Structure du laboratoire de bactériologie. Laboratoire bactériologique, sa structure et sa finalité - microbiologie avec techniques de recherche microbiologique. Comment faire un test de selles

Le laboratoire remonte à la fondation de la clinique des maladies de la peau, lorsqu'en 1911 un laboratoire fut organisé à la clinique des maladies de la peau de l'Université de Moscou. Le résident N.A. Chernogubov a été nommé premier assistant de laboratoire du laboratoire.

En 1930, le laboratoire était dirigé par G.V. Vygodchikov, qui fonda le département de bactériologie en 1926. En 1970 Le laboratoire est devenu partie intégrante du Laboratoire centralisé de diagnostic clinique.

Il s'agit actuellement d'une unité de diagnostic structurel du laboratoire et du complexe d'hémotransfusion du centre clinique de la première université médicale d'État de Moscou. I.M. Sechenov.

Le laboratoire de bactériologie interclinique est l'un des plus grands laboratoires de microbiologie clinique de Moscou.

Le laboratoire est dirigé par un docteur de la plus haute catégorie, candidat en sciences médicales
Olga Alekseevna Morozova, tél. : 8-499-245-38-71

Composition du personnel

Le laboratoire est composé de :

• 9 bactériologistes, dont 6 hautement qualifiés, 2 doctorants.
• 11 laborantins médicaux, dont 5 possèdent la catégorie de qualification la plus élevée.

Tout le personnel médical et infirmier est certifié pour exercer la médecine dans sa spécialité.

Structure du laboratoire

La structure du laboratoire comprend les groupes fonctionnels suivants :

• Etudes de la microflore des processus inflammatoires.
• Infections intestinales.
• Infections aéroportées.
• Sanitaire et bactériologique.
• Diagnostic en laboratoire des pathologies cutanées et vénériennes

Le laboratoire réalise des études microbiologiques diagnostiques et préventives sur le matériel provenant des patients hospitalisés et ambulatoires des hôpitaux universitaires du pôle Devichye, du Centre de diagnostic clinique et des services intercliniques. Un travail important est mené en matière de contrôle sanitaire et bactériologique dans les cliniques universitaires. Des travaux contractuels et commerciaux sont en cours.

Équipement de laboratoire.

Le laboratoire est équipé d'équipements analytiques et généraux modernes :

• Système automatique de préparation et de remplissage des milieux nutritifs « MasterClave 09, APC 320/90 » (AES, France),
• Armoires à flux laminaire de classe de sécurité biologique II NU-437 (NuAire, USA),
• Incubateurs à CO2 NU-5500 (NuAire, USA),
• Thermostats MIR 262 (Sanyo, Japon),
• Autoclaves MLS (Sanyo, Japon),
• Stérilisateurs à air sec FED 115 (Binder, Allemagne).

Pour identifier les espèces de micro-organismes isolés et déterminer leur sensibilité aux médicaments antibactériens, un analyseur microbiologique automatique « WalkAway 96 Plus » (Siemens, Allemagne) et un spectromètre de masse MALDI-TOF de haute précision et haute performance (Bruker Daltonik, Allemagne) sont utilisé. Pour chacune des souches d'entérobactéries isolées, un test est réalisé pour détecter la présence de b-lactamases à spectre étendu (BLSE). Pour tester la stérilité des échantillons de sang, un analyseur d'hémoculture bactériologique « Bactec 9050 » (Becton Dickinson, USA) est utilisé. La culture d'échantillons pour détecter la présence d'une infection anaérobie est effectuée dans des anaérostats utilisant des milieux nutritifs spéciaux importés.

Toutes les méthodes de recherche et réactifs utilisés sont certifiés.

Les échantillons de matériel clinique sont collectés uniquement dans des récipients en plastique stériles jetables.
Le laboratoire exploite un programme de réseau professionnel de surveillance de la recherche microbiologique « Microbe-2 », qui permet d'analyser les résultats obtenus, de déterminer l'activité des antibiotiques, la structure étiologique d'une nosologie inflammatoire particulière et d'identifier les souches hospitalières.

Activité scientifique.

La spécificité du laboratoire de microbiologie clinique s'exprime dans la demande importante des matériaux de ses travaux dans la recherche scientifique des cliniciens. Grâce à la coopération avec les services cliniques, le laboratoire réalise au moins 4 publications par an.

Le laboratoire est agréé et participe au système fédéral d'évaluation externe de la qualité.
Licence n° FS-77-01-007170 du 16 septembre 2015

photo du site lentachel.ru

Il y a à peine cent ans, la contamination lors de recherches scientifiques était considérée comme pratiquement inévitable. De nombreux scientifiques mettent leur corps en danger de mort en étudiant des microbes et des bactéries dont ils connaissaient peu la nature. Aujourd'hui, la plupart des micro-organismes dangereux qui nous entourent ont été décrits et étudiés ; en outre, des produits médicaux spéciaux sont fournis aux laboratoires de bactériologie, dont l'utilisation avec une probabilité de 99 % protège les chercheurs de tout risque professionnel.

Tous les objets avec lesquels travaillent les employés du laboratoire de bactériologie sont saturés de microflore pathogène. Pour maintenir un environnement intérieur sain et éviter tout contact direct avec des matériaux contaminés, des meubles, des vêtements et des ustensiles dotés de propriétés barrières et antimicrobiennes améliorées sont utilisés.

Des armoires et des boîtes hermétiquement fermées en verre et en métal, des tables de laboratoire pratiques pour la désinfection, la stérilisation et l'équipement en autoclave, ainsi qu'un réfrigérateur verrouillé sont des éléments qui garantissent la sécurité des personnes effectuant des recherches sur des échantillons infectés.

Tous les récipients utilisés pour la conservation des échantillons : flacons, béchers gradués sont hermétiquement fermés pour éviter la propagation des microbes dans l'air du laboratoire.

Pour fabriquer des conteneurs, on utilise du verre spécial incassable ou du plastique à haute résistance. Les doubles parois, une forme de fond spéciale et stable, des éléments en caoutchouc sur les couvercles, les plateaux et les cuvettes créent les meilleures conditions pour isoler des voisins dangereux tels que les méningocoques, les streptocoques, les staphylocoques, les bacilles et les clostridies.

Avant de commencer les recherches, le personnel enfile des vêtements spéciaux : une blouse de protection, un masque, des lunettes. Pour travailler avec des substances très dangereuses, des tabliers caoutchoutés ou des blouses spéciales imprégnées d'humidité sont utilisés.

Un traitement approprié et opportun de l'air avec des irradiateurs ultraviolets et des lampes bactéricides, l'utilisation de modifications éprouvées de la salle de lavage, la fourniture à tous les employés d'un ensemble complet de vêtements de protection sont une norme généralement acceptée, dont l'écart est administratif et en cas de conséquences graves , pénalement punissable.

Un équipement complet et la mise en œuvre de toutes les mesures de précaution contribuent à préserver la santé des salariés, à réduire la morbidité professionnelle et à assurer une productivité élevée de la recherche : il a été constaté que l'utilisation d'équipements de protection fiables et éprouvés réduit l'anxiété et favorise des actions plus rapides et plus efficaces.

Dans un laboratoire de bactériologie, le type d'infection qui a provoqué une maladie particulière dans le corps est déterminé. Pour ce faire, le sang, l’urine, le liquide céphalo-rachidien et d’autres fluides corporels sont cultivés sur divers milieux nutritifs. Parfois, des cultures sont prélevées sur la peau, les muqueuses du nez et de la gorge. Les ophtalmologistes, ayant diagnostiqué une conjonctivite, orientent également souvent le patient vers un examen bactériologique.

Si une conjonctivite aiguë ou chronique est suspectée, l'étude permet de clarifier le diagnostic et de déterminer le type de bactérie à l'origine de la conjonctivite. L'étude commence par l'utilisation d'un appareil spécial pour prélever le contenu du sac conjonctival et l'inoculer dans un bouillon spécial, puis dans un milieu nutritif. Après 24 à 48 heures, des colonies de bactéries se développent sur le milieu nutritif. Après une coloration spéciale, ils sont examinés au microscope et le type de micro-organismes vivant sur la conjonctive est déterminé. Ce sont le plus souvent des bactéries, moins souvent d'autres micro-organismes (champignons, amibes).

Pour décider de l'utilisation de l'antibiotique le plus efficace, la sensibilité des bactéries pathogènes aux médicaments est déterminée.

En conclusion, nous donnerons quelques chiffres et vous rappellerons encore une fois comment vous protéger contre l'infection.

N'oubliez pas que la terre, l'eau et l'air sont habités par des micro-organismes. À chaque mouvement, clignement d’œil et respiration, nous entrons en contact avec eux. Nos muqueuses les empêchent de pénétrer dans les organes vitaux. Faites attention aux faits intéressants recueillis par l'un des passionnés de microbiologie.

1 g de poussière des rues contient environ 2 millions de micro-organismes qui pénètrent dans l'air depuis le sol. Le plus grand nombre de microbes se trouve dans les 50 premiers centimètres du sol.

Les piscines d'eau contiennent de 5 à 10 000 bactéries par mètre carré. cm, et dans la rivière de la ville - 23 000 pour 1 m². cm.

Mais les données sur le nombre de micro-organismes dans 1 carré. m d'air qui nous entoure : dans l'air d'une forêt ou d'un parc - de 100 à 1000 microbes pour 1 m². m, dans l'air marin à 100 km de la côte - seulement 0,6, à une altitude de 2000 m - 3.

Une image complètement différente est observée dans la rue centrale d'une ville de taille moyenne - 3 500 microbes pour 1 m². m, dans une maison neuve - 4 500, dans une ancienne - 36 000, dans un hôpital - 79 000, dans un dortoir - 40 000.

Ces chiffres parlent d'eux-mêmes. Les micro-organismes comprennent des virus, des bactéries, des spores de champignons et de moisissures. De plus, la composition chimique de la poussière elle-même, notamment dans les rues des villes, dans les appartements et dans diverses industries, contient des impuretés chimiques et physiques nocives pour l'organisme. Nos muqueuses et notre peau ne peuvent pas toujours faire face à une telle charge sans notre aide. Afin de ne pas tomber malade, vous devez vous rappeler les règles de prévention.

Introduction

Comme la partie générale de toute autre science, la bactériologie générale ne traite pas de questions spécifiques (par exemple, l'identification d'espèces individuelles de bactéries), mais de problèmes en général ; sa méthodologie couvre des procédures de base largement utilisées dans une grande variété d'études en laboratoire. Ce support pédagogique n’a pas pour but d’identifier un groupe de micro-organismes. C'est la tâche des publications suivantes - sur la microbiologie privée et sanitaire. Cependant, les méthodes présentées ici peuvent être utiles dans n'importe quel domaine où des bactéries sont impliquées et peuvent être appliquées à des problèmes pratiques impliquant l'isolement et le typage de bactéries.

La bactériologie n'est devenue une science qu'après le développement de techniques uniques grâce auxquelles elle continue d'influencer et de pénétrer des domaines scientifiques ultérieurs tels que la virologie, l'immunologie et la biologie moléculaire. La technique d'utilisation de cultures pures développée par R. Koch et les réactions immunologiques et analyses chimiques utilisées pour la première fois par L. Pasteur n'ont pas perdu de leur importance.

La méthodologie de la bactériologie générale se reflète dans cette publication en utilisant une structure typique des manuels standards de cette discipline. Cependant, contrairement aux ateliers de laboratoire du cours de microbiologie destiné aux universités, celui-ci est présenté plus en détail dans certaines sections et est à titre indicatif seulement. Cette structure prend en compte la formation spécifique et la spécialisation des bactériologistes et des experts vétérinaires. Souvent, le matériel est présenté de manière arbitraire, de sorte que certaines méthodes sont mentionnées à plusieurs reprises, en raison du désir de démontrer leur interdépendance.

