8x est de 13,8 mm, avec un objectif 40x - 0,6 mm, avec un objectif 90x - 0,12 mm. Il est nécessaire de manipuler les lentilles à fort grossissement avec beaucoup de soin et de précaution afin de ne pas endommager la lentille frontale de quelque manière que ce soit. À l'aide d'une lentille dans un tube, une image agrandie, réelle mais inversée d'un objet est obtenue et les détails de sa structure sont révélés. L'oculaire sert à agrandir l'image provenant de l'objectif et se compose de 2 à 3 lentilles montées dans un cylindre métallique. Le grossissement de l'oculaire y est indiqué par les chiffres 7x, 10x, 15x.

Pour déterminer le grossissement total, multipliez le grossissement de l'objectif par le grossissement de l'oculaire.

Le dispositif d'éclairage se compose d'un miroir, d'un condenseur avec un diaphragme à iris et est conçu pour éclairer un objet avec un faisceau de lumière.

Un miroir sert à collecter et à diriger les rayons de lumière tombant du miroir sur un objet. Le diaphragme à iris est situé entre le miroir et le condenseur et est constitué de fines plaques métalliques. Le diaphragme sert à réguler le diamètre du flux lumineux dirigé par le miroir à travers le condenseur vers l'objet.

Le système mécanique du microscope se compose d'un support pour micro et macrovis, d'un porte-tube, d'un revolver et d'une platine. La vis micrométrique sert à déplacer légèrement le porte-tube et la lentille sur des distances mesurées en micromètres (μm). Un tour complet de la microvis déplace le porte-tube de 100 microns, et un tour d'une division de 2 microns. Pour éviter d'endommager le mécanisme du micromètre, il est permis de tourner la vis du micromètre sur le côté d'un demi-tour maximum.

Une macrovis permet de déplacer significativement le porte-tube. Il est généralement utilisé lors de la mise au point d'un objet à faible grossissement. Les oculaires sont insérés dans le tube-cylindre par le haut. Le revolver est conçu pour changer rapidement les objectifs vissés dans ses supports. La position centrée de l'objectif est assurée par un loquet situé à l'intérieur du revolver.

La table à objets est conçue pour y déposer un médicament, qui y est fixé à l'aide de deux verrous.

Règles pour travailler avec un microscope

• 1. Essuyez la partie optique du microscope avec un chiffon doux.
• 2. Placez le microscope au bord de la table de manière à ce que l'oculaire soit face à l'œil gauche de l'expérimentateur et ne déplacez pas le microscope pendant le fonctionnement. Le cahier et tous les éléments nécessaires au travail sont placés à droite du microscope.
• 3. ouvrez complètement l'ouverture. Le condenseur est placé en position semi-abaissée.
• 4. À l'aide d'un miroir, réglez le « rayon » du soleil en regardant dans le trou de la table des objets. Pour ce faire, la lentille du condenseur située sous l'ouverture de la scène doit être bien éclairée.
• 5. Déplacez le microscope à faible grossissement (8x) en position de travail - installez l'objectif à une distance de 1 cm de la platine et, en regardant à travers l'oculaire, vérifiez l'éclairage du champ de vision. Il doit être bien éclairé.
• 6. L'objet étudié est placé sur la scène et le tube du microscope est lentement soulevé jusqu'à ce qu'une image claire apparaisse. Passez en revue l’intégralité du médicament.
• 7. Pour étudier n'importe quelle partie d'un objet à fort grossissement, placez d'abord cette zone au centre du champ de vision d'un petit objectif. Après cela, tournez le revolver pour que l'objectif 40x prenne la position de travail (ne soulevez pas l'objectif !). À l'aide d'un microscope, une image claire d'un objet est obtenue.
• 8. Une fois le travail terminé, transférez le revolver d'un grossissement élevé à un grossissement faible. L'objet est retiré de la table de travail et le microscope est placé dans un état inopérant.

Méthode de préparation d'une microlame

• 1. Appliquez une goutte de liquide (eau, alcool, glycérine) sur une lame de verre.
• 2. Utilisez une aiguille à dissection pour prélever une partie de l'objet et placez-la dans une goutte de liquide. Parfois, une coupe de l'organe étudié est réalisée à l'aide d'un rasoir. Ensuite, après avoir sélectionné la section la plus fine, placez-la sur une lame de verre dans une goutte de liquide.
• 3. Couvrez l'objet avec un verre de protection afin qu'aucun air ne pénètre en dessous. Pour ce faire, prenez le verre de protection par les bords avec deux doigts, tirez le bord inférieur jusqu'au bord de la goutte de liquide et abaissez-le doucement en le tenant avec une aiguille à dissection.
• 4. La préparation est placée sur scène et examinée.

Déroulement du cours de laboratoire

À l'aide d'un scalpel, coupez un petit morceau (environ 1 cm2) des écailles charnues de l'oignon. Retirez le film transparent (épiderme) du côté intérieur (concave) avec une pince à épiler. Placer dans la goutte préparée et appliquer un verre de protection.

Avec un faible grossissement, trouvez l'endroit le plus éclairé (le moins endommagé, sans plis ni bulles). Passez au grossissement élevé. Examinez et dessinez une cellule. Marquez la membrane avec des pores, la couche murale du cytoplasme, le noyau avec des nucléoles, la vacuole avec la sève cellulaire. Ensuite, une solution de chlorure de sodium (plasmalytique) est versée goutte à goutte sur un côté du verre de protection. Du côté opposé, sans déplacer la préparation, ils commencent à aspirer l'eau avec des morceaux de papier filtre, tandis qu'il faut regarder au microscope et surveiller ce qui se passe dans les cellules. Un départ progressif du protoplaste de la membrane cellulaire est détecté en raison de la libération d'eau de la sève cellulaire. Il arrive un moment où le protoplaste à l'intérieur de la cellule est complètement séparé de la membrane et subit une plasmolyse complète de la cellule. Remplacez ensuite l'agent plasmolytique par de l'eau. Pour ce faire, placez soigneusement une goutte d'eau sur le bord du verre de protection avec la lame et lavez lentement le médicament du plasmolytique. On observe que la sève cellulaire remplit progressivement tout le volume de la vacuole, le cytoplasme s'applique sur la membrane cellulaire, c'est à dire. une déplasmolyse se produit.

