डायरेक्ट कॉम्ब्स परीक्षण से पता चलता है। एंटीग्लोबुलिन परीक्षण. प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया। आदर्श से विचलन

कॉम्ब्स परीक्षण

कॉम्ब्स परीक्षण- एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण जिसका उद्देश्य आरएच-नकारात्मक रक्त में आरएच कारक के लिए अपूर्ण एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी की पहचान करना है - एक विशिष्ट प्रोटीन जो आरएच-पॉजिटिव रक्त के एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर स्थित होता है। इस परीक्षण के दो प्रकार हैं: प्रत्यक्ष - लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर एंटीबॉडी का पता लगाना, अप्रत्यक्ष - रक्त सीरम में एंटीबॉडी का पता लगाना। रक्त रोगों के उपचार के निदान और निगरानी में प्रत्यक्ष परीक्षण किया जाता है: हेमोलिटिक एनीमिया, नवजात शिशुओं के हेमोलिटिक रोग और अन्य। आधान के दौरान दाता और प्राप्तकर्ता के रक्त की अनुकूलता का आकलन करने के साथ-साथ गर्भावस्था की योजना और प्रबंधन करते समय आरएच संघर्ष की उपस्थिति और जोखिम का निर्धारण करने के लिए एक अप्रत्यक्ष परीक्षण किया जाता है। कॉम्ब्स परीक्षण के लिए सामग्री शिरापरक रक्त है; अध्ययन एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया के आधार पर तरीकों का उपयोग करके किया जाता है। आम तौर पर, दोनों परीक्षण नकारात्मक परिणाम देते हैं। विश्लेषण एक दिन के भीतर पूरा हो जाता है।

कॉम्ब्स परीक्षण आरएच-नकारात्मक रक्त का एक नैदानिक ​​परीक्षण है जिसका उद्देश्य आरएच कारक के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना है। परीक्षण का उपयोग आरएच संघर्ष और हेमोलिटिक प्रतिक्रियाओं के विकास के जोखिम की पहचान करने के लिए किया जाता है। प्रत्येक व्यक्ति में, लाल रक्त कोशिकाओं की सतह में एंटीजन या एग्लूटीनोजेन का एक निश्चित सेट होता है - विभिन्न प्रकृति के यौगिक, जिनकी उपस्थिति या अनुपस्थिति का उपयोग रक्त प्रकार और आरएच कारक निर्धारित करने के लिए किया जाता है। कई प्रकार के एंटीजन हैं; चिकित्सा पद्धति में, एग्लूटीनोजेन ए और बी, जो रक्त समूह निर्धारित करते हैं, और एग्लूटीनोजेन डी, आरएच कारक, सबसे बड़े व्यावहारिक महत्व के हैं। एक सकारात्मक आरएच कारक के साथ, डी एंटीजन एरिथ्रोसाइट्स की बाहरी झिल्ली पर पाए जाते हैं, लेकिन एक नकारात्मक कारक के साथ, वे नहीं पाए जाते हैं।

कॉम्ब्स परीक्षण, जिसे एंटीग्लोबुलिन परीक्षण भी कहा जाता है, का उद्देश्य रक्त में आरएच कारक प्रणाली में अपूर्ण एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाना है। आरएच कारक के एंटीबॉडी विशिष्ट इम्युनोग्लोबुलिन हैं जो आरएच-नकारात्मक रक्त में उत्पन्न होते हैं जब एग्लूटीनोजेन डी के साथ लाल रक्त कोशिकाएं इसमें प्रवेश करती हैं, यह तब हो सकता है जब भ्रूण और गर्भवती महिला का रक्त मिश्रित होता है, बिना पूर्व रक्त के संक्रमण के दौरान टाइपिंग. कॉम्ब्स परीक्षण दो संस्करणों में मौजूद है - प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष। प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण करते समय, लाल रक्त कोशिकाओं की सतह से जुड़ी एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। अध्ययन का उपयोग हेमोलिटिक प्रतिक्रिया का कारण निर्धारित करने के लिए किया जाता है। अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का उद्देश्य रक्त प्लाज्मा में एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाना है। दाता और प्राप्तकर्ता या मां और भ्रूण के बीच रक्त की अनुकूलता निर्धारित करना आवश्यक है, और आरएच संघर्ष के विकास और बाद में लाल रक्त कोशिकाओं के हेमोलिसिस को रोकने में मदद करता है।