Laboratoire bactériologique

Les laboratoires de bactériologie en tant qu'unités structurelles sont organisés dans le cadre de laboratoires vétérinaires régionaux, départementaux, inter-districts, ainsi que dans la structure des laboratoires vétérinaires zonaux. Ils sont également organisés dans les centres de surveillance sanitaire et épidémiologique, dans les hôpitaux de maladies infectieuses, les hôpitaux généraux, certains hôpitaux spécialisés (par exemple en tuberculose, rhumatologie, dermatovénérologie) et dans les polycliniques. Les laboratoires de bactériologie font partie d'institutions de recherche spécialisées. Les laboratoires bactériologiques sont constamment sollicités pour confirmer ou établir une évaluation de l'aptitude de la viande à l'alimentation selon VSE.

Les objets de recherche dans les laboratoires de bactériologie sont :

1. Décharges du corps : urine, matières fécales, crachats, pus, ainsi que sang, matériel pathologique et cadavérique.

2. Objets du milieu extérieur : eau, air, sol, lessivages des équipements, aliments pour animaux, matières premières technologiques issues de l'abattage des animaux de ferme.

3. Produits alimentaires, échantillons de viande et de produits carnés, lait et produits laitiers dont l'adéquation à des fins alimentaires doit être évaluée.

Locaux de laboratoire de bactériologie et équipements de travail

Les spécificités des travaux microbiologiques nécessitent que la salle allouée au laboratoire soit isolée des pièces d'habitation, des unités alimentaires et autres locaux de production non essentiels.

Le laboratoire bactériologique comprend : des salles de laboratoire pour la recherche bactériologique et des locaux techniques ; autoclave ou stérilisation pour la désinfection des déchets et des ustensiles contaminés ; buanderie équipée pour faire la vaisselle ; cuisine bactériologique – pour préparer, mettre en bouteille, stériliser et stocker les milieux nutritifs ; vivarium pour garder des animaux d'expérimentation; matériel pour stocker les réactifs de rechange, la vaisselle, le matériel et l'équipement ménager.

Les locaux techniques classés, en tant qu'unités structurelles indépendantes, font partie de grands laboratoires bactériologiques. Dans les petits laboratoires, la cuisine bactériologique et la cuisine de stérilisation sont réunies dans une seule pièce ; Il n'y a pas de local spécial pour garder les animaux de laboratoire.

Les locaux des laboratoires de microbiologie sont répartis en 2 zones selon le degré de dangerosité pour le personnel :

I. Zone « infectieuse » - une pièce ou un groupe de salles de laboratoire où les agents biologiques pathogènes sont manipulés et stockés, le personnel est vêtu du type de vêtements de protection approprié ;

II. Zone « propre » - locaux où aucun travail n'est effectué avec du matériel biologique, le personnel est vêtu de vêtements personnels.

Les locaux les plus lumineux et les plus spacieux sont réservés aux salles de laboratoire dans lesquelles sont réalisées toutes les études bactériologiques. Les murs de ces pièces, jusqu'à une hauteur de 170 cm du sol, sont peints de couleurs claires avec de la peinture à l'huile ou recouverts de carrelage. Le sol est recouvert de relin ou de linoléum. Ce type de finition permet d'utiliser des solutions désinfectantes lors du nettoyage de la pièce.

Chaque pièce doit disposer d'un évier avec de l'eau courante et d'une étagère pour une bouteille de solution désinfectante.

L'une des pièces est équipée d'un box vitré - un local isolé avec un vestibule (pré-box) permettant d'effectuer des travaux dans des conditions aseptiques. Une table pour semer et un tabouret sont placés dans la boîte et des lampes bactéricides sont montées au-dessus du lieu de travail. Une armoire pour stocker le matériel stérile est placée dans l'antichambre. Les fenêtres et les portes des pièces situées en zone « contagieuse » doivent être scellées. La ventilation par aspiration existante de la zone « infectieuse » doit être isolée des autres systèmes de ventilation et équipée de filtres à air fins.

La salle de laboratoire est équipée de tables, d'armoires et d'étagères de type laboratoire pour ranger le matériel, les ustensiles, les peintures et les réactifs nécessaires au travail.

La bonne organisation du lieu de travail du bactériologiste et du laborantin est très importante pour le travail. Des tables de laboratoire sont installées près des fenêtres. Lors de leur placement, veillez à ce que la lumière tombe devant ou du côté de la personne qui travaille, de préférence du côté gauche, mais en aucun cas derrière. Il est conseillé que les salles d'analyse, notamment de microscopie, aient des fenêtres orientées au nord ou au nord-ouest, car le travail nécessite une lumière uniforme et diffuse. L'éclairage de la surface des tables de travail doit être de 500 lux. Pour faciliter la désinfection, la surface des tables de laboratoire est recouverte de plastique ou recouverte de fer. Chaque employé du laboratoire se voit attribuer un poste de travail séparé mesurant 150 x 60 cm.

Tous les lieux de travail sont équipés des éléments nécessaires au travail bactériologique quotidien, dont une liste est donnée dans le tableau 1.

Tableau 1.

Articles nécessaires au travail bactériologique

Désinfection

La désinfection est la destruction des micro-organismes présents dans les objets environnementaux.

Dans les laboratoires de microbiologie, les mesures de désinfection sont très largement utilisées. Lorsqu'ils terminent des travaux avec des matières infectieuses, les employés des laboratoires de bactériologie procèdent à une désinfection préventive de leurs mains et de leur lieu de travail.

Le matériel pathologique usé (fèces, urines, crachats, liquides divers, sang) est désinfecté avant d'être jeté à l'égout.

Les pipettes graduées et Pasteur, les spatules en verre et les instruments métalliques contaminés par du matériel pathologique ou une culture de microbes, immédiatement après leur utilisation, sont descendus dans des bocaux en verre avec une solution désinfectante situés sur la table de chaque lieu de travail.

Les lames et lamelles utilisées au travail sont également soumises à une désinfection obligatoire, car même un frottis fixé et coloré retient parfois des micro-organismes viables qui peuvent être source de contamination intra-laboratoire. Seuls les plats dans lesquels des micro-organismes ont été développés ne sont pas traités avec des désinfectants. Il est placé dans des cuves ou des bacs métalliques, scellés et soumis à l'autoclavage.

Le choix du désinfectant, la concentration de sa solution, le rapport entre la quantité de désinfectant et le matériel à désinfecter, ainsi que la durée de la période de désinfection sont établis en fonction de conditions précises, en tenant compte avant tout de la stabilité des microbes désinfectés, le degré de contamination attendu, la composition et la consistance du matériau dans lequel ils se trouvent .

Désinfection des mains après avoir travaillé avec des matières infectieuses et en cas de contact avec la peau.À la fin du travail avec du matériel infectieux, les mains sont désinfectées à titre prophylactique. Un coton ou une serviette en gaze est humidifié avec une solution de chloramine à 1%, d'abord la main gauche, puis la main droite sont essuyées dans l'ordre suivant : le dos de la main, la face palmaire, les espaces interdigitaux, le lit des ongles. Ainsi, les zones les moins contaminées sont traitées en premier, puis passent aux zones de la peau les plus fortement contaminées. Essuyez-vous les mains pendant 2 minutes successivement avec deux tampons. Lorsque les mains sont contaminées par une culture d'un microbe pathogène ou du matériel pathologique, les zones contaminées de la peau sont d'abord désinfectées. À cette fin, ils sont recouverts pendant 3 à 5 minutes d'un coton imbibé d'une solution de chloramine à 1%, puis le coton est versé dans un réservoir ou un seau contenant des déchets et les mains sont traitées avec un deuxième tampon dans le même comme lors d’une désinfection préventive. Après le traitement à la chloramine, lavez-vous les mains à l'eau tiède et au savon. Lorsque vous travaillez avec des bactéries qui forment des spores, le traitement des mains est effectué avec 1% de chloramine activée. Si du matériel infectieux entre en contact avec les mains, l'exposition au désinfectant est augmentée à 5 minutes.

Stérilisation

La stérilisation, contrairement à la désinfection, implique la destruction de tous les micro-organismes végétatifs et sporulés, pathogènes et non pathogènes présents dans l'objet à stériliser. La stérilisation s'effectue de différentes manières : vapeur, air chaud sec, ébullition, filtration, etc. Le choix de l'une ou l'autre méthode de stérilisation est déterminé par la qualité et les propriétés de la microflore de l'objet à stériliser.

Préparation et stérilisation du matériel de laboratoire

Avant la stérilisation, la verrerie de laboratoire est lavée et séchée. Les éprouvettes, flacons, flacons, matelas et flacons sont fermés par des bouchons en gaze de coton. Placez des bouchons en papier sur les bouchons de chaque récipient (sauf les tubes à essai).

Les bouchons en caoutchouc, en liège et en verre sont stérilisés dans un sac séparé attaché au col du plat. Les boîtes de Pétri sont stérilisées enveloppées dans du papier, 1 à 10 pièces chacune. Pipettes Pasteur 3-15 pcs. enveloppé dans du papier d’emballage. Un morceau de coton est placé au sommet de chaque pipette pour empêcher le matériau de pénétrer dans l'environnement. Lors de l'emballage des pipettes, il faut faire très attention afin de ne pas casser les extrémités scellées des capillaires. Pendant le fonctionnement, les pipettes sont retirées du sac par l'extrémité supérieure.

Du coton de sécurité est inséré dans la partie supérieure des pipettes graduées, comme dans les pipettes Pasteur, puis enveloppé dans du papier épais, prédécoupé en bandes de 2 à 2,5 cm de largeur et de 50 à 70 cm de longueur. La bande est posée sur la table, son. L'extrémité gauche est pliée et enveloppée dans la pointe de la pipette, puis, en faisant tourner la pipette, enroulez une bande de papier dessus. Pour éviter que le papier ne se déplie, l'extrémité opposée est tordue ou collée. Le volume de la pipette emballée est inscrit sur le papier. S'il y a des trousses à crayons, des pipettes graduées y sont stérilisées.

La verrerie de laboratoire est stérilisée :

a) chaleur sèche à une température de 180°C et 160°C, respectivement, pendant 1 heure et 150 minutes.

b) dans un autoclave à une pression de 1,5 atm. pendant 60 minutes, pour détruire la microflore des spores - 90 minutes à 2 guichets automatiques.

Stérilisation des seringues. Les seringues sont stérilisées démontées : séparément le cylindre et le piston dans une solution à 2% de bicarbonate de sodium pendant 30 minutes. Lorsque l'on travaille avec une microflore sporulée, la stérilisation est effectuée dans un autoclave à 132 ± 2°C (2 atm.) pendant 20 minutes, à 126 ± 2°C (1,5 atm.) - 30 minutes. La seringue stérilisée est assemblée après refroidissement, un piston est inséré dans le cylindre, une aiguille est mise en place après en avoir préalablement retiré le mandrin. L'aiguille, le cylindre et le piston sont pris avec une pince à épiler, qui est stérilisée avec la seringue.

Stérilisation des instruments métalliques. Les instruments métalliques (ciseaux, scalpels, pinces, etc.) sont stérilisés dans une solution de bicarbonate de sodium à 2 %, ce qui évite la rouille et la perte de tranchant. Il est recommandé d'envelopper les lames des scalpels et des ciseaux avec du coton avant de les plonger dans la solution.

Stérilisation des anses bactériennes. Les anses bactériennes en fil de platine ou de nichrome sont stérilisées à la flamme d'un brûleur à alcool ou à gaz. Cette méthode de stérilisation est appelée calcination ou flambage.

