Le test de Coombs est positif pour quelle anémie. Test de Coombs indirect (test à l'antiglobuline, détection d'anticorps anti-érythrocytaires incomplets), sang. Test de Coombs : recherche d'anticorps iso-immuns anti-érythrocytaires

Test de Coombs direct. Ce test permet de prouver la présence d’anticorps bloquants fixés dans les globules rouges de l’enfant. Un test direct positif indique une sensibilisation et constitue un signe convaincant de maladie hémolytique du nouveau-né avant même l'apparition d'autres signes cliniques. À titre exceptionnel et seulement dans des cas très graves, un test de Coombs direct peut être négatif en raison de l'hémolyse déjà présente et presque complète des globules rouges sensibilisés.

Un test de Coombs direct est réalisé de la manière suivante : 5 gouttes de sang prélevées au talon de l’enfant sont placées dans un tube à essai et 5 ml de solution saline sont ajoutés. Bien mélanger et centrifuger pendant 10 minutes. Le liquide clair au-dessus du sédiment de globules rouges est séparé. Ajoutez ensuite à nouveau 5 ml de solution saline, mélangez et centrifugez. Après avoir mélangé trois fois avec une solution saline, les globules rouges sont bien lavés. Après la dernière séparation du surnageant, le sédiment érythrocytaire à raison de 0,1 ml est mélangé à 0,9 ml de solution physiologique. Appliquez 2-3 gouttes de ce mélange sur une lame de verre et ajoutez une goutte de sérum Coombs. La présence d'agglutination indique que la réaction est positive (test de Coombs direct positif). L'étude doit être réalisée à température ambiante supérieure à 16° pour éviter l'effet des agglutinines froides.

Test de Coombs indirect sert de preuve de la présence d'anticorps libres dans le sérum maternel et est réalisé avec du sérum maternel.

La maladie hémolytique chez un nouveau-né présentant une incompatibilité Rh se manifeste généralement après la deuxième grossesse. Le premier enfant naît en bonne santé, le second présente des signes d'anémie légère et ce n'est qu'après la troisième grossesse que naissent des enfants présentant des signes évidents de maladie hémolytique. Seules les femmes présensibilisées peuvent donner naissance à un enfant présentant des symptômes de maladie hémolytique lors de leur première grossesse. Dans certains cas, la vaccination provoque des avortements et des mortinaissances. Pour l'apparition et la gravité de la maladie, l'état du placenta et la durée d'exposition des agglutinines maternelles au fœtus sont importants. Lorsque les agglutinines apparaissent 10 à 14 semaines avant la naissance, l'enfant présente généralement des formes subcliniques. L'apparition précoce des agglutinines, 15 à 26 semaines avant la naissance, provoque des formes sévères de la maladie. Dans toutes les formes de la maladie, le processus principal est l'hémolyse. La conséquence de la réaction antigène-anticorps est une hémolyse, des lésions des capillaires hépatiques et cérébraux. Selon la lésion prédominante, diverses formes de la maladie sont observées. Certains phénomènes anaphylactiques sont également dangereux. Ils conduisent à la formation de substances de type histamine, provoquant de graves dommages aux cellules hépatiques et notamment aux cellules ganglionnaires des noyaux gris centraux, de la corne d'ammon, de la moelle allongée et même du cortex cérébral. Lorsque les cellules hépatiques sont endommagées, l’ictère hépatique s’ajoute à l’ictère extrahépatique. Les enfants meurent à cause des symptômes graves de l'ictère nucléaire. S'ils survivent, des symptômes d'atteinte du système nerveux subsistent (troubles du système extrapyramidal avec mouvements choréoathétiques, démarche dansante particulière, mouvements forcés de la tête, parfois trouble de la coordination des mouvements volontaires avec chutes fréquentes, augmentation du tonus musculaire, mental retard, c'est-à-dire avec des signes d'encéphalopathie posticteria infantum).