Il faut schématiser la cellule dans les états plasmolés et déplasmolés, désigner toutes les parties de la cellule : noyau, membrane, cytoplasme.

À l’aide des tableaux, dessinez un diagramme de la structure submicroscopique d’une cellule végétale et identifiez tous les composants.

Peau d'oignon

Coquille centrale du cytoplasme

Peau d'oignon. Organites cellulaires.

Le cytoplasme est un composant essentiel de la cellule dans lequel se produisent des processus complexes et divers de synthèse, de respiration et de croissance.

Le noyau est l'un des organites les plus importants de la cellule.

Une coque est une couche superficielle étanche recouvrant quelque chose.

Plasmolyse par ajout d'une solution de chlore sodique

La plasmolyse est le détachement du cytoplasme de la membrane cellulaire, qui résulte de la perte d'eau de la vacuole.

Déplasmolyse

La déplasmolyse est un phénomène dans lequel le protoplaste revient à son état inverse.

Plasmolyse lors de l'ajout de saccharose

Déplasmolyse lors de l'ajout de saccharose

Conclusion : Aujourd'hui, nous nous sommes familiarisés avec la structure d'un microscope biologique, et avons également appris la technique de préparation de préparations temporaires. Nous avons étudié les principaux composants structurels d'une cellule végétale : membrane, cytoplasme, noyau à l'aide de l'exemple de la peau d'oignon. Et nous nous sommes familiarisés avec le phénomène de plasmolyse et de déplasmolyse.

Questions pour la maîtrise de soi

• 1. Quelles parties d’une cellule peuvent être observées au microscope optique ?
• 2. Structure submicroscopique d'une cellule végétale.
• 3. Quels organites constituent la structure submicroscopique du noyau ?
• 4. Quelle est la structure de la membrane cytoplasmique ?
• 5. Différences entre une cellule végétale et une cellule animale ?
• 6. Comment prouver la perméabilité de la membrane cellulaire ?
• 7. L'importance de la plasmolyse et de la déplasmolyse pour une cellule végétale ?
• 8. Comment s'effectue la connexion entre le noyau et le cytoplasme ?
• 9. Lieu d'étude du thème « Cellule » dans le cours de biologie générale du lycée.

Littérature

• 1. A.E. Vasiliev et al. Botanique (anatomie et morphologie des plantes), « Enlightenment », M, 1978, pp. 5-9, pp. 20-35.
• 2. Kiseleva N.S. Anatomie et morphologie des plantes. M. "École supérieure", 1980, pp. 3-21
• 3. Kiseleva N.S., Shelukhin N.V. Atlas d'anatomie végétale. . "École supérieure", 1976
• 4. Khrjanovsky V.G. et autres. Atlas sur l'anatomie et la morphologie des plantes. "École supérieure", M., 1979, pp. 19-21
• 5. Voronine N.S. Guide d'exercices de laboratoire en anatomie et morphologie végétale. M., 1981, p.27-30
• 6. Tutayuk V.Kh. Anatomie et morphologie des plantes. M. "École supérieure", 1980, pp. 3-21
• 7. D.T. Konysbaeva STAGE SUR L'ANATOMIE ET ​​LA MORPHOLOGIE DES PLANTES

Partie électrique du microscope

Contrairement à une loupe, un microscope possède au moins deux niveaux de grossissement. Les parties fonctionnelles, structurelles et technologiques du microscope sont conçues pour assurer le fonctionnement du microscope et obtenir une image agrandie stable, la plus précise possible de l'objet. Ici, nous allons examiner la structure d’un microscope et essayer de décrire les principales parties du microscope.

Fonctionnellement, le microscope est divisé en 3 parties :

1. Partie éclairage

La partie éclairage de la conception du microscope comprend une source de lumière (lampe et alimentation électrique) et un système optique-mécanique (collecteur, condenseur, diaphragmes à iris/champ et ouverture réglables).

2. Reproduire une partie

Conçu pour reproduire un objet dans le plan de l'image avec la qualité d'image et le grossissement requis pour la recherche (c'est-à-dire pour construire une image qui reproduirait l'objet aussi précisément que possible et dans tous les détails avec la résolution, le grossissement, le contraste et le rendu des couleurs correspondant à l'optique du microscope).
La partie de reproduction fournit la première étape de grossissement et est située après l'objet par rapport au plan image du microscope.
La partie de reproduction comprend une lentille et un système optique intermédiaire.

Les microscopes modernes de dernière génération sont basés sur des systèmes de lentilles optiques corrigées à l'infini. Cela nécessite en outre l'utilisation de systèmes dits de tubes, qui « collectent » des faisceaux de lumière parallèles sortant de la lentille dans le plan image du microscope.

3. Partie visualisation

Conçu pour obtenir une image réelle d'un objet sur la rétine de l'œil, un film ou une plaque photographique, sur l'écran d'un téléviseur ou d'un ordinateur avec un grossissement supplémentaire (deuxième étage de grossissement).
La partie imageur est située entre le plan image de l'objectif et les yeux de l'observateur (appareil photo numérique).
La partie imagerie comprend un accessoire visuel monoculaire, binoculaire ou trinoculaire avec un système d'observation (oculaires fonctionnant comme une loupe).
De plus, cette partie comprend des systèmes de grossissement supplémentaires (grossistes/systèmes de changement) ; les pièces jointes de projection, y compris les pièces jointes de discussion pour deux observateurs ou plus ; appareils à dessiner; systèmes d’analyse et de documentation d’images avec adaptateurs appropriés pour appareils photo numériques.

Disposition des principaux éléments d'un microscope optique

D'un point de vue conception et technologique, le microscope se compose des parties suivantes :

• mécanique;
• optique;
• électrique.