La boucle est placée en position horizontale dans la partie inférieure la plus froide de la flamme du brûleur pour éviter les projections de matière pathogène brûlée. Après avoir brûlé, la boucle est déplacée vers une position verticale, d'abord la partie inférieure, puis la partie supérieure du fil est chauffée au rouge et le support de boucle est brûlé. La calcination prend généralement 5 à 7 secondes.

Préparation pour la stérilisation et la stérilisation du papier, de la gaze et du coton. Le coton, la gaze, le papier filtre sont stérilisés dans une étuve à chaleur sèche à une température de 160°C dans l'heure à partir du moment où le thermomètre indique cette température ou dans un autoclave à une pression de 1 atm. dans les 30 minutes.

Avant la stérilisation, le papier et la gaze sont coupés en morceaux et le coton est roulé en boules ou en tampons de la taille requise. Après cela, chaque type de matériau est enveloppé séparément, en un ou plusieurs morceaux, dans du papier épais. Si l'emballage se brise, le matériel stérilisé doit être à nouveau stérilisé, car sa stérilité est altérée.

Stérilisation des gants et autres produits en caoutchouc. Les produits en caoutchouc (gants, tubes, etc.) contaminés par la forme végétative de microbes sont stérilisés par ébullition dans une solution de bicarbonate de sodium à 2 % ou par jet de vapeur pendant 30 minutes ; lorsqu'il est contaminé par une microflore sporulée, dans un autoclave à une pression de 1,5 à 2 atm. pendant 30 ou 20 minutes. Avant la stérilisation, les gants en caoutchouc sont saupoudrés de talc à l'intérieur et à l'extérieur pour éviter qu'ils ne collent. De la gaze est placée entre les gants. Chaque paire de gants est enveloppée séparément dans de la gaze et placée sous cette forme dans des boîtes.

Stérilisation de cultures microbiennes pathogènes. Les tubes à essai et les coupelles contenant des cultures microbiennes qui ne sont pas nécessaires à des travaux ultérieurs sont placés dans un réservoir métallique, le couvercle est scellé et soumis à la stérilisation. Les cultures de microbes pathogènes, formes végétatives, sont tuées en autoclave pendant 30 minutes sous une pression de 1 atm. La livraison des cuves pour stérilisation à l'autoclave est effectuée par une personne spécialement désignée contre signature. Le régime de stérilisation est enregistré dans un journal spécial. Lors de la destruction des cultures de microbes des groupes de pathogénicité I et II, ainsi que du matériel contaminé ou suspecté d'être contaminé par des agents pathogènes affectés à ces groupes, les cuves contenant les déchets sont transférées sur des plateaux métalliques à parois hautes en présence d'un accompagnateur autorisé à travailler avec du matériel infectieux.

Types de stérilisation

Stérilisation par ébullition. La stérilisation par ébullition est réalisée dans un stérilisateur. De l'eau distillée est versée dans le stérilisateur, car l'eau du robinet forme du tartre. (Les objets en verre sont immergés dans l'eau froide, les objets métalliques dans l'eau chaude additionnée de bicarbonate de sodium). Les articles à stériliser sont bouillis à feu doux pendant 30 à 60 minutes. Le début de la stérilisation est considéré comme le moment où l’eau bout dans le stérilisateur. À la fin de l'ébullition, les instruments sont pris avec des pincettes stériles, qui sont bouillies avec d'autres objets.

Stérilisation à chaleur sèche. La stérilisation par chaleur sèche est réalisée dans un four Pasteur. Le matériel préparé pour la stérilisation est placé sur les étagères afin qu'il n'entre pas en contact avec les murs. L'armoire est fermée puis le chauffage est allumé. La durée de stérilisation à une température de 150°C est de 2 heures, à 165°C - 1 heure, à 180°C - 40 minutes, à 200°C - 10-15 minutes (à 170°C le papier et le coton tournent jaune et carbonisé à des températures plus élevées). Le début de la stérilisation est considéré comme le moment où la température dans le four atteint la hauteur souhaitée. À la fin de la période de stérilisation, le four est éteint, mais les portes de l'armoire ne sont ouvertes qu'après refroidissement complet, car l'air froid entrant dans l'armoire peut provoquer la formation de fissures sur les plats chauds.

Stérilisation à la vapeur sous pression. La stérilisation à la vapeur sous pression est réalisée en autoclave. L'autoclave est constitué de deux chaudières insérées l'une dans l'autre, d'un caisson et d'un couvercle. La chaudière extérieure est appelée chambre eau-vapeur, la chaudière intérieure est appelée chambre de stérilisation. La vapeur est générée dans une chaudière eau-vapeur. Le matériel à stériliser est placé dans le chaudron intérieur. Il y a de petits trous dans la partie supérieure de la chaudière de stérilisation à travers lesquels passe la vapeur provenant de la chambre eau-vapeur. Le couvercle de l'autoclave est hermétiquement vissé au boîtier. En plus des pièces principales répertoriées, l'autoclave comporte un certain nombre de pièces qui régulent son fonctionnement : manomètre, verre du compteur d'eau, soupape de sécurité, vannes de sortie, d'air et de condensation. Le manomètre est utilisé pour déterminer la pression créée dans la chambre de stérilisation. La pression atmosphérique normale (760 mmHg) est considérée comme nulle. Par conséquent, dans un autoclave inactif, l'aiguille du manomètre est à zéro. Il existe une certaine relation entre les lectures du manomètre et la température (tableau 2).

Tableau 2.

Relation entre les lectures du manomètre et la température d'ébullition de l'eau

La ligne rouge sur l'échelle du manomètre détermine la pression de fonctionnement maximale autorisée dans l'autoclave. La soupape de sécurité sert à protéger contre une accumulation excessive de pression. Il est réglé à une pression donnée, c'est-à-dire la pression à laquelle la stérilisation doit être effectuée ; lorsque l'aiguille du manomètre franchit la ligne, la vanne de l'autoclave s'ouvre automatiquement et libère l'excès de vapeur, ralentissant ainsi la montée en pression.

Sur la paroi latérale de l'autoclave se trouve un verre de jauge d'eau indiquant le niveau d'eau dans la chaudière eau-vapeur. Il y a deux lignes horizontales sur le tube en verre du compteur d'eau - inférieure et supérieure, indiquant respectivement les niveaux d'eau inférieur et supérieur autorisés dans la chambre eau-vapeur. La vanne d'air est conçue pour éliminer l'air des chambres de stérilisation et de l'eau-vapeur au début de la stérilisation, car l'air, étant un mauvais conducteur de chaleur, perturbe le régime de stérilisation. Au fond de l'autoclave se trouve un robinet de condensation pour libérer la chambre de stérilisation du condensat formé pendant la période de chauffage du matériel stérilisé.

Règles pour travailler avec un autoclave. Avant de commencer les travaux, inspectez l'autoclave et l'équipement de contrôle. Dans les autoclaves à contrôle automatique de la vapeur, les flèches du vacuomètre électrique de la chambre eau-vapeur sont réglées en fonction du mode de stérilisation : la flèche inférieure est réglée sur 0,1 atm. inférieur, supérieur - de 0,1 atm. au-dessus de la pression de service, la chambre eau-vapeur est remplie d'eau jusqu'au repère supérieur du verre doseur. Pendant la période de remplissage en eau, la vanne du tuyau par lequel la vapeur entre dans la chambre est maintenue ouverte pour permettre à l'air libre de sortir de la chaudière. La chambre de stérilisation de l'autoclave est chargée du matériel à stériliser. Après cela, le couvercle (ou la porte) de l'autoclave est fermé, hermétiquement sécurisé avec un verrou central ou des boulons ; pour éviter toute déformation, vissez les boulons en croix (le long du diamètre). Allumez ensuite la source de chauffage (courant électrique, vapeur) en fermant la vanne du tuyau reliant la source de vapeur à la chambre de stérilisation. Avec le début de la formation de vapeur et la création de pression dans la chambre eau-vapeur, une purge est effectuée (élimination de l'air de la chaudière de stérilisation). La méthode d'élimination de l'air est déterminée par la conception de l'autoclave. Tout d'abord, l'air sort en portions séparées, puis un flux de vapeur régulier et continu apparaît, indiquant que l'air a été complètement évacué de la chambre de stérilisation. Après avoir retiré l'air, le robinet est fermé et une augmentation progressive de la pression commence dans la chambre de stérilisation.

Le début de la stérilisation est considéré comme le moment où l'aiguille du manomètre indique la pression réglée. Après cela, l'intensité du chauffage est réduite afin que la pression dans l'autoclave reste au même niveau pendant le temps requis. A la fin du temps de stérilisation, le chauffage est arrêté. Fermez la vanne du pipeline fournissant de la vapeur à la chambre de stérilisation et ouvrez la vanne du tuyau de condensation (descendant) pour réduire la pression de la vapeur dans la chambre. Une fois que l'aiguille du manomètre est tombée à zéro, desserrez lentement les dispositifs de serrage et ouvrez le couvercle de l'autoclave.

La température et la durée de la stérilisation sont déterminées par la qualité du matériau à stériliser et les propriétés des micro-organismes avec lesquels il est infecté.

Le contrôle de la température dans la chambre de stérilisation est effectué périodiquement à l'aide de tests bactériologiques. Les biotests sont réalisés par les laboratoires bactériologiques du Centre des Sciences Sensibles. Si ces tests échouent, l'état technique de l'autoclave est vérifié.

Stérilisation à la vapeur courante. La stérilisation à vapeur courante s'effectue dans un appareil à vapeur courante Koch ou dans un autoclave avec le couvercle dévissé et la vanne de sortie ouverte. L'appareil de Koch est un cylindre creux en métal à double fond. L'espace entre les plaques inférieures supérieure et inférieure est rempli aux 2/3 d'eau (il y a un robinet pour évacuer l'eau restante après stérilisation). Le couvercle de l'appareil comporte un trou au centre pour un thermomètre et plusieurs petits trous pour que la vapeur s'échappe. Le matériel à stériliser est chargé sans serrer dans la chambre de l'appareil pour assurer un contact maximal avec la vapeur. Le début de la stérilisation est considéré comme le moment à partir du moment où l'eau bout et où la vapeur entre dans la chambre de stérilisation. Dans un appareil à vapeur fluide, les milieux nutritifs sont principalement stérilisés, dont les propriétés changent à des températures supérieures à 100°C. La stérilisation à la vapeur courante doit être répétée, car un seul chauffage à une température de 100°C ne garantit pas une désinfection complète. Cette méthode est appelée stérilisation fractionnée : le matériel stérilisé est traité avec un courant de vapeur pendant 30 minutes par jour pendant 3 jours. Entre les stérilisations, le matériau est conservé à température ambiante pour que les spores germent sous des formes végétatives, qui meurent lors du chauffage ultérieur.

Tyndalisation. La tyndalisation est une stérilisation fractionnée utilisant des températures inférieures à 100°C, proposée par Tyndall. Le matériel à stériliser est chauffé dans un bain-marie équipé d'un thermostat pendant une heure à une température de 60-65°C pendant 5 jours ou à 70-80°C pendant 3 jours. Entre les chauffages, le matériau traité est maintenu à une température de 25 °C pour que les spores germent sous des formes végétatives, qui meurent lors du chauffage ultérieur. La Tindalisation est utilisée pour défertiliser les milieux nutritifs contenant des protéines.

Stérilisation mécanique par ultrafiltres bactériens. Les filtres bactériens sont utilisés pour libérer le liquide des bactéries qu'il contient, ainsi que pour séparer les bactéries des virus, phages et exotoxines. Les virus ne sont pas retenus par les filtres bactériens, l'ultrafiltration ne peut donc pas être considérée comme une stérilisation au sens habituel du terme. Pour la fabrication des ultrafiltres, on utilise des matériaux finement poreux (kaolin, amiante, nitrocellulose, etc.) capables de piéger les bactéries.