Test de Coombs

Le test de Coombs direct est un test à l'antiglobuline (agglutination dans un gel permettant la détection d'anticorps divalents complets), qui détecte les anticorps de classe IgG et le composant C3 du complément à la surface des globules rouges. En règle générale, les anticorps détectés par le test direct de Coombs ont une large spécificité qui n'est pas associée à un antigène bien établi. Un test de Coombs direct positif indique clairement que le patient souffre d'anémie hémolytique, bien que tous les patients avec un test direct à l'antiglobuline positif ne souffrent pas de cette maladie. Chez environ 10 % des patients, les anticorps ou les composants du complément présents sur la membrane des globules rouges ne peuvent pas être déterminés par un test de Coombs direct (le test est négatif), mais ils souffrent néanmoins d'anémie hémolytique auto-immune. Pour clarifier la spécificité des anticorps dans de tels cas, des tests avec leur élution sont utilisés. Un test de Coombs direct, positif uniquement au complément, fait généralement référence à des anticorps froids de type IgM. Dans ce cas, les anticorps IgM ne sont pas présents sur les globules rouges à la température basale du corps. Cependant, étant donné que les anticorps IgM fixent activement le complément et que le complément reste sur les globules rouges, dans cette forme d'anémie hémolytique auto-immune (maladie des aggutinines froides), le test de Coombs ne sera positif que pour le complément.

Le test direct de Coombs est positif pour l'anémie hémolytique auto-immune causée par des anticorps chauds, l'anémie auto-immune induite par un médicament (lors de la prise de méthyldopa, jusqu'à 20 % des patients ont une réaction positive), l'anémie hémolytique de type adsorption médicamenteuse, le type d'anémie hémolytique à complexe immun. anémie (le test est positif uniquement pour C3), avec anémie hémolytique auto-immune causée par les anticorps du froid - maladie des agglutinines froides (le test est positif uniquement pour C3). Dans l’hémoglobinurie paroxystique froide, le test direct de Coombs est négatif.
Dans la période aiguë de la maladie, en raison de la destruction des globules rouges sur lesquels un grand nombre d'anticorps ont été enregistrés, lors d'une crise hémolytique, ainsi qu'avec un nombre insuffisant d'anticorps au cours de l'évolution chronique de la maladie, un résultat négatif Un test de Coombs direct peut être observé.

• Une condition importante pour garantir la qualité des analyses de sang en laboratoire est de prélever le matériel à jeun, le matin (avant 12h00).
• 12 heures avant le test, vous devez éviter de boire de l'alcool, de fumer, de manger et de limiter votre activité physique.
• Le matin de la prise de sang, vous pouvez boire de l'eau.
• Évitez de prendre des médicaments; S'il n'est pas possible d'arrêter de prendre le médicament, vous devez en informer le laboratoire.
• Il est conseillé de prélever le matériel avant d'effectuer toute procédure de diagnostic médical.
• Lors de l’évaluation des niveaux d’hormones chez les femmes, il est important de prendre en compte le jour du cycle menstruel où il est le plus optimal de mesurer certaines hormones. Vous pouvez obtenir ces informations auprès de votre médecin.

Le test de Coombs est un test sanguin effectué pour détecter si le sang contient certains anticorps qui peuvent être dangereux. Ces anticorps adhèrent aux globules rouges et peuvent envahir le système immunitaire et causer des dommages par d’autres moyens. Dans la terminologie médicale, cette étude est également appelée test à l'antiglobuline (AGT).

Types d’échantillons Coombs

Il existe deux types de tests de Coombs : directs et indirects.

Test de Coombs direct, également connu sous le nom de direct (DAT), détecte les auto-anticorps qui se fixent à la surface des globules rouges. Ces anticorps sont parfois produits dans l’organisme en raison de certaines maladies ou lors de la prise de certains médicaments, comme le procaïnamide, la méthyldopa ou la quinidine.

Ces anticorps sont dangereux car ils provoquent parfois une anémie en détruisant les globules rouges.

Ce test est parfois demandé pour diagnostiquer la cause de la jaunisse ou de l'anémie.

Normalement, la réaction de Coombs est négative.

Positif pour :

• maladie hémolytique des nouveau-nés;
• hémolyse auto-immune;
• réactions transfusionnelles hémolytiques;
• anémie hémolytique immunitaire d’origine médicamenteuse.

Test de Coombs indirect, également connu sous le nom de , est utilisé pour détecter les anticorps dirigés contre les globules rouges présents dans le sérum sanguin (le sérum est le liquide sanguin jaune clair qui reste après l'élimination des globules rouges et du coagulant).