कॉम्ब्स परीक्षण के दोनों संस्करणों के लिए रक्त एक नस से लिया जाता है। विश्लेषण एंटीग्लोबुलिन सीरम का उपयोग करके एग्लूटिनेशन द्वारा किया जाता है। अध्ययन के परिणामों का उपयोग हेमेटोलॉजी में हेमोलिटिक प्रतिक्रियाओं के कारणों की पहचान करने के लिए, सर्जरी और पुनर्जीवन में रक्त आधान करते समय, प्रसूति और स्त्री रोग में आरएच-नकारात्मक रक्त वाली महिलाओं में गर्भधारण की निगरानी के लिए किया जाता है।

संकेत

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण, जो लाल रक्त कोशिकाओं की सतह से जुड़े एंटीबॉडी का पता लगाता है, विभिन्न मूल के हेमोलिटिक प्रतिक्रियाओं (लाल रक्त कोशिकाओं का विनाश) के लिए निर्धारित किया जाता है। अध्ययन में प्राथमिक ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया, पोस्ट-ट्रांसफ्यूजन हेमोलिटिक एनीमिया, नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग, ऑटोइम्यून, ट्यूमर या संक्रामक रोगों के कारण लाल रक्त कोशिकाओं के हेमोलिसिस के साथ-साथ दवाएं लेने, उदाहरण के लिए, क्विनिडाइन, मेथिल्डोपा, प्रोकेनामाइड के लिए संकेत दिया गया है। . अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण, जो रक्त प्लाज्मा में एंटीबॉडी निर्धारित करता है, का उपयोग आरएच संघर्ष के विकास को रोकने के लिए किया जाता है। यह रक्त आधान की तैयारी करने वाले रोगियों के साथ-साथ नकारात्मक आरएच कारक वाली गर्भवती महिलाओं के लिए भी संकेत दिया जाता है, बशर्ते कि बच्चे के भावी पिता के पास सकारात्मक आरएच कारक हो।

Rh अनुकूलता निर्धारित करने के लिए, Rh-पॉजिटिव रक्त वाले रोगियों को कॉम्ब्स परीक्षण निर्धारित नहीं किया जाता है। इन मामलों में, लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर पहले से ही एंटीजन होते हैं; एंटीबॉडी का उत्पादन रक्त आधान या गर्भवती महिला के रक्तप्रवाह में भ्रूण के रक्त के प्रवेश से नहीं हो सकता है। इसके अलावा, गर्भवती महिलाओं के लिए अध्ययन का संकेत नहीं दिया गया है यदि माता-पिता दोनों में नकारात्मक आरएच कारक है - एक विरासत में मिला अप्रभावी लक्षण। ऐसे जोड़ों में बच्चे का रक्त हमेशा Rh-नकारात्मक होता है, माँ के साथ प्रतिरक्षात्मक संघर्ष असंभव है। हेमोलिटिक पैथोलॉजी में, एंटीग्लोबुलिन परीक्षण का उपयोग चिकित्सा की सफलता की निगरानी के लिए नहीं किया जाता है, क्योंकि परिणाम लाल रक्त कोशिकाओं के विनाश की प्रक्रिया की गतिविधि को प्रतिबिंबित नहीं करते हैं।

कॉम्ब्स परीक्षण की एक सीमा अनुसंधान प्रक्रिया की श्रमसाध्यता है - विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, तापमान और समय की स्थिति, अभिकर्मकों और बायोमटेरियल की तैयारी के नियमों का पालन करना आवश्यक है। कॉम्ब्स परीक्षण के फायदों में इसकी उच्च संवेदनशीलता शामिल है। हेमोलिटिक एनीमिया में, इस परीक्षण के परिणाम सकारात्मक रहते हैं, भले ही हीमोग्लोबिन, बिलीरुबिन और रेटिकुलोसाइट का स्तर सामान्य हो।