Les filtres à amiante (filtres Seitz) sont des plaques d'amiante d'une épaisseur de 3 à 5 mm et d'un diamètre de 35 et 140 mm pour filtrer de petits et grands volumes de liquide. Dans notre pays, les filtres à amiante sont fabriqués sous deux marques : « F » (filtrant), qui retiennent les particules en suspension mais laissent passer les bactéries, et « SF » (stérilisant), plus denses, retenant les bactéries. Avant utilisation, les filtres à amiante sont montés dans des dispositifs de filtration et sont stérilisés avec eux dans un autoclave. Les filtres à amiante sont utilisés une seule fois. Les ultrafiltres à membrane sont en nitrocellulose et sont des disques blancs d'un diamètre de 35 mm et d'une épaisseur de 0,1 mm.

Les filtres bactériens diffèrent par la taille de leurs pores et sont désignés par des numéros de série (tableau 3).

Tableau 3.

Filtres bactériens

Immédiatement avant utilisation, les filtres à membrane sont stérilisés par ébullition. Les filtres sont placés dans de l'eau distillée, chauffée à une température de 50 à 60°C pour éviter qu'ils ne se tordent, et bouillis à feu doux pendant 30 minutes, en changeant l'eau 2 à 3 fois. Pour éviter tout dommage, les filtres stérilisés sont retirés du stérilisateur à l'aide d'une pince à épiler flambée et refroidie aux pointes lisses.

Pour filtrer les liquides, des filtres bactériens sont montés dans des dispositifs de filtration spéciaux, notamment un filtre Seitz.

Il se compose de 2 parties : une partie supérieure, en forme de cylindre ou d'entonnoir, et une partie inférieure de support de l'appareil, avec une table dite filtrante constituée d'un treillis métallique ou d'une plaque de céramique propre, sur laquelle est posée une membrane ou de l'amiante. le filtre est placé. La partie support de l'appareil a la forme d'un entonnoir dont la partie effilée est située dans le bouchon en caoutchouc du col de la fiole Bunsen. En état de fonctionnement, la partie supérieure de l'appareil est fixée à la partie inférieure par des vis. Avant le début de la filtration, les jonctions des différentes parties de l'installation sont remplies de paraffine pour créer une étanchéité. Le tube de sortie du ballon est relié par un tube en caoutchouc à paroi épaisse à une pompe à jet d'eau, à huile ou à vélo. Après cela, le liquide filtré est versé dans le cylindre ou l'entonnoir de l'appareil et la pompe est mise en marche, créant un vide dans le récipient récepteur. En raison de la différence de pression qui en résulte, le liquide filtré passe à travers les pores du filtre jusqu'au récepteur. Les micro-organismes restent à la surface du filtre.

Préparation des frottis

Pour étudier les micro-organismes sous forme colorée, un frottis est réalisé sur une lame de verre, séché, fixé puis coloré.

Le matériau de test est réparti en couche mince sur la surface d'une lame de verre bien dégraissée.

Les frottis sont préparés à partir de cultures microbiennes, de matériel pathologique (crachats, pus, urine, sang, etc.) et d'organes de cadavres.

La technique de préparation des frottis est déterminée par la nature du matériel étudié.

Préparation de frottis à partir de cultures microbiennes avec un milieu nutritif liquide et à partir de matériel pathologique liquide (urine, liquide céphalo-rachidien, etc.). Une petite goutte du liquide à tester est appliquée avec une anse bactérienne sur une lame de verre et, à l'aide de mouvements circulaires, les anses sont réparties en une couche uniforme sous la forme d'un cercle du diamètre d'une pièce de monnaie.

Préparation des frottis sanguins. Une goutte de sang est appliquée sur la lame de verre, plus près de l'une de ses extrémités. Le deuxième verre - dépoli, qui doit être plus étroit que le verre objet, est placé sur le premier à un angle de 45° et amené à une goutte de sang jusqu'à ce qu'il entre en contact avec celle-ci. Une fois que le sang s'est répandu le long du bord poli, un mouvement de glissement est effectué avec le verre de droite à gauche, répartissant uniformément le sang en une fine couche sur toute la surface du verre. L'épaisseur du trait dépend de l'angle entre les verres : plus l'angle est aigu, plus le trait est fin. Un frottis correctement préparé a une couleur rose clair et la même épaisseur partout.

Préparer une goutte épaisse. Une goutte de sang est appliquée au milieu de la lame à l'aide d'une pipette Pasteur, ou le verre est appliqué directement sur la goutte de sang qui dépasse. Le sang appliqué sur le verre est enduit d'une anse bactérienne de sorte que le diamètre du frottis obtenu corresponde à la taille d'une pièce de monnaie. Le verre est laissé en position horizontale jusqu'à ce que le sang sèche. Le sang dans la « goutte épaisse » est réparti de manière inégale, formant un bord irrégulier.

Préparation d'un frottis à partir d'un matériau visqueux (expectorations, pus). Les crachats ou le pus appliqués sur la lame la plus proche du bord étroit sont recouverts d'une autre lame. Les verres sont légèrement pressés les uns contre les autres.

Après cela, les extrémités libres du verre sont saisies avec les doigts 1 et 2 des deux mains et déplacées dans des directions opposées de sorte que lors du déplacement, les deux verres s'ajustent étroitement l'un à l'autre. Le résultat est des frottis avec un matériau uniformément réparti occupant une grande surface.

Préparation de frottis de cultures à partir de milieux nutritifs solides. Une goutte d'eau est placée au milieu d'une lame de verre propre et bien graissée, et une anse bactérienne contenant une petite quantité de la culture microbienne étudiée y est insérée, de sorte que la goutte de liquide devienne légèrement trouble. Après cela, l'excès de matière microbienne sur l'anse est brûlé dans une flamme et le frottis est préparé selon la méthode décrite ci-dessus.

Préparation de frottis d'organes et de tissus. Aux fins de désinfection, la surface de l'organe est cautérisée avec les mâchoires chauffées d'une pince à épiler, une incision est pratiquée à cet endroit et un petit morceau de tissu est découpé dans les profondeurs avec des ciseaux pointus, qui sont placés entre deux lames de verre. . Procédez ensuite de la même manière que lors de la préparation d'un frottis de pus et d'expectorations. Si le tissu de l'organe est dense, un grattage est effectué à partir de la profondeur de l'incision avec un scalpel. Le matériau obtenu par grattage est réparti en couche mince sur la surface du verre à l'aide d'un scalpel ou d'une anse bactérienne.

Pour étudier la position relative des éléments tissulaires et des micro-organismes qui les composent, des frottis d'empreintes digitales sont réalisés. Pour ce faire, un petit morceau de tissu découpé au milieu de l'organe est saisi avec une pince à épiler et appliqué successivement plusieurs fois avec la surface coupée sur une lame de verre, obtenant ainsi une série de frottis-empreintes.

Séchage et fixation des frottis. Le frottis préparé sur lame de verre est séché à l'air et fixé après séchage complet. Une fois fixé, le frottis est fixé sur la surface de la lame de verre et, par conséquent, lors de la coloration ultérieure de la préparation, les cellules microbiennes ne sont pas lavées. De plus, les cellules microbiennes tuées se colorent mieux que les cellules vivantes.

Il existe une méthode physique de fixation, basée sur l'effet d'une température élevée sur la cellule microbienne, et des méthodes chimiques, qui impliquent l'utilisation d'agents provoquant la coagulation des protéines. Ne pas enregistrer les frottis contenant des agents pathogènes des groupes de pathogénicité I à II au-dessus d'une flamme.

Méthode physique de fixation. La lame avec la préparation est prise avec une pince à épiler ou les doigts I et II de la main droite par les côtes avec un mouvement vers le haut et déplacée doucement 2 à 3 fois sur la partie supérieure de la flamme du brûleur. L'ensemble du processus de fixation ne devrait pas prendre plus de 2 secondes. La fiabilité de la fixation est vérifiée par la technique simple suivante : la surface sans traces d'une lame de verre est appliquée sur la surface arrière de la main gauche. Lorsque le frottis est correctement fixé, le verre doit être chaud, mais ne pas provoquer de sensation de brûlure.

Méthode de fixation chimique. Pour fixer les frottis, les produits chimiques et composés répertoriés dans le tableau 4 sont également utilisés.

Tableau 4.

Substances pour fixation chimique

La lame avec le frottis séché est immergée dans un flacon contenant un agent fixateur puis séchée à l'air.

Traits de coloration

Technique de peinture par frottis. Pour colorer les frottis, on utilise des solutions de peinture ou du papier colorant, comme le propose A.I. Sinev. La simplicité de préparation, la facilité d'utilisation, ainsi que la possibilité de conserver le papier encreur pendant une durée indéfinie ont été à la base de leur utilisation généralisée dans diverses méthodes de coloration.

Traits de coloration avec du papier encreur. Quelques gouttes d'eau sont appliquées sur la préparation séchée et fixée, et des morceaux de papier coloré mesurant 2´2 cm sont placés. Pendant toute la durée de la coloration, le papier doit rester humide et bien ajusté à la surface du verre. Lors du séchage, le papier est en outre humidifié avec de l'eau. La durée de coloration du frottis est déterminée par la méthode de coloration. À la fin de la coloration, le papier est soigneusement retiré à l'aide d'une pince à épiler, le frottis est lavé à l'eau du robinet et séché à l'air ou avec du papier filtre.

Frottis de coloration avec des solutions colorantes. Le colorant est appliqué sur la préparation séchée et fixée à l'aide d'une pipette en quantité telle qu'il recouvre la totalité du frottis. Lors de la coloration de frottis avec des solutions concentrées de colorants (fuchsine phénique Ziehl, gentiane carbolique ou violet cristallin), la coloration se fait à travers un papier filtre qui retient les particules de colorant : une bande de papier filtre est placée sur un frottis fixe et une solution de colorant est versée dessus. .

Pour l'examen microscopique, des frottis préparés, séchés et fixés sont colorés. La coloration peut être simple ou complexe. La peinture simple consiste à appliquer une peinture sur un frottis pendant une certaine période de temps. Le plus souvent, pour une coloration simple, on utilise de l'alcool-eau (1:10), de la fuchsine Pfeiffer, du bleu de méthylène de Leffler et de la safranine. L'éosine, comme une peinture acide, est utilisée uniquement pour colorer le cytoplasme des cellules et teinter le fond. La fuchsine acide est totalement inadaptée à la coloration des bactéries.

Les laboratoires de diagnostic bactériologique clinique dans les hôpitaux mènent les études nécessaires pour établir ou clarifier le diagnostic d'une maladie infectieuse, en surveillant l'efficacité du traitement.

La spécialisation des laboratoires de bactériologie des hôpitaux est déterminée par le profil de l'hôpital (maladies infectieuses aiguës, maladies infectieuses infantiles, maladies sexuellement transmissibles, tuberculose, etc.). Les laboratoires bactériologiques des stations sanitaires et épidémiologiques, ainsi que les laboratoires cliniques, effectuent des travaux de diagnostic, desservent les hôpitaux qui ne disposent pas de leurs propres laboratoires, effectuent des examens préventifs de la population et des examens sanitaires et bactériologiques des produits alimentaires et de l'eau.