Le test indirect de Coombs est utilisé lors d'une transfusion sanguine pour déterminer si le sang du donneur correspond à celui du receveur. C'est ce qu'on appelle un test de compatibilité et permet de prévenir toute réaction indésirable au sang du donneur. Ce test est également recommandé aux femmes enceintes. Certaines femmes ont des anticorps IgG, qui peuvent traverser le placenta et se retrouver dans le sang fœtal et nuire au nouveau-né, provoquant une maladie hémolytique connue sous le nom d'anémie hémolytique.

Procédure

Le sang est prélevé à l’aide d’une seringue dans une veine, généralement du dos de la main ou du creux du coude. Avant cela, le site de ponction est soigneusement désinfecté et après une prise de sang, une gaze propre ou un coton est appliqué.

Le sang obtenu est purifié en laboratoire et les globules rouges sont séparés. L'échantillon est ensuite testé séquentiellement à l'aide de divers sérums et réactifs de Coombs, qui sont contrastés. S’il n’y a pas d’agglutination (agglutination des globules rouges), cela signifie un résultat positif.

Cependant, si le test est négatif, cela signifie qu’il existe des anticorps dans le sang qui agissent contre les globules rouges. Cela peut indiquer diverses maladies, telles que l'anémie (naturelle ou causée par des médicaments), la syphilis ou une infection à mycoplasmes. Après avoir reçu les résultats, le médecin traitant vous prescrira un traitement approprié.

Vidéo

Anticorps, situé à la surface des érythrocytes, peut être soit à l'état statique, soit libre dans plasma sanguin. Selon l'état des anticorps, une réaction de Coombs directe ou indirecte est réalisée. S’il y a des raisons de croire que des anticorps sont fixés à la surface des globules rouges, un test de Coombs direct est réalisé. Dans ce cas, le test se déroule en une seule étape - en ajoutant sérum antiglobuline. Si des anticorps incomplets sont présents à la surface des globules rouges, agglutination des globules rouges

Réaction indirecte

La réaction indirecte de Coombs se déroule en 2 étapes. Vous devez d'abord implémenter artificiellement sensibilisation des globules rouges Pour ce faire, les globules rouges et le sérum sanguin testé sont incubés, ce qui provoque la fixation des anticorps à la surface des globules rouges. Après quoi la deuxième étape du test de Coombs est effectuée - l'ajout de sérum antiglobuline.

Réaction de précipitation - RP (du latin praecipilo précipiter) est la formation et la précipitation d'un complexe d'antigène moléculaire soluble avec des anticorps sous la forme d'un trouble appelé précipité. Il se forme en mélangeant des antigènes et des anticorps en quantités équivalentes ; un excès de l'un d'entre eux réduit le niveau de formation du complexe immun. La réaction de précipitation s'effectue en éprouvettes (réaction de précipitation en anneau), dans des gels, des milieux nutritifs, etc. Variétés de la réaction de précipitation en gel d'agar semi-liquide ou d'agarose, double immunodiffusion par Ouchterlony, immunodiffusion radiap, immunoepectrophorèse et etc.

Typage HLA- étude du complexe majeur d'histocompatibilité humain - complexe HLA. Cette formation comprend une région de gènes sur le chromosome 6 qui codent pour les antigènes HLA impliqués dans diverses réponses immunitaires.

Tâches pour Typage HLA peut être très différent - identification biologique (le type HLA est hérité avec les gènes parentaux), détermination de la prédisposition à diverses maladies, sélection des donneurs pour la transplantation d'organes - dans ce cas, les résultats du typage HLA des tissus du donneur et du receveur sont comparés. Grâce au typage HLA, on détermine à quel point les conjoints sont similaires ou différents en termes d'antigènes d'histocompatibilité afin de diagnostiquer les cas d'infertilité.

Le typage HLA suggère Analyse du polymorphisme HLA et est réalisée par deux méthodes - sérologique et génétique moléculaire. La méthode sérologique classique de typage HLA repose sur un test microlymphocytotoxique, et la méthode moléculaire utilise la PCR (réaction en chaîne par polymérase).

Sérologique Typage HLA réalisée sur des populations cellulaires isolées. Les antigènes du complexe majeur d’histocompatibilité sont principalement transportés par les lymphocytes. Par conséquent, une suspension de lymphocytes T est utilisée comme principaux porteurs d'antigènes de classe I, et une suspension de lymphocytes B pour déterminer les antigènes HLA de classe II. Pour isoler les populations cellulaires requises du sang total, on utilise soit la centrifugation, soit la séparation immunomagnétique. On pense que la première méthode peut conduire à des données faussement positives, car elle entraîne la mort de certaines cellules. La deuxième méthode est reconnue comme plus spécifique : plus de 95 % des cellules restent viables.