1. Partie mécanique du microscope

Appareil microscope s'allume sur lui-même trépied, qui est le principal bloc structurel et mécanique du microscope. Le trépied comprend les blocs principaux suivants : base Et porte-tube.

Base est un bloc sur lequel l'ensemble du microscope est monté et constitue l'une des parties principales du microscope. Dans les microscopes simples, des miroirs d'éclairage ou des éclairages aériens sont installés sur la base. Dans les modèles plus complexes, le système d'éclairage est intégré à la base sans ou avec alimentation.

Types de bases de microscope :

1. base avec miroir lumineux;
2. éclairage dit « critique » ou simplifié ;
3. Éclairage Koehler.

1. une unité de changement d'objectif, qui présente les options de conception suivantes - un dispositif rotatif, un dispositif fileté pour visser un objectif, un « traîneau » pour le montage sans filetage d'objectifs à l'aide de guides spéciaux ;
2. mécanisme de mise au point pour un réglage grossier et fin du microscope pour la netteté - mécanisme pour focaliser le mouvement des lentilles ou des platines ;
3. point d'attache pour tables d'objets remplaçables ;
4. unité de montage pour la focalisation et le centrage du mouvement du condenseur ;
5. point d'attache pour attaches remplaçables (visuelles, photographiques, télévision, divers appareils de transmission).

Les microscopes peuvent utiliser des supports pour monter des composants (par exemple, un mécanisme de mise au point dans les stéréomicroscopes ou un support d'illuminateur dans certains modèles de microscopes inversés).

Le composant purement mécanique du microscope est scène, destiné à fixer ou à fixer un objet d'observation dans une certaine position. Les tables peuvent être fixes, coordonnées et rotatives (centrées et non centrées).

2. Optique du microscope (partie optique)

Les composants et accessoires optiques assurent la fonction principale du microscope : créer une image agrandie d'un objet avec un degré de fiabilité suffisant en termes de forme, de rapport de taille des éléments constitutifs et de couleur. De plus, l’optique doit fournir une qualité d’image répondant aux objectifs de l’étude et aux exigences des méthodes d’analyse.
Les principaux éléments optiques d'un microscope sont les éléments optiques qui forment les systèmes d'éclairage (y compris le condenseur), d'observation (oculaires) et de reproduction (y compris les lentilles) du microscope.

Objectifs du microscope

— sont des systèmes optiques conçus pour construire une image microscopique dans le plan de l'image avec un grossissement, une résolution d'élément et une précision de reproduction appropriés de la forme et de la couleur de l'objet d'étude. Les objectifs sont l'une des parties principales d'un microscope. Ils ont une conception optique-mécanique complexe, qui comprend plusieurs lentilles simples et composants collés ensemble à partir de 2 ou 3 lentilles.
Le nombre de lentilles est déterminé par l'éventail de tâches résolues par la lentille. Plus la qualité d’image produite par un objectif est élevée, plus sa conception optique est complexe. Le nombre total de lentilles dans un objectif complexe peut aller jusqu'à 14 (par exemple, cela pourrait s'appliquer à un objectif planochromatique avec un grossissement de 100x et une ouverture numérique de 1,40).

L'objectif se compose de parties avant et arrière. La lentille frontale (ou système de lentilles) fait face à l'échantillon et est la principale élément dans la construction d'une image de qualité appropriée ; elle détermine la distance de travail et l'ouverture numérique de la lentille ; La partie suivante, en combinaison avec la partie avant, fournit le grossissement, la distance focale et la qualité d'image requis, et détermine également la hauteur de l'objectif et la longueur du tube du microscope.

Classement des verres

La classification des lentilles est beaucoup plus compliquée que celle des microscopes. Les objectifs sont divisés selon le principe de qualité d'image calculée, les caractéristiques paramétriques et technologiques de conception, ainsi que selon les méthodes de recherche et de contraste.

Selon le principe de la qualité d'image calculée les lentilles peuvent être :

• achromatique;
• apochromatique;
• lentilles à champ plat (plan).

Lentilles achromatiques.

Les lentilles achromatiques sont conçues pour être utilisées dans la plage spectrale de 486 à 656 nm. La correction de toute aberration (achromatisation) est effectuée pour deux longueurs d'onde. Ces lentilles éliminent l'aberration sphérique, l'aberration chromatique de position, le coma, l'astigmatisme et l'aberration partiellement sphérochromatique. L'image de l'objet a une teinte légèrement bleuâtre-rougeâtre.

Lentilles apochromatiques.

Les objectifs apochromatiques ont une région spectrale étendue et l'achromatisation est réalisée à trois longueurs d'onde. Dans le même temps, outre le chromatisme de position, l'aberration sphérique, le coma et l'astigmatisme, le spectre secondaire et l'aberration sphérochromatique sont également assez bien corrigés, grâce à l'introduction de lentilles en cristal et de verres spéciaux dans la conception. Par rapport aux objectifs achromatiques, ces objectifs ont généralement des ouvertures numériques plus élevées, produisent des images plus nettes et reproduisent avec précision la couleur du sujet.

Semi-apochromates ou microfluaires.

Objectifs modernes avec une qualité d'image intermédiaire.

Lentilles plan.

Dans les objectifs plans, la courbure de l'image à travers le champ a été corrigée, ce qui garantit une image nette de l'objet dans tout le champ d'observation. Les objectifs plan sont généralement utilisés en photographie, les apochromates plan étant les plus efficaces.

Le besoin de ce type d'objectifs augmente, mais ils sont assez coûteux en raison de la conception optique qui met en œuvre un champ d'image plat et des supports optiques utilisés. C'est pourquoi les microscopes de routine et de travail sont équipés d'objectifs dits économiques. Il s'agit notamment d'objectifs offrant une qualité d'image améliorée sur tout le champ : achromates (LEICA), achromates et achroplanes CP (CARL ZEISS), stigmachromates (LOMO).