Outre les laboratoires médicaux, il existe un vaste réseau de laboratoires de bactériologie vétérinaire qui réalisent des études diagnostiques et préventives des maladies infectieuses chez les animaux (voir Laboratoire vétérinaire). Les laboratoires bactériologiques qui remplissent des fonctions de contrôle sont hautement spécialisés, comme par exemple les laboratoires bactériologiques des usines de distribution d'eau, les laboratoires de contrôle des entreprises produisant des vaccins, sérums et autres préparations bactériennes. Des laboratoires bactériologiques spéciaux sont organisés dans les établissements de désinfection. Leur mission est le contrôle de la qualité bactériologique de la désinfection réalisée. A côté des laboratoires bactériologiques de profil médical et vétérinaire, il existe des laboratoires bactériologiques spécialisés répondant aux besoins de l'industrie alimentaire (cave, boulangerie, brasserie et autres entreprises), de l'agriculture, etc. Contrairement aux laboratoires bactériologiques répertoriés, qui résolvent des problèmes pratiques, dans la structure des instituts de recherche scientifiques correspondants, il existe des laboratoires bactériologiques de différents profils, conçus pour résoudre diverses tâches de recherche. Les laboratoires bactériologiques peuvent être fixes ou mobiles. Ces derniers sont utilisés pour la maintenance sanitaire et anti-épidémique des unités militaires, ainsi qu'en conditions expéditionnaires et sur le terrain (voir Laboratoire, en conditions militaires sur le terrain). En plus des laboratoires mobiles, les troupes disposent également de laboratoires fixes. La spécificité des recherches menées dans les laboratoires de bactériologie détermine la structure des laboratoires et leur mode de fonctionnement.

La principale exigence des laboratoires de bactériologie et découlant des spécificités de leur travail est la création de conditions garantissant que la recherche se déroule dans les conditions les plus stériles et garantit le personnel et les autres contre une éventuelle infection. La structure d'un laboratoire de bactériologie comprend : le laboratoire lui-même et un certain nombre d'unités supplémentaires. Ceux-ci incluent : l'environnement, le lavage, la préparation, la stérilisation et le vivarium (voir). Les divisions répertoriées, en tant qu'unités structurelles indépendantes, font partie de grands laboratoires bactériologiques. Dans les petits laboratoires bactériologiques, il n'y a pas de vivarium ni de salle de préparation spéciale, mais l'environnement et la salle de stérilisation peuvent être combinés dans une seule pièce.

Appareil et équipement

Les locaux des laboratoires de bactériologie doivent être suffisamment lumineux et spacieux. Les murs doivent être peints avec de la peinture à l'huile et le sol ne doit présenter aucune fissure. Les fenêtres du laboratoire doivent être orientées au nord ou au nord-ouest. Face au sud, les fenêtres sont recouvertes de rideaux blancs. Le laboratoire de bactériologie doit disposer d'un évier ou d'un lavabo, au-dessus duquel un flacon de solution désinfectante pour les mains est placé sur une étagère. La table de travail du bactériologiste, si possible, est située à 1 m de la fenêtre et recouverte de linoléum ou de verre. Un brûleur à gaz est posé sur la table (s'il n'y a pas de brûleur à gaz, un brûleur à alcool). L'équipement obligatoire pour le lieu de travail est un pot pour pipettes avec une solution désinfectante (solution d'acide phénique à 3%), un récipient fermé en porcelaine ou en verre pour le coton, un bloc - support pour une anse bactérienne, un ensemble d'étalons bactériens, des supports pour tubes à essai , cuvettes d'émail, pinces, ciseaux et scalpel, lames propres avec et sans puits et lamelles. Généralement, on utilise des lames de dimensions 26 X X 76 mm et d'épaisseur de 1 à 1,2 mm, des lamelles de 18 x 18 ou 20 x 20 mm. Le laboratoire de bactériologie doit être équipé de plateaux métalliques pour transporter les boîtes de Pétri, de seaux ou de réservoirs galvanisés pour éliminer les ustensiles ou matériels infectés. Les microscopes sont stockés dans un étui ou sous un couvercle en verre. Le bureau ne doit pas être encombré d'objets inutiles. Généralement, un laboratoire de bactériologie est équipé d'une petite table supplémentaire pour la coloration des préparations fixes. Sur une telle table se trouvent : un ensemble de colorants et réactifs nécessaires dans un bloc avec des pipettes et des cartouches en caoutchouc (Fig. 1), une cuvette d'émail ou un cristalliseur avec un support pour les préparations, une pince à épiler ou une pince à cornet (Fig. 2) pour fixation de lames de verre, de feuilles de papier filtre pour éliminer le liquide des préparations lavées, d'une rondelle (Fig. 3) ou d'une bouteille d'eau. Le laboratoire de bactériologie est équipé d'une variété de verrerie nécessaire à la recherche. En plus de la verrerie chimique habituelle (cylindres, flacons, béchers, pipettes doseuses, etc.), une verrerie spéciale destinée aux analyses bactériologiques et immunologiques est nécessaire : 1) boîtes de Petri en verre utilisées pour la culture de bactéries sur milieux solides et l'obtention de colonies bactériennes isolées ; 2) matelas bactériens (Fig. 4) - flacons plats (taille 22 x 17 x 5 cm), qui sont utilisés pour cultiver un grand nombre de bactéries ; 3) Tubes de Roux avec attache pour la culture de bactéries sur des bancs de pommes de terre ; 4) Tubes Wassermann d'une longueur de 90 mm et d'un diamètre interne de 9 à 10 mm pour réaliser la réaction de fixation du complément et la réaction d'agglutination ; 5) des tubes de précipitation de 90 mm de long et de 3 à 5 mm de diamètre pour organiser la réaction de précipitation ; 6) tubes bactériens utilisés pour cultiver des bactéries sur des milieux nutritifs solides et liquides ; 7) Pipettes Pasteur utilisées pour inoculer des matières liquides, diluer des liquides au goutte-à-goutte, appliquer des colorants, etc. ; 8) Pipettes Mohr ou pipettes à expansion sphérique dans la partie médiane pour l'inoculation du matériel liquide infecté, ainsi que pipettes automatiques ou pipettes avec poires en caoutchouc, éliminant l'aspiration du matériel par la bouche. Pour faire pousser des cultures dans des milieux nutritifs liquides, stocker et mettre en bouteille des milieux nutritifs, des réactifs, etc., de la verrerie de laboratoire ordinaire est utilisée. La verrerie utilisée dans un laboratoire bactériologique doit d'abord être lixiviée, pour laquelle elle est généralement bouillie dans une solution à 1 à 2 % d'acide chlorhydrique. La désinfection des plats bactériologiques dans lesquels sont cultivés des microbes doit être effectuée uniquement à haute température sans utiliser de désinfectants, car la présence de ces derniers, même sous forme de traces, peut inhiber davantage le développement des microbes. L'inoculation des micro-organismes en laboratoire de bactériologie est réalisée à l'aide d'anses bactériologiques, de spatules en verre ou en platine (Fig. 5 et 6). La culture des bactéries est effectuée dans un thermostat d'air (voir) et dans de grands laboratoires bactériologiques - dans des salles thermostatiques spéciales.

Lorsqu’un contrôle précis de la température est requis et que les bactéries se développent pendant une période de temps relativement courte ou lors de réactions immunologiques, il est pratique d’utiliser des ultrathermostats à eau. Chaque laboratoire de bactériologie où l'on étudie les anaérobies doit être équipé d'un anaérostat (voir), de dessiccateurs et de pompes à vide pour éliminer l'air. Ces derniers sont également utilisés pour le filtrage. Pour obtenir les meilleures conditions d'asepsie requises lors de l'inoculation, de l'isolement ou du réensemencement des cultures, les laboratoires de bactériologie sont équipés de boîtes en verre spéciales avec pré-boîtes. La boîte contient un brûleur à gaz, un récipient contenant une solution désinfectante et, si possible, une lampe à uviol bactéricide. En l'absence de boîte fixe, lors de la réalisation de travaux nécessitant un haut degré d'asepsie, vous pouvez utiliser une boîte de table portable (voir Boîtes microbiologiques).

Les cultures bactériennes, les sérums thérapeutiques et diagnostiques, les phages et autres substrats biologiques (sérums, solutions peptoniques, etc.) sont conservés au réfrigérateur. Les cultures bactériennes sont censées être conservées dans des tubes ou des ampoules scellés, pour lesquels les laboratoires de bactériologie doivent disposer d'un chalumeau de scellement ou d'un chalumeau ordinaire. Un accessoire obligatoire pour tout laboratoire de bactériologie est un microscope (voir). Pour la plupart des études, un microscope MBI-3 et des illuminateurs sont utilisés. Les laboratoires de recherche en bactériologie sont également équipés de microscopes à contraste de phase, fluorescents et électroniques. Pour compter quantitativement les colonies bactériennes cultivées sur des boîtes de Pétri, des compteurs de différents systèmes sont utilisés. L'un de ces compteurs est un compteur automatique doté d'un dispositif de numérisation et d'un dispositif de commande de télévision qui permet de compter jusqu'à 500 tasses par heure (Fig. 7). Des éléments importants de l'équipement des laboratoires de bactériologie sont les dispositifs d'agitation, utilisés dans les cas où il est nécessaire d'assurer le mélange et l'agitation du matériel pendant un certain temps (défibrination du sang, homogénéisation du matériel, etc.). Pour sédimenter les particules denses (cellules microbiennes, cellules tissulaires, suspension du matériau à tester) situées dans le liquide, des centrifugeuses sont utilisées (voir). Pour la plupart des études, on utilise le plus souvent des centrifugeuses tournant à une vitesse de 3 000 à 3 500 tr/min. En l’absence de centrifugeuses électriques, des centrifugeuses à commande manuelle sont utilisées.

Les activités des laboratoires de bactériologie dépendent en grande partie du respect de l'exigence fondamentale : travailler dans des conditions aseptiques avec des objets stériles (instruments, milieux de culture, verrerie). Les équipements de stérilisation (voir) occupent donc une place importante dans l'équipement des laboratoires de bactériologie. Chaque laboratoire de bactériologie dispose d'un autoclave (voir), d'un appareil Koch, d'un four Pasteur (voir Four Pasteur) et d'un appareil de coagulation du sérum. Pour la stérilisation par ébullition, on utilise des stérilisateurs conventionnels (voir), chauffés à partir d'un réseau électrique ou d'autres moyens.

Pour la stérilisation des substrats liquides qui changent lorsqu'ils sont exposés à la température, des filtres bactériens sont utilisés (voir). Le séchage des objets humidifiés (plats, instruments) après stérilisation à la vapeur ou sous pression est effectué dans des armoires de séchage (voir). L'équipement des laboratoires de bactériologie nécessaire à la préparation des milieux nutritifs les plus couramment utilisés, outre les équipements spécifiés, comprend des dispositifs de remplissage des milieux, des ensembles de réactifs et de la verrerie pour effectuer certaines analyses chimiques (dosage de l'azote aminé, tryptophane, chlorures). , etc.), ainsi que des instruments et réactifs pour déterminer le pH de l'environnement ; indicateur universel, indicateurs et comparateur Michaelis ou potentiomètre.

Le travail avec des animaux dans les laboratoires bactériologiques est effectué dans une salle spéciale - un vivarium. Dans les laboratoires de bactériologie proprement dits, les expériences sur les animaux ne sont pas autorisées. Pour effectuer les travaux de base avec les animaux (prise de sang, réalisation d'analyses biologiques, réactions diagnostiques, etc.), vous devez disposer : d'une balance pour peser les souris, les porcs et les lapins, de machines ou dispositifs pour les fixer (Fig. 8), d'un ensemble de seringues, numéros pour étiquettes d'animaux (ou colorants), épilateurs.