Mais la base pour réaliser un test lymphocytotoxique Typage HLA est un sérum spécifique contenant des anticorps dirigés contre diverses variantes alléliques des antigènes HLA de classe I et II. Un test sérologique peut déterminer le type HLA en examinant quels sérums réagissent avec les lymphocytes et lesquels ne le font pas.

Si une réaction se produit entre les cellules et le sérum, il en résulte la formation d’un complexe antigène-anticorps à la surface de la cellule. Après avoir ajouté une solution contenant du complément, la lyse cellulaire et la mort se produisent. Le test sérologique de typage HLA est évalué par microscopie à fluorescence pour évaluer les réactions positives (fluorescence rouge) et négatives (fluorescence verte), ou par microscopie à contraste de phase pour colorer les noyaux des cellules mortes. Le résultat du typage HLA est dérivé en tenant compte de la spécificité des sérums ayant réagi et des groupes d'antigènes à réaction croisée, ainsi que de l'intensité de la réaction cytotoxique.

Inconvénients de la sérologie Typage HLA sont la présence de réactions croisées, une faible affinité des anticorps ou une faible expression d'antigènes HLA, l'absence de produits protéiques dans un certain nombre de gènes HLA.

Des méthodes moléculaires plus modernes Typage HLA ils utilisent des échantillons synthétiques déjà standardisés qui réagissent non pas avec les antigènes à la surface des leucocytes, mais avec l'ADN et indiquent directement quels antigènes sont présents dans l'échantillon. Les méthodes moléculaires ne nécessitent pas de globules blancs vivants ; n'importe quelle cellule humaine peut être étudiée, et quelques microlitres de sang suffisent pour fonctionner, ou vous pouvez vous limiter au grattage de la muqueuse buccale.

Génétique moléculaire Typage HLA utilise la méthode PCR dont la première étape consiste à obtenir de l'ADN génomique pur (à partir de sang total, de suspension de leucocytes, de tissus).

L'échantillon d'ADN est ensuite copié - amplifié in vitro à l'aide d'amorces (ADN simple brin court) spécifiques à un locus HLA spécifique. Les extrémités de chaque paire d'amorces doivent être strictement complémentaires de la séquence unique correspondant à un allèle spécifique, sinon l'amplification ne se produira pas.

Après PCR, lors de copies répétées, un grand nombre de fragments d'ADN sont obtenus, qui peuvent être évalués visuellement. Pour ce faire, les mélanges réactionnels sont soumis à une électrolyse ou à une hybridation, et la question de savoir si une amplification spécifique s'est produite est déterminée à l'aide d'un programme ou d'un tableau. Le résultat du typage HLA est présenté sous la forme d’un rapport complet au niveau génique et allélique. En raison de la standardisation des échantillons utilisés, les Typage HLA plus précisément sérologique. De plus, il fournit plus d'informations (plus de nouveaux allèles d'ADN) et un niveau de détail plus élevé, car il permet d'identifier non seulement les antigènes, mais aussi les allèles eux-mêmes, qui déterminent quel antigène est présent sur la cellule.

Réaction immunitaire de lyse. La réaction repose sur la capacité d'anticorps spécifiques à former des complexes immuns avec des cellules, notamment des érythrocytes et des bactéries, ce qui conduit à l'activation du système du complément selon la voie classique et à la lyse cellulaire. Parmi les réactions d'immunolyse, la réaction d'hémolyse est la plus souvent utilisée et la réaction de bactériolyse est rarement utilisée (principalement dans la différenciation du choléra et des vibrions de type cholérique).

Réaction d'hémolyse. Sous l'influence d'une réaction avec des anticorps en présence de complément, une suspension trouble de globules rouges se transforme en un liquide transparent rouge vif - « sang de laque » en raison de la libération d'hémoglobine. Lors de la mise en place d'une réaction diagnostique de fixation du complément (FFR), la réaction d'hémolyse est utilisée comme indicateur : pour tester la présence ou l'absence (fixation) de complément libre.