Selon les caractéristiques paramétriques les lentilles sont réparties comme suit :

1. objectifs avec une longueur de tube finie (par exemple 160 mm) et objectifs corrigés pour la longueur de tube « infini » (par exemple, avec un système de tubes supplémentaire ayant une focale de microscope de 160 mm) ;
2. petites lentilles (jusqu'à 10x); grossissements moyens (jusqu'à 50x) et élevés (plus de 50x), ainsi que des lentilles à très fort grossissement (plus de 100x) ;
3. objectifs à ouverture numérique petite (jusqu'à 0,25), moyenne (jusqu'à 0,65) et grande (plus de 0,65), ainsi que les objectifs à ouverture numérique accrue (par rapport aux ouvertures numériques conventionnelles) (par exemple, les objectifs de correction apochromatique, ainsi que les objectifs spéciaux lentilles pour microscopes fluorescents);
4. objectifs avec des distances de travail accrues (par rapport aux distances de travail conventionnelles), ainsi qu'avec des distances de travail grandes et extra longues (objectifs pour travailler dans des microscopes inversés). La distance de travail est la distance libre entre l'objet (le plan du verre de protection) et le bord inférieur de la monture (la lentille, si elle dépasse) de la partie avant de la lentille ;
5. lentilles permettant une observation dans le champ linéaire normal (jusqu'à 18 mm); objectifs grand champ (jusqu'à 22,5 mm) ; objectifs ultra grand champ (supérieurs à 22,5 mm) ;
6. les objectifs sont standard (45 mm, 33 mm) et non standard en hauteur.

Hauteur - la distance entre le plan de référence de la lentille (le plan de contact de la lentille vissée avec le dispositif tournant) et le plan de l'objet avec un microscope focalisé, est une valeur constante et assure la parfocalité d'un ensemble de lentilles de hauteur similaire et de grossissements différents installées dans le dispositif rotatif. En d'autres termes, si vous utilisez un objectif d'un grossissement pour obtenir une image nette d'un objet, alors lors du passage aux grossissements suivants, l'image de l'objet reste nette dans la profondeur de champ de l'objectif.

Selon la conception et les caractéristiques technologiques il y a la division suivante :

1. objectifs avec monture à ressort (à partir de l'ouverture numérique 0,50) et sans monture ;
2. les objectifs dotés d'un diaphragme à iris à l'intérieur pour modifier l'ouverture numérique (par exemple, dans les objectifs à ouverture numérique accrue, dans les objectifs à lumière transmise pour mettre en œuvre la méthode du champ sombre, dans les objectifs polarisés à lumière réfléchie) ;
3. lentilles avec une monture correctrice (de contrôle), qui assure le mouvement des éléments optiques à l'intérieur de la lentille (par exemple, pour ajuster la qualité d'image de la lentille lorsque vous travaillez avec différentes épaisseurs de verre de protection ou avec différents liquides d'immersion ; ainsi que pour changer le grossissement lors d'un changement de grossissement doux - pancratique) et sans elle.

Proposer des recherches et des méthodes contrastées les lentilles peuvent être divisées comme suit :

1. objectifs fonctionnant avec et sans verre de protection ;
2. lentilles de lumière transmise et réfléchie (non réfléchissantes); lentilles luminescentes (avec un minimum de luminescence intrinsèque) ; lentilles polarisées (sans tension de verre dans les éléments optiques, c'est-à-dire sans introduire leur propre dépolarisation) ; lentilles de phase (ayant un élément de phase - un anneau translucide à l'intérieur de la lentille) ; Objectifs DIC fonctionnant selon la méthode du contraste interférentiel différentiel (polarisant avec un élément prisme) ; les épilens (les lentilles à lumière réfléchie, conçues pour fournir des méthodes de champ clair et sombre, ont des épi-miroirs d'éclairage spécialement conçus dans leur conception) ;
3. lentilles à immersion et sans immersion.

Immersion ( de lat. immersio - immersion) est un liquide qui remplit l'espace entre l'objet d'observation et un objectif spécial à immersion (condenseur et lame de verre). Trois types de liquides d'immersion sont principalement utilisés : l'immersion dans l'huile (MI/Oil), l'immersion dans l'eau (WI/W) et l'immersion dans le glycérol (GI/Glyc), cette dernière étant principalement utilisée en microscopie ultraviolette.
L'immersion est utilisée dans les cas où il est nécessaire d'augmenter la résolution d'un microscope ou si son utilisation est requise par le processus technologique de la microscopie. Ça arrive:

1. augmenter la visibilité en augmentant la différence entre l'indice de réfraction du milieu et de l'objet ;
2. augmenter la profondeur de la couche visualisée, qui dépend de l'indice de réfraction du milieu.

De plus, le liquide d'immersion peut réduire la quantité de lumière parasite en éliminant l'éblouissement du sujet. Cela élimine la perte inévitable de lumière lorsqu’elle pénètre dans l’objectif.

Lentilles à immersion. La qualité de l'image, les paramètres et la conception optique des lentilles à immersion sont calculés et sélectionnés en tenant compte de l'épaisseur de la couche d'immersion, qui est considérée comme une lentille supplémentaire avec un indice de réfraction correspondant. Le liquide d'immersion placé entre l'objet et la partie avant de l'objectif augmente l'angle de vision de l'objet (angle d'ouverture). L'ouverture numérique d'un objectif (sec) sans immersion ne dépasse pas 1,0 (la résolution est d'environ 0,3 µm pour la longueur d'onde principale) ; immersion - atteint 1,40 en fonction de l'indice de réfraction d'immersion et des capacités technologiques de fabrication de la lentille frontale (la résolution d'une telle lentille est d'environ 0,12 microns).
Les objectifs d'immersion à fort grossissement ont une courte distance focale de 1,5 à 2,5 mm avec une distance de travail libre de 0,1 à 0,3 mm (la distance entre le plan de l'échantillon et le cadre de la lentille avant de l'objectif).

Marquages ​​​​des lentilles.