Conseils juridiques gratuits :

La spécificité du travail bactériologique détermine des exigences particulièrement élevées en matière de propreté des locaux des laboratoires bactériologiques. La pureté de l'air et l'absence de poussière sont particulièrement importantes. Il est préférable de nettoyer les locaux des laboratoires de bactériologie à la fin de la journée de travail ou plusieurs heures avant le début des travaux, car la poussière soulevée dans l'air lors du nettoyage augmente la teneur en microbes et rend difficile le travail stérile. Il est conseillé, après avoir nettoyé les locaux avant les travaux, de les irradier avec des lampes bactéricides uviol pendant 0,5 à 1 heure. Afin de prévenir la contamination intra-laboratoire et la possibilité de propagation d'une infection lors du travail dans les laboratoires de bactériologie, les règles de base suivantes doivent être respectées : 1) toutes les personnes présentes dans le laboratoire doivent porter une blouse ; 2) les conversations et les marches inutiles ne sont pas autorisées ; 3) chaque salarié doit utiliser uniquement le lieu de travail qui lui est attribué ; 4) il est interdit de manger et de fumer dans le laboratoire de bactériologie ; 5) lorsque vous travaillez avec du matériel infectieux, vous devez utiliser des outils (pinces, aiguilles, crochets) et en aucun cas le toucher avec vos mains ; tout équipement ayant été en contact avec du matériel infectieux doit être stérilisé ou détruit ; 6) lors de l'aspiration de matériaux liquides, il est recommandé d'utiliser des poires en caoutchouc ; les pipettes doivent être fermées avec des bouchons en coton ; 7) la transfusion de liquides infectés d'un récipient à l'autre est effectuée sur un plateau ou un cristalliseur rempli de liquide désinfectant ; 8) tous les travaux liés au semis, au réensemencement, à l'isolement des cultures et à la préparation de préparations à partir de matériel infecté sont effectués au brûleur, en brûlant les bords des éprouvettes, des anses, des spatules, etc. ; 9) les tubes à essai, flacons, bouteilles, etc., dans lesquels du matériel infecté est placé au cours du processus de travail, sont immédiatement étiquetés en indiquant la nature du matériel, le nom et le numéro de la culture et la date ; 10) si du matériel infectieux entre en contact avec les objets environnants, il est nécessaire de procéder immédiatement à une désinfection approfondie : remplir la zone avec une solution désinfectante, puis, si possible, la brûler avec un tampon d'alcool brûlant ; 11) les objets et matériels infectés pendant le travail sont enregistrés, collectés dans des réservoirs ou des seaux, fermés, scellés et stérilisés le même jour ; 12) les cultures, si nécessaire, sont conservées dans des colonnes de gélose sous huile dans des tubes scellés avec étiquettes ; 13) l'enregistrement et la comptabilité de toutes les cultures, ainsi que des animaux infectés pendant le travail, sont tenus dans un journal à l'aide d'un formulaire spécial.

Bibliographie : Meynell D. et Meynell E. Microbiologie expérimentale, trans. de l'anglais, M., 1967, bibliogr.; Timakov V.D. et Goldfar b D.M. Fondements de la bactériologie médicale expérimentale, M., 1958 ; F l όρη n s k i y A. V. Nouvelles méthodes techniques de recherche en laboratoire, M., 1954 ; Méthodes d'identification pour la microbiologie, éd. par W. M. Gibbs a. F. A. Skinner, c. 1 - 2, L.-N.Y., 1966-1968.

Laboratoires sanitaires et bactériologiques et leurs équipements

Les laboratoires sanitaires et bactériologiques font partie du SES en tant qu'unités structurelles indépendantes. De plus, en règle générale, des laboratoires sanitaires et microbiologiques pour la recherche sur l'eau sont organisés, situés à proximité des grands réservoirs et des stations d'épuration.

Les sujets de recherche dans les laboratoires sanitaires et bactériologiques sont :

• eau - eau potable, réservoirs ouverts, eaux usées ;
• air - salles d'opération, maternités, crèches, services hospitaliers, pharmacies, ainsi que jardins d'enfants, écoles, cinémas et autres locaux similaires ;
• médicaments injectables, collyres, eau distillée en pharmacie ;
• sol lors de la construction d'institutions pour enfants, d'équipements communaux, de certains autres objets et pour des indications épidémiologiques ;
• matériel chirurgical pour la stérilité;
• produits alimentaires contre les intoxications alimentaires;
• les articles ménagers, les stocks, les équipements des établissements publics de restauration, les établissements commerciaux et les mains du personnel des entreprises cotées.

Le laboratoire sanitaire-bactériologique se compose de plusieurs salles : une salle de recherche bactériologique ; milieux pour la préparation et la mise en bouteille de milieux nutritifs; autoclave, dans lequel sont effectuées la stérilisation des milieux de culture et la désinfection de la verrerie et des déchets (les autoclaves doivent être séparés et étiquetés) ; une buanderie spécialement équipée pour le lavage de la verrerie de laboratoire ; local matériel pour stocker les ustensiles, les milieux nutritifs secs, etc. ; vivarium pour garder les animaux de laboratoire (construit séparément du laboratoire ou placé au sous-sol) ; bureau d'accueil pour passer les examens, bureau du directeur.

Conseils juridiques gratuits :

Les salles de laboratoire pour mener des études bactériologiques doivent être spacieuses - chaque lieu de travail doit avoir 7,5 m2. Le local est doté d'un espace pour un ou deux caissons de plafond vitré avec zones de pré-caisson, dans lequel sont effectués les travaux nécessitant des conditions aseptiques. Des lampes germicides doivent être installées dans les caissons. L'orientation des fenêtres du laboratoire est de préférence au nord, ce qui assure un éclairage uniforme tout au long de la journée de travail. Les murs sont peints avec de la peinture à l'huile de couleur claire ou carrelés sur une hauteur de 1,5 à 1,7 m. Le sol est recouvert de linoléum. Les tables des bactériologistes sont recouvertes de plastique ou peintes d'un léger chanfrein d'émail pour pouvoir être traitées avec des désinfectants. Le lieu de travail de chaque employé doit disposer de tout le nécessaire au travail quotidien : une anse bactérienne, un portoir pour tubes à essai, des verres à lames et à lamelles, un ensemble de peintures, une installation pour les préparations de teinture et de lavage, de l'huile à immersion, des morceaux de papier filtre découpés de 2x3 mm, des pots avec solution désinfectante, des pipettes Pasteur et graduées (1, 2, 5 et 10 ml), des spatules, des pinces, des ciseaux, scalpel, tubes à essai stériles, verre à crayon, brûleur à gaz ou à alcool, microscope avec lentille à immersion.

Règles et mode de fonctionnement. Dans les laboratoires sanitaires et bactériologiques, le même régime opératoire est observé que dans les autres laboratoires microbiologiques où l'on travaille avec du matériel infectieux. Il convient également de rappeler qu'il n'y a pas de frontière nette entre le pouvoir pathogène et le caractère non pathogène des micro-organismes. Un exemple en est le rôle croissant des micro-organismes opportunistes dans la pathologie humaine, notamment dans l’étiologie des infections nosocomiales. Il s’ensuit que toutes les bactéries doivent être traitées comme une source potentielle de danger pour la santé humaine. Par conséquent, tous les employés doivent suivre des règles qui garantissent la stérilité de leur travail, en éliminant la possibilité d'infection intra-laboratoire, le développement d'allergies parmi le personnel et la propagation de bactéries pathogènes à l'extérieur du laboratoire.

1. Le travail s'effectue avec des vêtements spéciaux (robe, casquette ou foulard). Il est conseillé de porter des sous-vêtements spéciaux et une robe au laboratoire et de ne pas porter ces vêtements en dehors du laboratoire.

2. Il est interdit d'entrer dans le laboratoire sans blouse, de sortir du laboratoire avec celle-ci et d'enfiler des vêtements extérieurs par-dessus la blouse.

3. Les portes du laboratoire doivent être fermées.

Conseils juridiques gratuits :

4. Il est interdit de stocker des objets étrangers, de manger de la nourriture ou de fumer dans les locaux du laboratoire.

5. Toutes les manipulations (ensemencement, ouverture des ampoules, traitement des matériaux, filtration, centrifugation, etc.) doivent être effectuées avec soin, en évitant la formation d'aérosols.

6. Il est interdit d'aspirer des solutions avec une pipette dans la bouche ; il est nécessaire d'utiliser des dispositifs spéciaux : une poire sphérique, des pompes à piston ou d'autres dispositifs empêchant les germes de pénétrer dans la bouche.

7. Une fois les travaux terminés, les employés nettoient leur lieu de travail et désinfectent la surface de la table. Le matériel infectieux inutile et les ustensiles contaminés sont stérilisés. Les pipettes et les déchets de verre sont placés dans des bocaux contenant une solution désinfectante. Les tubes à essai et les coupelles nouvellement inoculés sont placés dans un thermostat et scellés. Les réfrigérateurs dans lesquels sont stockés des micro-organismes pathogènes sont également scellés. A la fin du travail, les mains sont désinfectées et lavées au savon.

8. Dans des journaux de forme approuvée, pré-lacés, avec des pages numérotées, les matériaux sont enregistrés, des enregistrements de cultures microbiennes isolées et d'animaux infectés sont conservés. Liste des journaux de travail : a) journal d'enregistrement des matériaux reçus pour la recherche ; b) un journal des cultures sélectionnées et de leur destruction ; c) un journal des mouvements des cultures et des animaux infectés ; d) livre d'inventaire des cultures muséales ; e) journal d'autoclavage du matériel infectieux.

Conseils juridiques gratuits :

9. En cas d'accident dans le laboratoire (déversement d'un liquide contenant du matériel infectieux ou bris d'un récipient), une désinfection est effectuée. Les restes du récipient sont saisis avec une pince à épiler et plongés dans un pot contenant une solution désinfectante, la surface de la robe et des mains contaminées est traitée avec de l'alcool éthylique ou de la chloramine.

Le laboratoire est nettoyé quotidiennement à l'eau à l'aide de solutions désinfectantes (solution de phénol à 1-5 % ou solution de chloramine à 1-5 %).

Les travaux dans les laboratoires sanitaires et bactériologiques sont effectués avec du matériel d'essai potentiellement infectieux (eaux usées, sols, produits alimentaires pour intoxications alimentaires, etc.) et avec des cultures pathogènes isolées. Selon la législation soviétique, tous les micro-organismes pathogènes pour l'homme sont divisés en 5 groupes en fonction du degré de danger pour l'homme, en tenant compte des données scientifiques modernes sur l'étiologie, le tableau clinique, la prévention et le traitement des maladies infectieuses.

Groupe I. Agent de la peste

Groupe II. L'agent causal du choléra, du charbon, de la tularémie, de la brucellose, de la leptospirose, de la morve, de la mélioïdose ; agents pathogènes des maladies fongiques - histoplasmose; poisons biologiques - toxines botuliques de types A, B, E, P.

Conseils juridiques gratuits :

Groupe III. Agents responsables des infections intestinales - fièvre typhoïde, dysenterie ; agents pathogènes de la tuberculose, de la diphtérie; agents pathogènes de maladies fongiques - actinomycose, blastomycose, dermatomycose; souches atténuées de bactéries des groupes I-III.

Groupe IV. Agents responsables d'infections toxiques et d'intoxications bactériennes aiguës (salmonelles, staphylocoques, vibrions, clostridies, etc.), entérites - Escherichia, etc.

Groupe V. Microflore des muqueuses et de la peau d'une personne saine, micro-organismes indicateurs sanitaires (Escherichia, entérocoques, etc.).

Lors de l'examen sanitaire et bactériologique des objets environnementaux, les bactéries du groupe III sont plus souvent déterminées.

Conseils juridiques gratuits :

Laboratoire de bactériologie, sa structure et sa finalité - Microbiologie avec techniques de recherche microbiologique

Pour réaliser des études microbiologiques, il existe des laboratoires bactériologiques dans les hôpitaux et cliniques ou indépendamment d'eux. Ils reçoivent pour la recherche divers matériels obtenus auprès de personnes malades (expectorations, urines, pus, selles, sang, liquide céphalo-rachidien, etc.). Il existe également des laboratoires sanitaires et bactériologiques dans lesquels l'eau, l'air et les produits alimentaires sont soumis à un contrôle bactériologique.