Réaction d'hémolyse locale dans le gel(Réaction d'Erne) est l'une des variantes de la réaction d'hémolyse. Il permet de déterminer le nombre de cellules formant des anticorps. Le nombre de cellules sécrétant des anticorps - les hémolysines - est déterminé par le nombre de plaques d'hémolyse qui apparaissent dans un gel de gélose contenant des érythrocytes, une suspension de cellules du tissu lymphoïde étudié et complémentaire.

Méthode d'immunofluorescence

(RIF, réaction d'immunofluorescence) est une méthode de détection d'Ags (Abs) spécifiques à l'aide d'Abs (Ags) conjugués à un fluorochrome. Il a une sensibilité et une spécificité élevées. Utilisé pour le diagnostic express des infections. maladies (identification de l'agent pathogène dans le matériel de recherche), ainsi que pour la détermination des récepteurs Ab et de surface et des marqueurs des leucocytes (immunophénotypage) et d'autres cellules. Diriger I. m. consiste à traiter une coupe de tissu ou un frottis à partir de matériel pathologique ou de croûte microbienne contenant des Abs spécifiques conjugués au fluorochrome ; la préparation est lavée pour la libérer des Abs non liés et examinée au microscope à fluorescence. Dans les cas positifs, un complexe immunitaire brillant apparaît à la périphérie de l’objet. Un contrôle est nécessaire pour exclure la luminescence non spécifique. À indirect. Eux. dans la première étape, une coupe de tissu ou un frottis est traité avec un agent spécifique non fluorescent, dans la seconde - avec un agent luminescent contre les -globulines de l'animal qui a été utilisé dans la première étape. Dans le cas positif, un complexe lumineux se forme, constitué de Ar, At et At contre At (méthode sandwich). En complément d'un microscope à fluorescence, le RIF est pris en compte lors du phénotypage des cellules. trieur de cellules laser .

Cytométrie en flux- une méthode de mesure optique des paramètres d'une cellule, de ses organites et des processus qui s'y déroulent.

La technique consiste à détecter la diffusion de la lumière d'un faisceau laser lorsqu'une cellule le traverse dans un flux de liquide, et le degré de dispersion de la lumière permet de se faire une idée de la taille et de la structure de la cellule. De plus, l'analyse prend en compte le niveau de fluorescence des composés chimiques faisant partie de la cellule (autofluorescence) ou ajoutés à l'échantillon avant la cytométrie en flux.

La suspension cellulaire, pré-marquée avec des anticorps monoclonaux fluorescents ou des colorants fluorescents, pénètre dans le flux de fluide traversant la Flow Cell. Les conditions sont sélectionnées de telle manière que les cellules s'alignent les unes après les autres en raison de ce qu'on appelle. focalisation hydrodynamique du jet dans le jet. Au moment où une cellule traverse le faisceau laser, les détecteurs enregistrent :

diffusion de la lumière sous de petits angles (de 1° à 10°) (cette caractéristique permet de déterminer la taille des cellules).

diffusion de la lumière sous un angle de 90° (permet de juger du rapport noyau/cytoplasme, ainsi que de l'hétérogénéité et de la granularité des cellules).

intensité de fluorescence à travers plusieurs canaux de fluorescence (de 2 à 18-20) - vous permet de déterminer la composition des sous-populations de la suspension cellulaire, etc.

Réaction d'agglutination pour la détermination des anticorps anti-Rhésus (test de Coombs indirect)appliquer chez les patients présentant une hémolyse intravasculaire. Chez certains de ces patients, on détecte des anticorps anti-Rhésus, incomplets et monovalents. Ils interagissent spécifiquement avec les érythrocytes Rh-positifs, mais ne provoquent pas leur agglutination. La présence de ces anticorps incomplets est déterminée par le test indirect de Coombs. Pour ce faire, du sérum antiglobuline (anticorps contre les immunoglobulines humaines) est ajouté au système anticorps anti-Rh + érythrocytes Rh-positif, ce qui provoque l'agglutination des érythrocytes. Grâce à la réaction de Coombs, des états pathologiques associés à la lyse intravasculaire des érythrocytes d'origine immunitaire sont diagnostiqués, par exemple la maladie hémolytique du nouveau-né : les érythrocytes d'un fœtus Rh-positif se combinent avec des anticorps incomplets contre le facteur Rh circulant dans le sang, qui ont passé à travers le placenta par une mère Rh négatif.