Les données sur chaque objectif sont marquées sur son corps indiquant les paramètres suivants :

1. grossissement (« x », fois) : 8x, 40x, 90x ;
2. NA : 0,20 ; 0,65, exemple : 40/0,65 ou 40x/0,65 ;
3. marquage de lettre supplémentaire si l'objectif est utilisé pour diverses méthodes de recherche et de contraste : phase - Ф (Рп2 - le chiffre correspond au marquage sur un condenseur ou un insert spécial), polarisant - П (Pol), luminescent - Л (L), phase -luminescent - FL ( PhL), EPI (Epi, HD) - épilens pour travailler en lumière réfléchie selon la méthode du champ noir, contraste interférentiel différentiel - DIC (DIC), exemple : 40x/0,65 F ou Ph2 40x/0,65 ;
4. marquage du type de correction optique : apochromat - APO (APO), planchromat - PLAN (PL, Plan), planachromat - PLAN-APO (Plan-Aro), achromat amélioré, semi-plan - CX - stigmachromat (Achrostigmat, CP- achromat, Achroplan), microfluar (semiplan-semi-apochromat) - SF ou M-FLUAR (MICROFLUAR, NEOFLUAR, NPL, FLUOTAR).

Oculaires

Systèmes optiques conçus pour construire une image microscopique sur la rétine de l'œil de l'observateur. En général, les oculaires sont constitués de deux groupes de lentilles : la lentille oculaire – la plus proche de l’œil de l’observateur – et la lentille de champ – la plus proche du plan dans lequel la lentille construit une image de l’objet en question.

Les oculaires sont classés selon les mêmes groupes de caractéristiques que les lentilles :

1. oculaires avec action compensatoire (K - compense la différence chromatique de grossissement de l'objectif supérieur à 0,8 %) et non compensatoire ;
2. oculaires à champ régulier et plat ;
3. oculaires grand angle (avec un numéro d'oculaire - le produit du grossissement de l'oculaire et de son champ linéaire - supérieur à 180) ; ultra grand angle (avec un nombre oculaire supérieur à 225) ;
4. oculaires à pupille allongée pour travailler avec ou sans lunettes ;
5. oculaires d'observation, oculaires de projection, oculaires photo, gamals;
6. oculaires avec visée interne (à l'aide d'un élément mobile à l'intérieur de l'oculaire, un ajustement est effectué pour obtenir une image nette du réticule ou du plan image du microscope ; ainsi qu'un changement pancratique en douceur du grossissement de l'oculaire) et sans celui-ci.

Système d'éclairage

Le système d'éclairage est un élément important conceptions de microscopes et est un système de lentilles, de diaphragmes et de miroirs (ces derniers sont utilisés si nécessaire), assurant un éclairage uniforme de l'objet et un remplissage complet de l'ouverture de l'objectif.
Le système d'éclairage d'un microscope à lumière transmise se compose de deux parties : un collecteur et un condenseur.

Collectionneur.
Avec un système d'éclairage par lumière transmise intégré, la partie collectrice est située près de la source lumineuse à la base du microscope et est conçue pour augmenter la taille du corps lumineux. Pour assurer le réglage, le collecteur peut être rendu mobile et se déplacer le long de l'axe optique. Le diaphragme de champ du microscope est situé à proximité du collecteur.

Condenseur.
Le système optique du condenseur est conçu pour augmenter la quantité de lumière entrant dans le microscope. Le condenseur est situé entre l'objet (scène) et l'illuminateur (source lumineuse).
Le plus souvent, dans les microscopes éducatifs et simples, le condenseur peut être rendu non amovible et immobile. Dans d'autres cas, le condenseur est une pièce amovible et présente, lors du réglage de l'éclairage, un mouvement de focalisation selon l'axe optique et un mouvement de centrage perpendiculaire à l'axe optique.
Au niveau du condenseur, il y a toujours un diaphragme à iris à ouverture d'éclairage.

Le condenseur est l'un des principaux éléments qui assurent le fonctionnement du microscope grâce à diverses méthodes d'éclairage et de contraste :

• éclairage oblique (diaphragme du bord vers le centre et déplacement du diaphragme d'ouverture d'éclairage par rapport à l'axe optique du microscope) ;
• champ sombre (ouverture maximale du centre au bord de l’ouverture d’éclairage) ;
• contraste de phase (éclairage annulaire d'un objet, tandis que l'image de l'anneau lumineux s'inscrit dans l'anneau de phase de l'objectif).

Classification des condensateurs est proche en groupes de caractéristiques des lentilles :

1. Les condenseurs basés sur la qualité de l'image et le type de correction optique sont divisés en non achromatiques, achromatiques, aplanatiques et achromatiques-aplanatiques ;
2. condenseurs de petite ouverture numérique (jusqu'à 0,30), d'ouverture numérique moyenne (jusqu'à 0,75), de grande ouverture numérique (plus de 0,75) ;
3. condenseurs avec distances de travail régulières, longues et extra longues ;
4. condenseurs conventionnels et spéciaux pour diverses méthodes de recherche et de contraste ;
5. La conception du condenseur est unique, avec un élément rabattable (composant frontal ou lentille grand champ), avec un élément frontal vissé.

Condenseur d'Abbé- un condenseur non corrigé de la qualité d'image, constitué de 2 lentilles non achromatiques : l'une biconvexe, l'autre plan-convexe, tournée vers l'objet d'observation (le côté plat de cette lentille est dirigé vers le haut). Ouverture du condenseur, A = 1,20. Possède un diaphragme à iris.

Condenseur aplanatique- un condenseur constitué de trois lentilles disposées de la manière suivante : la lentille supérieure est plan-convexe (le côté plat est dirigé vers la lentille), suivie de lentilles concave-convexes et biconvexes. Corrigé concernant l'aberration sphérique et le coma. Ouverture du condenseur, A = 1,40. Possède un diaphragme à iris.

Condenseur achromatique- condenseur entièrement corrigé des aberrations chromatiques et sphériques.

Condensateur de champ sombre- un condenseur conçu pour obtenir un effet de champ sombre. Il peut être spécial ou converti à partir d'un condenseur à fond clair ordinaire en installant un disque opaque d'une certaine taille dans le plan du diaphragme à iris du condenseur.