Le rôle des laboratoires de bactériologie est également important dans la prévention des maladies infectieuses. Certaines personnes, après avoir souffert d'une maladie infectieuse (fièvre typhoïde, dysenterie, diphtérie, etc.), continuent de libérer des microbes pathogènes dans l'environnement. Ce sont ce qu’on appelle les porteurs de bactéries. Les porteurs de bactéries se retrouvent également chez les personnes en bonne santé. En identifiant ces porteurs de bactéries, les laboratoires de bactériologie aident les autorités sanitaires à mettre en œuvre un certain nombre de mesures préventives.

L'eau et les produits alimentaires contaminés par des micro-organismes pathogènes peuvent provoquer des épidémies (maladies de masse) de fièvre typhoïde, de choléra, etc., c'est pourquoi le contrôle sanitaire et bactériologique quotidien de la qualité de l'eau potable, du lait et d'autres produits est si important.

Un laboratoire de bactériologie doit disposer d'au moins trois locaux : 1) un petit local - une salle d'enregistrement pour la réception et la délivrance des tests ; 2) cuisson et lavage moyens - pour préparer les milieux nutritifs et laver la vaisselle ; 3) un laboratoire de recherches bactériologiques. Il est conseillé de disposer d'un local pour garder les animaux d'expérimentation (vivarium). Chaque pièce doit disposer d'un mobilier approprié (tables de cuisine et de laboratoire, armoires diverses, tabourets, etc.).

Voici une liste des éléments les plus importants nécessaires au travail quotidien en laboratoire. Le but de leur utilisation, la méthode de manipulation, ainsi que le principe de leur conception sont décrits dans les sections concernées du cours.

Appareils optiques. Microscope biologique avec système d'immersion, loupes, agglutinoscope.

Conseils juridiques gratuits :

Appareils de stérilisation et de chauffage. Autoclave, appareil à vapeur fluide, armoire de séchage, filtres Seitz, thermostats, stérilisateurs pour instruments.

Équipement pour supports de cuisson. Un entonnoir pour filtrer à chaud, un entonnoir pour verser les médias, un bain-marie, des casseroles de différentes tailles, une balance tarée avec des poids, un hachoir à viande, des supports en métal et en bois pour filtrer.

Outils. Scalpels de formes et de types variés : ciseaux, droits, courbes, à bouts arrondis, ciseaux intestinaux, pinces anatomiques et chirurgicales, seringues.

Objets en verre. Verres à lames, lames à puits, lamelles, tubes bactériologiques, tubes courts pour réactions sérologiques (agglutination), centrifugeuses, boîtes Heidepreich*, tubes et bâtonnets en verre, pipettes graduées de 1, 2, 5, 10 ml, pipettes Pasteur, verre flacons de peinture avec pipettes, béchers et flacons en verre de différentes tailles, cylindres de différentes tailles, entonnoirs filtrants, etc.

*Jusqu'à présent, chez la plupart des microbiologistes et dans les manuels, les boîtes permettant d'obtenir des colonies isolées de microbes sont appelées boîtes de Pétri et non boîtes de Heidenreich, ce qui ne correspond pas à la réalité. Les coupes ont été introduites pour la première fois dans la pratique de laboratoire par le microbiologiste russe Heidenreich.

Conseils juridiques gratuits :

Divers articles. Anse bactérienne, fil de platine, tubes en caoutchouc, balances manuelles à cornet avec poids, supports (en bois, métal) pour tubes à essai, thermomètres, cages pour animaux, dispositifs de fixation des animaux, centrifugeuse.

Produits chimiques, peintures, matériaux pour supports, etc. Agar-agar, gélatine, blanc en feuilles, huile d'immersion, papier filtre, coton absorbant et ordinaire, gaze, alcool éthylique, colorants aniline (magenta, gentiane et cristal violet, vésuvine, méthylène bleu, neutre, safranine, etc.), peinture Giemsa, acides (nitrique, chlorhydrique, sulfurique, phénique, phosphorique, picrique, oxalique, etc.), alcalis (potassium caustique, soude caustique, ammoniaque, soude), sels (nitrate de potassium , permanganate de potassium, sulfure de sodium, chlorure de sodium, etc.).

Table de laboratoire

Pour effectuer des recherches microbiologiques, le laborantin doit disposer d'un poste de travail correctement équipé. La table de laboratoire doit avoir une certaine hauteur pour qu'il soit facile d'observer au microscope en étant assis dessus (Fig. 9). Si possible, la table doit être recouverte de linoléum et chaque lieu de travail doit être recouvert d'un plateau galvanisé ou d'un verre miroir. Le lieu de travail doit être équipé d'un microscope, de supports pour éprouvettes et peintures, d'une anse et d'une aiguille en platine pour l'inoculation, d'une coupelle avec pont pour les préparations, d'une rondelle, d'un sablier, de lames et de lamelles, de pipettes, d'un jeu de peintures, du papier filtre, un brûleur à alcool ou à gaz et un pot contenant une solution désinfectante (Lysol, acide carbolique, sublimé, chloramine ou lysoforme), dans lequel sont placées les lames et lamelles utilisées, les pipettes, les tiges de verre, etc. les microbes cultivés ne peuvent pas être désinfectés avec des produits chimiques. Les traces de désinfectants sur ces plats les rendent par la suite impropres à la croissance et à la reproduction de micro-organismes. Après utilisation, les plats sont placés dans des cuves ou des seaux métalliques munis d'un couvercle, scellés et stérilisés en autoclave. Après utilisation, les petits instruments (pinces, scalpels, ciseaux) sont placés dans un stérilisateur et bouillis pendant 30 à 60 minutes ou immergés dans une solution de 3 à 5 % de savon et de chloramine carbolique pendant 30 à 60 minutes.

Riz. 9. Technique de microscopie d'objets bactériologiques.

Le lieu de travail doit être absolument propre. Il est inacceptable que la table soit contaminée par le matériel infectieux examiné (urine, selles, pus, etc.). Dans ce dernier cas, le matériel infectieux de la table peut se propager à d'autres objets environnants, ce qui rend possible une infection intra-laboratoire. Une fois le travail terminé, le laborantin doit ranger le lieu de travail dont il est responsable et, à des fins de prévention, essuyer le verre du lieu de travail avec un morceau de coton imbibé d'une solution à 5 % d'acide phénique ou de chloramine.

Conseils juridiques gratuits :

Lorsqu'ils travaillent avec du matériel infectieux, les travailleurs de laboratoire doivent se rappeler de la possibilité d'être eux-mêmes infectés et de transmettre la maladie infectieuse à leur famille, leur appartement, etc. Par conséquent, ils doivent être attentifs, prudents, soignés et pédants dans leur travail.

Lorsque vous travaillez en laboratoire, les règles suivantes doivent être respectées :

1. Il est obligatoire d'être dans le laboratoire, et a fortiori d'y travailler, en robe et foulard ou casquette.
2. Ne vous déplacez pas inutilement d’une salle de laboratoire à une autre et utilisez uniquement le lieu de travail et l’équipement désignés.
3. Ne pas manger ni fumer dans le laboratoire.
4. Lorsque vous travaillez avec du matériel infectieux et des cultures vivantes, utiliser des outils appropriés : pinces, crochets, spatules et autres objets qui doivent être détruits ou rendus inoffensifs après utilisation (brûlure sur la flamme d'un brûleur, ébullition, etc.). Aspirez la matière infectieuse liquide dans des pipettes non pas avec la bouche, mais à l'aide de ballons, d'ampoules, versez le liquide contenant la matière infectieuse d'un récipient à l'autre uniquement sur un récipient (plateau, bassin) dans lequel un liquide désinfectant (solution d'acide phénique, Lysol ) est versé. Le semis et le réensemencement s'effectuent en brûlant des éprouvettes, des spatules, des anses en platine, des pipettes, etc. sur la flamme d'un brûleur.
5. Si la vaisselle se brise ou si du liquide contenant des matières infectieuses ou des cultures vivantes se déverse, désinfectez immédiatement soigneusement la zone de travail, les vêtements et les mains contaminés. Tout cela doit être fait en présence ou sous la surveillance du responsable du laboratoire, qui doit être immédiatement informé de l'accident.
6. Si possible, détruisez tous les objets et matériels utilisés et inutiles (il est préférable de les brûler ou de les neutraliser soigneusement dans des machines de stérilisation ou des liquides désinfectants).

Tous les éléments à désinfecter doivent être collectés à l'intérieur du laboratoire dans des récipients spéciaux, des réservoirs, des seaux avec couvercles, etc., et transférés fermés dans un autoclave, où ils seront désinfectés le même jour. La livraison du matériel infectieux à l'autoclave et sa stérilisation doivent être supervisées par des travailleurs de laboratoire responsables spécialement désignés.

1. Maintenir une propreté et une propreté strictes. Désinfectez et lavez-vous les mains aussi souvent que possible pendant la journée de travail et après avoir terminé le travail.
2. Les travailleurs des laboratoires sont soumis à une vaccination obligatoire contre les principales maladies infectieuses (principalement contre les maladies intestinales).
3. Il est obligatoire d'effectuer quotidiennement des enregistrements quantitatifs de toutes les cultures vivantes et des animaux infectés avec des inscriptions dans des journaux et livres comptables spéciaux.
4. Après le travail, laissez tout le matériel et les cultures nécessaires à la poursuite des travaux dans un réfrigérateur ou un coffre-fort verrouillé et mettez le lieu de travail en ordre complet.
5. Un nettoyage quotidien approfondi des locaux du laboratoire doit être effectué par voie humide à l'aide d'un liquide désinfectant.

Laboratoire bactériologique de la station sanitaire et épidémiologique n°1 de Moscou Moscou

Nom de l'organisation Laboratoire bactériologique de la station sanitaire et épidémiologique n°1 de Moscou Moscou - adresses téléphoniques et site officiel de l'entreprise

Conseils juridiques gratuits :

Site officiel de l'organisation Laboratoire bactériologique de la Station sanitaire et épidémiologique n°1 de Moscou - http://sanapedemstation.rf Afficher le site

Laboratoire bactériologique de la station sanitaire et épidémiologique n°1 de l'adresse de Moscou- Moscou, Yaroslavskoe Shosse, 9, Moscou, Russie Afficher l'adresse Toutes les adresses de l'organisation

Mode de fonctionnement- horaire de travail quotidien, 24 heures sur 24 Afficher les heures d'ouverture

Laboratoire bactériologique de la station sanitaire et épidémiologique n°1 de Moscou Téléphone de Moscou- numéro de téléphone, Afficher le téléphone

Conseils juridiques gratuits :

(Entrez le nom de votre organisation avant la mise à jour)

Laboratoire bactériologique

informations générales

Les laboratoires de bactériologie en tant qu'unités structurelles indépendantes sont organisés dans les stations sanitaires et épidémiologiques (SES), dans les hôpitaux de maladies infectieuses, les hôpitaux généraux, certains hôpitaux spécialisés (par exemple, en tuberculose, rhumatologie, maladies cutanées et vénériennes) et dans les cliniques.

Les laboratoires de bactériologie du SES examinent les objets environnementaux pour détecter une contamination bactérienne générale, ainsi que la contamination d'objets environnementaux par une microflore conditionnellement pathogène et pathogène : air, eau, sol, aliments ; effectuer des examens de groupes organisés et d'individus pour le portage de bactéries pathogènes du groupe intestinal, corynebactéries diphtérie, coqueluche, parapertussis, méningocoque. Le travail du laboratoire de microbiologie en collaboration avec d'autres départements du SES a une tâche spécifique : améliorer l'environnement et réduire l'incidence de la population.