Mécanisme. La difficulté d'identifier les anticorps incomplets (monovalents) est due au fait que ces anticorps, lorsqu'ils se lient aux épitopes d'un antigène spécifique, ne forment pas de structure en treillis et que la réaction entre les antigènes et les anticorps n'est pas détectée ni par agglutination, précipitation, ou d'autres tests. Pour identifier les complexes antigène-anticorps formés, il est nécessaire d'utiliser des systèmes de test supplémentaires. Pour détecter des anticorps incomplets, par exemple contre l'antigène Rh des érythrocytes dans le sérum sanguin d'une femme enceinte, la réaction s'effectue en deux étapes : 1) les érythrocytes contenant l'antigène Rh sont ajoutés à des dilutions au double du sérum à tester et conservés à 37°C pendant une heure ; 2) du sérum anti-antiglobuline humaine de lapin (dans une dilution de travail pré-titrée) est ajouté aux érythrocytes soigneusement lavés après la première étape. Après 30 minutes d'incubation à 37 °C, les résultats sont appréciés par la présence d'hémagglutination (réaction positive). Il est nécessaire de contrôler les ingrédients de la réaction : 1) sérum antiglobuline + globules rouges connus pour être sensibilisés par des anticorps spécifiques ; 2) érythrocytes traités avec du sérum normal + du sérum antiglobuline ; 3) Érythrocytes Rh négatif traités avec le sérum à tester + sérum antiglobuline.

50. Réaction d'hémagglutination passive. Mécanisme. Composants. Application.

Réaction d'hémagglutination indirecte (passive)(RNGA, RPGA) repose sur l'utilisation d'érythrocytes (ou de latex) avec des antigènes ou des anticorps adsorbés à leur surface, dont l'interaction avec les anticorps ou antigènes correspondants du sérum sanguin des patients provoque le collage des érythrocytes et leur chute au fond du tube à essai ou cellule sous forme de sédiment festonné.

Composants. Pour réaliser le RNGA, des érythrocytes de moutons, de chevaux, de lapins, de poulets, de souris, d'humains et autres peuvent être utilisés, qui sont stockés pour une utilisation future en les traitant avec du formaldéhyde ou du glutaraldéhyde. La capacité d'adsorption des érythrocytes augmente lorsqu'ils sont traités avec des solutions de tanin ou de chlorure de chrome.

Les antigènes du RNGA peuvent être des antigènes polysaccharidiques de micro-organismes, des extraits de vaccins bactériens, des antigènes de virus et de rickettsies, ainsi que d'autres substances.

Les globules rouges sensibilisés par l’hypertension sont appelés diagnostics érythrocytaires. Pour la préparation du diagnostic érythrocytaire, on utilise le plus souvent des érythrocytes de mouton, qui ont une activité adsorbante élevée.

Application. Le RNGA est utilisé pour diagnostiquer les maladies infectieuses, déterminer l'hormone gonadotrope dans l'urine lors de l'établissement d'une grossesse, pour identifier l'hypersensibilité aux médicaments, aux hormones et dans certains autres cas.

Mécanisme. Le test d'hémagglutination indirecte (IRHA) a une sensibilité et une spécificité nettement supérieures à celles du test d'agglutination. Il est utilisé pour identifier l'agent pathogène par sa structure antigénique ou pour indiquer et identifier les produits bactériens - toxines dans le matériel pathologique étudié. En conséquence, des diagnostics d'anticorps érythrocytaires standard (commerciaux) sont utilisés, obtenus par adsorption d'anticorps spécifiques à la surface d'érythrocytes tannés (traités au tanin). Des dilutions en série du matériel d'essai sont préparées dans les puits de plaques en plastique. Ensuite, un volume égal de suspension à 3 % de globules rouges chargés en anticorps est ajouté à chaque puits. Si nécessaire, la réaction est réalisée en parallèle dans plusieurs rangées de puits avec des érythrocytes chargés d'anticorps de spécificités de groupe différentes.

Après 2 heures d'incubation à 37 °C, les résultats sont pris en compte en évaluant l'aspect du sédiment des globules rouges (sans agitation) : en cas de réaction négative, un sédiment apparaît sous forme de disque compact ou d'anneau au niveau de la surface. au fond du puits; avec une réaction positive, un sédiment en dentelle caractéristique de globules rouges apparaît, un film mince aux bords inégaux.