Marquage du condensateur.
L'ouverture numérique (éclairage) est marquée sur le devant du condenseur.

3. Partie électrique du microscope

Les microscopes modernes, au lieu de miroirs, utilisent diverses sources d'éclairage alimentées par un réseau électrique. Il peut s'agir de lampes à incandescence ordinaires ou de lampes halogènes, au xénon ou au mercure. L’éclairage LED devient également de plus en plus populaire. Elles présentent des avantages significatifs par rapport aux lampes conventionnelles, telles que la durabilité, une consommation d'énergie réduite, etc. Pour alimenter la source d'éclairage, diverses alimentations, unités d'allumage et autres dispositifs sont utilisés qui convertissent le courant du réseau électrique en un courant adapté à l'alimentation d'un particulier. source d'éclairage. Il peut également s'agir de batteries rechargeables, ce qui permet d'utiliser des microscopes sur le terrain en l'absence de point de connexion.

Microscopie en champ clair

L'étude des cellules microbiennes invisibles à l'œil nu, dont les dimensions ne dépassent pas des dizaines et des centaines de micromètres (1 μm = 0,001 mm), n'est possible qu'à l'aide de microscopes (du grec. micros - petit, skopéo - Je regarde). Ces appareils permettent d'obtenir des images agrandies des centaines de fois (microscopes optiques) et des dizaines à des centaines de milliers de fois (microscopes électroniques) des objets étudiés.

À l'aide d'un microscope, ils étudient la morphologie des cellules de micro-organismes, leur croissance et leur développement, et procèdent à une identification primaire (de Lat. IDENTIFICATION- identification) des organismes étudiés, suivre la nature du développement des cénoses (communautés) microbiennes dans le sol et autres substrats.

Le microscope se compose de deux parties : mécanique (auxiliaire) et optique (principale).

Partie mécanique du microscope. Il comprend un trépied, une scène et un tube (tube).

Trépied a une base en forme de fer à cheval et une colonne (support de tube) en forme d'arc. A côté se trouve une boîte de mécanismes et un système de roues dentées pour réguler la position du tube. Le système est entraîné par rotation de vis macrométriques et micrométriques.

Vis micrométrique(crémaillère, engrenage, macrovis) sert à l'installation préliminaire approximative de l'image de l'objet en question.

Vis micrométrique(microvis) est utilisée pour une mise au point claire ultérieure. Lorsque la microvis tourne complètement, le tuyau se déplace de 0,1 mm (100 µm).

Lorsque les vis sont tournées dans le sens des aiguilles d'une montre, le tuyau descend vers la préparation ; lorsqu'il est tourné dans le sens inverse des aiguilles d'une montre, il s'éloigne de la préparation.

La table d'objets permet de placer la préparation avec l'objet d'étude dessus. La scène objet tourne et se déplace dans des plans mutuellement perpendiculaires à l’aide de vis. Au centre de la table se trouve un trou rond permettant d'éclairer l'échantillon par le bas avec des rayons de lumière dirigés par le miroir du microscope. Deux pinces sont intégrées à la table (bornes)- des plaques métalliques élastiques conçues pour sécuriser le médicament.

S'il est nécessaire d'examiner la surface de l'éprouvette sans laisser de vide (ce qui est important lors du comptage), ou si pendant le travail il est nécessaire de réexaminer une zone spécifique de l'éprouvette, la table des objets sera gestionnaire de médicaments Il dispose d'un système de règles - verniers, à l'aide desquelles vous pouvez attribuer des coordonnées à n'importe quel point de l'objet étudié. Pour ce faire, lors de l'installation de la lame, vous devez aligner le centre de rotation de la platine et l'axe optique du système de microscope avec la plaque de centrage de la lame (c'est pourquoi la platine avec la lame est parfois appelée en forme de croix).

Tube (tuyau)- un cadre dans lequel sont enfermés les éléments du système optique du microscope. Un revolver (porte-objectif) avec des douilles pour objectifs est fixé au bas du tube. Les modèles modernes de microscopes ont un tube incliné avec un support de tube arqué, qui assure une position horizontale de la platine objet.

Partie optique du microscope se compose d'une unité optique principale (lentille et oculaire) et d'un système d'éclairage auxiliaire (miroir et condenseur). Toutes les parties du système optique sont strictement centrées les unes par rapport aux autres. Dans de nombreux microscopes modernes, le miroir et le condenseur sont remplacés par une source lumineuse réglable intégrée à l'appareil.

Système d'éclairage est situé sous la scène. Miroir réfléchit la lumière incidente sur lui dans le condenseur . Un côté du miroir est plat , autre - concave Lorsque vous travaillez avec un condenseur, vous devez utiliser uniquement un miroir plat. Un miroir concave est utilisé lorsque l'on travaille sans condenseur avec des lentilles à faible grossissement . Condenseur(de Lat. . condensé- compact, épais), composé de 2-3 lentilles à courte focale, collecte les rayons provenant du miroir , et dirigez-les vers l’objet. Un condenseur est nécessaire avant tout lorsque l'on travaille avec un système à immersion. Les lentilles du condenseur sont montées dans un cadre métallique relié à un mécanisme d'engrenage qui permet au condenseur d'être déplacé de haut en bas au moyen d'une vis spéciale. Pour régler l'intensité lumineuse dans le condenseur, il y a iris(pétale) diaphragme, constitué de plaques en forme de croissant en acier

Les préparations colorées sont mieux visualisées avec un diaphragme presque entièrement ouvert, les préparations incolores sont mieux visualisées avec une ouverture de diaphragme réduite. .

Sous le condenseur se trouve porte-bague pour les filtres de lumière (généralement des verres dépolis bleus et blancs sont inclus avec le microscope). Lorsque vous travaillez avec une source de lumière artificielle, les filtres créent l'impression de lumière du jour , rendant la microscopie moins éprouvante pour les yeux.