Conseils juridiques gratuits :

Les laboratoires de bactériologie des établissements médicaux effectuent les tests nécessaires pour établir et clarifier le diagnostic d'une maladie infectieuse, facilitant ainsi le choix correct d'un traitement spécifique et déterminant le moment de la sortie du patient d'un hôpital spécialisé dans les maladies infectieuses. Les sujets de recherche dans les laboratoires de bactériologie sont :

• écoulement du corps humain : urine, selles, crachats, pus, ainsi que sang, liquide céphalo-rachidien et matériel cadavérique ;
• objets environnementaux : eau, air, sol, nourriture, lessivages des équipements, mains, etc.

Locaux de laboratoire de bactériologie et équipements de travail

Les spécificités du travail microbiologique nécessitent que la pièce réservée au laboratoire soit isolée des services hospitaliers, des pièces à vivre et des unités de restauration. Le laboratoire bactériologique comprend : des salles de laboratoire pour la recherche bactériologique et des locaux techniques ; autoclave ou stérilisation pour la désinfection des déchets et des ustensiles contaminés ; buanderie équipée pour faire la vaisselle ; cuiseur de milieux pour la préparation, le remplissage, la stérilisation et le stockage de milieux nutritifs; vivarium pour garder des animaux d'expérimentation; matériel pour stocker les réactifs de rechange, la vaisselle, le matériel et l'équipement ménager.

Les locaux techniques classés, en tant qu'unités structurelles indépendantes, font partie de grands laboratoires bactériologiques. Dans les petits laboratoires, les salles de préparation et de stérilisation sont regroupées en une seule pièce ; Il n'y a pas de local spécial pour garder les animaux de laboratoire.

Les locaux les plus lumineux et les plus spacieux sont réservés aux salles de laboratoire dans lesquelles sont réalisées toutes les études bactériologiques. Les murs de ces pièces, à une hauteur de 170 cm du sol, sont peints de couleurs claires avec de la peinture à l'huile. Le sol est recouvert de relin ou de linoléum. Ce type de finition permet d'utiliser des solutions désinfectantes lors du nettoyage de la pièce.

Chaque pièce doit disposer d'un évier avec de l'eau courante et d'une étagère pour une bouteille de solution désinfectante.

Conseils juridiques gratuits :

L'une des salles est équipée d'une caisse vitrée avec pré-caisse permettant d'effectuer des travaux en conditions aseptiques. Une table pour semer et un tabouret sont placés dans la boîte et des lampes bactéricides sont montées au-dessus du lieu de travail. Une armoire pour stocker le matériel stérile est placée dans l'antichambre. La salle de laboratoire est équipée de tables, d'armoires et d'étagères de type laboratoire pour ranger le matériel, les ustensiles, les peintures et les réactifs nécessaires au travail.

L'organisation correcte du lieu de travail d'un médecin - bactériologiste et assistant de laboratoire est très importante pour le travail. Des tables de laboratoire sont installées près des fenêtres. Lors de leur placement, veillez à ce que la lumière tombe devant ou du côté de la personne qui travaille, de préférence du côté gauche, mais en aucun cas derrière. Il est conseillé que les salles d'analyse, notamment pour la microscopie, aient des fenêtres orientées au nord ou au nord-ouest, car une lumière diffuse égale est nécessaire pour le travail. L'éclairage de la surface des tables de travail doit être de 500 lux. Pour faciliter la désinfection, la surface des tables de laboratoire est recouverte de plastique et chaque lieu de travail est recouvert de verre miroir.

Chaque employé du laboratoire se voit attribuer un poste de travail séparé d'une superficie de 150 x 60 cm. Tous les postes de travail sont équipés des éléments nécessaires au travail quotidien.

Règles de travail et de comportement en laboratoire

Une caractéristique du travail bactériologique est le contact constant du personnel de laboratoire avec du matériel infectieux, des cultures de microbes pathogènes, des animaux infectés, du sang et des sécrétions du patient. Par conséquent, tous les employés d'un laboratoire de bactériologie sont tenus de respecter les règles de travail suivantes, qui garantissent la stérilité du travail et préviennent la possibilité d'infections intra-laboratoires :

1. Vous ne pouvez pas entrer dans les locaux du laboratoire de bactériologie sans vêtements spéciaux - une robe et une casquette ou un foulard blanc.
2. Vous ne devez pas introduire d'objets étrangers dans le laboratoire.
3. Il est interdit de quitter le laboratoire en blouse ou de mettre une blouse extérieure par-dessus une blouse.
4. Il est strictement interdit de fumer, manger et conserver des produits alimentaires dans les locaux du laboratoire de bactériologie.
5. Tout matériel entrant dans le laboratoire doit être considéré comme contaminé.
6. Lors du déballage du matériel infectieux envoyé, des précautions doivent être prises : dès réception, les pots contenant du matériel de recherche sont essuyés à l'extérieur avec une solution désinfectante et posés non pas directement sur la table, mais sur des plateaux ou dans des cuvettes.
7. La transfusion de liquides contenant des microbes pathogènes est effectuée dans un récipient rempli d'une solution désinfectante.
8. Tout accident impliquant de la verrerie contenant du matériel infectieux ou un déversement de matériel infectieux liquide doit être signalé immédiatement au chef du laboratoire ou à son adjoint. Des mesures de désinfection des parties du corps, des objets du lieu de travail et des surfaces contaminées par des vêtements pathogènes sont prises immédiatement.
9. Lors de l'étude de matériel infectieux et du travail avec des cultures microbiennes pathogènes, il est nécessaire de respecter strictement les techniques techniques généralement acceptées en pratique bactériologique, qui excluent la possibilité de contact des mains avec du matériel infectieux.
10. Le matériel infecté et les cultures inutiles doivent être détruits, si possible le jour même. Les outils utilisés pour travailler avec des matières infectieuses sont immédiatement désinfectés après utilisation, tout comme la surface du lieu de travail.
11. Lors de travaux bactériologiques, vous devez surveiller strictement la propreté de vos mains : après avoir terminé les travaux avec des matières infectieuses, elles sont désinfectées. En fin de journée, le lieu de travail est rangé et soigneusement désinfecté, et le matériel infectieux et les cultures microbiennes nécessaires à la poursuite des travaux sont conservés dans un réfrigérateur ou un coffre-fort verrouillé.
12. Les travailleurs des laboratoires de bactériologie sont soumis à la vaccination obligatoire contre les maladies infectieuses dont les agents pathogènes peuvent être trouvés dans les objets étudiés.

Nettoyage des salles de laboratoire

Le laboratoire de microbiologie doit être maintenu propre. Un nettoyage hygiénique des locaux du laboratoire doit être effectué régulièrement. Il est très difficile et pas toujours nécessaire d'assurer la stérilité complète du laboratoire, mais il est possible de réduire considérablement le nombre de micro-organismes dans l'air et sur diverses surfaces des locaux du laboratoire. Ceci est réalisé grâce à l'application pratique de méthodes de désinfection, c'est-à-dire la destruction des agents pathogènes des maladies infectieuses dans les objets environnementaux.

Conseils juridiques gratuits :

Le sol, les murs et les meubles du laboratoire microbiologique sont aspirés et essuyés avec diverses solutions désinfectantes. L'aspiration garantit que les objets sont débarrassés de la poussière et qu'un nombre important de micro-organismes en sont éliminés. Il a été établi que lorsqu'on passe 4 fois la brosse d'un aspirateur sur la surface d'un objet, environ 47 % des micro-organismes en sont éliminés, et lorsqu'on la passe 12 fois, jusqu'à 97 %. Les solutions désinfectantes les plus couramment utilisées sont une solution à 2 à 3 % de soude (bicarbonate de sodium) ou de Lysol (une préparation phénolique additionnée de savon vert), une solution aqueuse à 0,5 à 3 % de chloramine et quelques autres désinfectants.

L'air du laboratoire est plus facilement désinfecté par la ventilation. Une ventilation prolongée de la pièce par une fenêtre (au moins quelques minutes) entraîne une forte diminution du nombre de micro-organismes dans l'air, notamment lorsqu'il existe une différence de température significative entre l'air extérieur et l'air ambiant. Une méthode de désinfection de l'air plus efficace et la plus couramment utilisée est l'irradiation avec des rayons UV d'une longueur d'onde de 200 à 400 nm. Ces rayons ont une activité antimicrobienne élevée et peuvent provoquer la mort non seulement des cellules végétatives, mais également des spores microbiennes.

Littérature

• "Microbiologie avec techniques de recherche microbiologique" Labinskaïa.

• Wikiifier l'article.
• Corrigez l'article selon les règles stylistiques de Wikipédia.
• Recherchez et organisez sous forme de notes de bas de page des liens vers des sources faisant autorité qui confirment ce qui est écrit.
• Ajoutez des illustrations.
• Créer des interwikis dans le cadre du projet Interwiki.

Fondation Wikimédia. 2010.

Voyez ce qu'est « Laboratoire bactériologique » dans d'autres dictionnaires :

Laboratoire - 1) un établissement d'enseignement, scientifique, pratique, de production ou une division d'une telle institution, entreprise, effectuant des recherches expérimentales, de contrôle ou analytiques ; 2) la salle dans laquelle sont réalisées ces études. Dans... ... Dictionnaire de microbiologie

laboratoire bactériologique - laboratoire faisant partie d'une station d'épidémiologie sanitaire ou d'un laboratoire de diagnostic clinique, destiné à réaliser des études microbiologiques (bactériologiques, immunologiques, etc.) afin d'identifier les agents pathogènes, de clarifier le diagnostic et... Grand Dictionnaire Médical

Laboratoire de recherche – Cet article ou cette section doit être révisé. Veuillez améliorer l'article conformément aux règles de rédaction des articles. Laboratoire de recherche scientifique laboratoire pour mener des expériences et des recherches scientifiques par des scientifiques et... ... Wikipédia

Conseils juridiques gratuits :

baklab - laboratoire bactériologique ... Dictionnaire des abréviations de la langue russe

laboratoire bactériologique ... Dictionnaire des abréviations de la langue russe

baklabor - laboratoire bactériologique ... Dictionnaire des abréviations russes

INSTITUTIONS - institutions de recherche scientifique engagées dans le développement particulier de problèmes scientifiques et menant des recherches scientifiques et des recherches dans des domaines pertinents. La tâche fait l’objet de recherches scientifiques. I. est une association de scientifiques. forces autour de certains problèmes... Grande Encyclopédie Médicale

Les véhicules mobiles et les complexes à usage médical sont des types de transport ambulanciers spécialement conçus ou des véhicules adaptés pour fournir des soins médicaux et sanitaires, transporter des malades, des blessés, du personnel médical et du matériel médical. Aux principaux types... ... Encyclopédie médicale

Conseils juridiques gratuits :

Typhus murin - Pr. Loeffler décrit en 1892 une épizootie qu'il observe à Greifswald chez des souris blanches destinées à diverses expériences. L'agent causal de cette épizootie au cours de l'étude s'est avéré être un micro-organisme spécifique, que Leffler et... ... Dictionnaire encyclopédique F.A. Brockhaus et I.A. Éphron

Les laboratoires médicaux sont des institutions du système de santé ou des unités structurelles d'institutions médicales et préventives ou sanitaires destinées à mener diverses recherches médicales. Ce groupe n'inclut pas les scientifiques... ... Encyclopédie médicale

Livres

• Laboratoire de bactériologie, Jesse Russell. Ce livre sera produit conformément à votre commande en utilisant la technologie Print-on-Demand. Contenu de haute qualité par les articles WIKIPEDIA ! Laboratoires de bactériologie en tant qu'indépendants… Lire la suiteAcheter pour 743 RUR

Nous utilisons des cookies pour vous offrir la meilleure expérience sur notre site Web. En continuant à utiliser ce site, vous acceptez cela. Bien