Lentille(de lat. objet- objet) est la partie la plus importante du microscope. Il s'agit d'un système multi-objectifs à focale courte dont la qualité détermine principalement l'image de l'objet. La lentille extérieure faisant face à l’échantillon avec son côté plat est appelée lentille frontale. C'est elle qui assure l'augmentation . Les lentilles restantes du système d'objectifs remplissent principalement les fonctions de correction des défauts optiques qui surviennent lors de l'étude d'objets. .

L'un de ces inconvénients est le phénomène abération sphérique. Il est associé à la propriété des lentilles de réfracter inégalement les rayons périphériques et centraux. Les premiers sont généralement plus réfractés que les seconds et se coupent donc à une distance plus proche de la lentille. En conséquence, l'image du point prend l'apparence d'un point flou.

Aberration chromatique se produit lorsqu'un faisceau de rayons de différentes longueurs d'onde traverse la lentille . Réfracté différemment , Les rayons se croisent en plus d'un point. Les rayons bleu-violet de courte longueur d’onde sont plus fortement réfractés que les rayons rouges de longueur d’onde plus longue. En conséquence, une couleur apparaît dans un objet incolore.

Les objectifs qui éliminent l'aberration sphérique et partiellement chromatique comprennent achromates. Ils contiennent jusqu'à 6 lentilles et corrigent le spectre primaire (partie jaune-vert du spectre) sans éliminer le spectre secondaire. L'image obtenue à l'aide d'achromates n'est pas colorée, mais ses bords présentent un halo rouge ou bleuâtre. Dans les achromates modernes, ce défaut est presque imperceptible. Le meilleur matériau pour les lentilles achromatiques est le verre silex - d'anciens types de verre à haute teneur en oxyde de plomb.

Les objectifs qui éliminent l'aberration chromatique et pour le spectre secondaire sont appelés apochromates. Ils peuvent contenir de 1 à 12 lentilles. Pour une meilleure correction du spectre secondaire, les lentilles apochromates sont fabriquées à partir de spath fluor, de sel gemme, d'alun et d'autres matériaux. Les apochromats permettent d'éliminer la coloration de l'objet et d'obtenir une image tout aussi nette de rayons de différentes couleurs. L'effet maximal lorsque l'on travaille avec des apochromates ne peut être obtenu que lorsqu'ils sont combinés avec des oculaires de compensation qui compensent les défauts optiques des lentilles. Dans les oculaires compensateurs, l'erreur chromatique est à l'opposé de l'erreur chromatique de l'objectif et, par conséquent, l'aberration chromatique du microscope est presque entièrement compensée.

Planachromates - un type d'apochromat avec un champ de vision plat. Les lentilles planachromatiques éliminent complètement la courbure du champ de vision, ce qui provoque une mise au point inégale d'un objet (avec la courbure du champ de vision, seule une partie du champ est focalisée). Les planachromats et les planapochromats sont utilisés en microphotographie.

Les lentilles peuvent être sèches ou submersibles (immersion). Quand on travaille à sec Avec les lentilles, il y a de l'air entre la lentille frontale de la lentille et l'objet d'étude. Calcul optique immersion lentilles prévoit leur fonctionnement lorsque la lentille frontale de la lentille est immergée dans un milieu liquide homogène. Lorsque l’on travaille avec une lentille sèche, en raison de la différence entre les indices de réfraction du verre (1,52) et de l’air (1,0), une partie des rayons lumineux est déviée et n’entre pas dans l’œil de l’observateur (Fig. 1).

Lorsque vous travaillez avec un objectif à immersion, celui-ci doit être placé entre le verre de protection et les lentilles d'objectif. cèdre

huile, dont l'indice de réfraction est proche de l'indice de réfraction du verre (tableau 1).

Les rayons dans un milieu homogène optiquement homogène ne changent pas de direction. Les verres à immersion sur la monture ont une coupe circulaire noire et des désignations : I - immersion, HI - immersion homogène, OI - immersion dans l'huile, MI - immersion dans l'huile. Les lentilles se distinguent par leur grossissement.

Grossissement natif de l'objectif (V) déterminé par la formule

Où je- la longueur optique du tube ou la distance entre le plan focal de l'objectif et le plan image, qui est de 128-180 mm pour les différents objectifs ; F- la distance focale de l'objectif : plus elle est longue, plus le grossissement de l'objectif est faible.

La valeur de grossissement des lentilles est indiquée sur leur monture (8x, 40x, 9x). Chaque lentille se caractérise également par une certaine distance de travail en millimètres.

Pour les lentilles à faible grossissement, la distance entre la lentille avant de l'objectif et l'échantillon est plus grande que pour les lentilles à fort grossissement. Ainsi, les objectifs avec un grossissement de 8 x, 40 x et 90 x ont respectivement une distance de travail de 13,8 ; 0,6 et 0,12 mm. En fonction de l'objectif avec lequel vous travaillez, une vis macrométrique et micrométrique est sélectionnée pour la mise au point. Une lentille à immersion dans l’huile a une distance de travail de 0,12 mm, c’est pourquoi elle est souvent appelée « myope ».

1 L'huile de cèdre est obtenue à partir des graines du genévrier de Virginie Genévrier de Virginie ou Zeravshan archa Juniperus seravschana. Actuellement, les produits synthétiques qui correspondent aux propriétés optiques de l’huile de cèdre sont plus souvent utilisés comme liquides d’immersion.

Le premier microscope était un appareil optique permettant d'obtenir une image inverse de micro-objets et de discerner des détails très fins de la structure de la substance étudiée. Dans sa conception, un microscope optique est un dispositif similaire à la conception d'un réfracteur, dans lequel la lumière est réfractée lors de son passage.

Un faisceau de rayons lumineux entrant dans le microscope est d'abord converti en un flux parallèle, après quoi il est réfracté dans l'oculaire. Ensuite, les informations sur l'objet d'étude entrent dans l'analyseur visuel humain.

Pour plus de commodité, l'objet d'observation est mis en évidence. Un miroir situé au bas du microscope est prévu à cet effet. La lumière est réfléchie par la surface d’un miroir, traverse l’objet en question et pénètre dans la lentille. Un flux de lumière parallèle monte vers l’oculaire. Le degré de grossissement du microscope dépend des paramètres des lentilles. Ceci est généralement indiqué sur le corps de l'appareil.

Appareil microscope

Le microscope comporte deux systèmes principaux : mécanique et optique. Le premier comprend un support, une boîte avec un mécanisme de travail, un support, un support de tube, une visée grossière et fine, ainsi qu'une table d'objets. Le système optique comprend une lentille, un oculaire et une unité de rétroéclairage, qui comprend un condenseur, un filtre, un miroir et un élément d'éclairage.

Les microscopes optiques modernes n'ont pas une, mais deux lentilles, voire plus. Cela aide à faire face à la distorsion de l’image appelée aberration chromatique.

Le système optique du microscope est l’élément principal de toute la structure. L'objectif détermine le grossissement de l'objet en question. Il se compose de lentilles dont le nombre dépend du type d'appareil et de sa destination. L'oculaire utilise également deux, voire trois lentilles. Pour déterminer le grossissement global d'un microscope particulier, vous devez multiplier le grossissement de son oculaire par la même caractéristique de la lentille.

Au fil du temps, le microscope s'est amélioré et les principes de son fonctionnement ont changé. Il s'est avéré que lors de l'observation du micromonde, il est possible d'utiliser non seulement la propriété de réfraction de la lumière. Les électrons peuvent également être impliqués dans le fonctionnement d'un microscope. Les microscopes électroniques modernes permettent de voir individuellement des particules de matière si petites que la lumière circule autour d'elles. Pour réfracter les faisceaux d'électrons, des éléments magnétiques sont utilisés plutôt que des loupes.

Si vous êtes intéressé par les microscopes et leur structure depuis longtemps, mais que vous n'avez toujours pas trouvé d'informations utiles, l'article d'aujourd'hui clarifiera des détails que vous ne connaissez peut-être pas encore. Alors commençons.
Le microscope lui-même est un appareil optique avec lequel vous pouvez obtenir une image microscopique de n'importe quel objet et étudier ses moindres détails, etc. Bien entendu, les yeux ne permettent pas à une personne de voir comme le voit un microscope.
Il existe différents types de grossissement, par exemple inutile et utile. Un grossissement utile est un grossissement qui fait ressortir les moindres détails. Mais ce qui est inutile, c'est le grossissement qui, en règle générale, ne révèle pas les moindres détails, même lorsque l'objet est agrandi plusieurs centaines de fois, voire plus.
En règle générale, dans les laboratoires (éducatifs), ils utilisent des microscopes optiques - sur ces microscopes, les micropréparations sont examinées à la fois à la lumière artificielle et à la lumière naturelle. Les microscopes (biologiques légers) les plus couramment utilisés sont MBS, MBI, BIOLAM, MIKMED, MBR. Grâce à de tels microscopes, le grossissement peut être effectué de cinquante-six fois à mille trois cent cinquante fois. MBS, ou stéréomicroscopes - un tel microscope vous permet d'obtenir le volume réel d'un objet ; le grossissement peut être effectué de trois fois et demie à quatre-vingt-huit fois.
Mécanique et optique sont les deux systèmes dans lesquels le microscope est divisé. L'optique comprend des oculaires spéciaux, des appareils émettant de la lumière, etc.

La structure d'un microscope.

L'objectif est la partie la plus importante, car c'est elle qui permet de déterminer le grossissement objectif (utile). Comment est structurée la lentille : un cylindre (métal) à l'intérieur duquel se trouve la lentille - leur nombre est toujours différent. Les chiffres montrent une augmentation objective. En formation, les objectifs x40, x8 sont presque toujours utilisés. Plus la résolution est bonne, meilleure est la qualité objective.
L’oculaire est l’une des parties du microscope qui est plus clairement conçue que l’objectif. Comment fonctionne l'oculaire : il comprend plusieurs lentilles, ou pour être plus précis, deux ou trois lentilles situées à l'intérieur d'un cylindre (métallique). Les lentilles placent un diaphragme entre elles, grâce auquel les limites du champ de vision sont déterminées. L'objectif, situé en dessous, permet de focaliser l'image objective. Grâce aux oculaires, il ne sera pas possible de trouver de nouveaux détails qui n'étaient pas familiers auparavant, leur grossissement ne joue donc aucun rôle important. On pourrait même dire que cela ne sert à rien. Un oculaire est semblable à une loupe, puisque, tout comme lui, l'image d'un objet particulier est virtuelle.
Un appareil d'éclairage est un appareil qui est construit presque entièrement au moyen de miroirs ; Cet appareil comprend également un filtre de lumière, un condenseur, etc. Leur but est lorsque la lumière brille dans un faisceau.
Miroir - aide à ajuster la lumière qui traverse le condenseur. Le miroir a plusieurs surfaces : concave, plate. Dans les laboratoires où la lumière est diffusée, un miroir à surface concave est utilisé.
Un condenseur est un appareil qui comprend deux ou trois lentilles, également situées dans un cylindre (métal). Lorsque vous l'abaissez ou le relevez, il disperse la lumière qui tombe sur l'objet, réfléchie par le miroir.
Support - base.
Un tube est un cylindre. Les oculaires sont insérés par le haut. Il se fixe de différentes manières, avec une vis (verrouillage). Le tube n'est retiré que lorsque la vis (vis de verrouillage) est desserrée.

Comment utiliser un microscope

Voici quelques règles pour travailler avec un microscope :
1. Le travail avec un microscope doit être effectué en position assise ;
2. Avant utilisation, le microscope doit être vérifié pour la poussière, l'essuyer s'il y en a, et ensuite seulement commencer à fonctionner ;
3. Le microscope doit être situé à proximité, à environ deux ou trois centimètres du bord ; lorsque des travaux sont en cours, ne le déplacez pas ;
4. Le diaphragme doit être complètement ouvert, le condenseur doit être relevé ;
5. L’augmentation doit se faire progressivement ;
6. L'objectif est en position de travail abaissée ;
7. La lumière doit briller sur le microscope, par exemple une lumière électrique ;