सामग्री के विश्लेषण और संग्रह की तैयारी

कॉम्ब्स परीक्षण करने के लिए उपयोग की जाने वाली सामग्री शिरापरक रक्त है। रक्त नमूना लेने की प्रक्रिया के समय और रोगी की तैयारी के लिए कोई विशेष आवश्यकताएं नहीं हैं। किसी भी अध्ययन की तरह, खाने के बाद कम से कम 4 घंटे का ब्रेक लेने और आखिरी 30 मिनट में धूम्रपान बंद करने, व्यायाम करने और भावनात्मक तनाव से बचने की सलाह दी जाती है। दवाएँ लेना बंद करने की आवश्यकता के बारे में अपने डॉक्टर से पहले से चर्चा करना भी उचित है - कुछ दवाएं कॉम्ब्स परीक्षण के परिणामों को विकृत कर सकती हैं। रक्त को सिरिंज का उपयोग करके क्यूबिटल नस से, या कम बार हाथ के पीछे की नस से लिया जाता है। कुछ ही घंटों में सामग्री प्रयोगशाला में पहुंचा दी जाती है।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण करते समय, एंटीग्लोबुलिन सीरम को रोगी के रक्त सीरम में जोड़ा जाता है। कुछ समय बाद, एग्लूटीनेट्स की उपस्थिति के लिए मिश्रण की जांच की जाती है - यदि लाल रक्त कोशिकाओं पर एंटीबॉडी होते हैं तो वे बनते हैं। यदि परिणाम सकारात्मक है, तो एग्लूटिनेटिंग टिटर निर्धारित किया जाता है। अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण में अधिक चरण होते हैं। सबसे पहले, सीरम में मौजूद एंटीबॉडी ऊष्मायन के दौरान इंजेक्ट की गई लाल रक्त कोशिकाओं पर स्थिर हो जाते हैं। फिर नमूने में एंटीग्लोबुलिन सीरम मिलाया जाता है, कुछ समय बाद एग्लूटीनेट्स की उपस्थिति और अनुमापांक निर्धारित किया जाता है। विश्लेषण अवधि 1 दिन है.

सामान्य परिणाम

आम तौर पर, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का परिणाम नकारात्मक (-) होता है। इसका मतलब यह है कि रक्त में लाल रक्त कोशिकाओं से जुड़े कोई एंटीबॉडी नहीं हैं, और वे हेमोलिसिस का कारण नहीं बन सकते हैं। अप्रत्यक्ष कूम्ब्स परीक्षण का सामान्य परिणाम भी नकारात्मक (-) होता है, अर्थात रक्त प्लाज्मा में Rh कारक के प्रति कोई एंटीबॉडी नहीं होती है। प्राप्तकर्ता के लिए रक्त आधान की तैयारी करते समय, इसका मतलब दाता के रक्त के साथ संगतता है; गर्भावस्था की निगरानी करते समय, इसका मतलब है कि मां के आरएच संवेदीकरण की अनुपस्थिति, एक प्रतिरक्षाविज्ञानी संघर्ष विकसित होने का कम जोखिम। शारीरिक कारक, जैसे आहार या शारीरिक गतिविधि, परीक्षण परिणाम को प्रभावित नहीं कर सकते। इसलिए, यदि परिणाम सकारात्मक है, तो डॉक्टर का परामर्श आवश्यक है।

विश्लेषण का नैदानिक ​​​​मूल्य

एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण परिणाम गुणात्मक रूप से, (+) से (++++), या मात्रात्मक रूप से, 1:16 से 1:256 तक टाइटर्स द्वारा व्यक्त किया जाता है। लाल रक्त कोशिकाओं और रक्त सीरम में एंटीबॉडी की सांद्रता का निर्धारण दोनों प्रकार के नमूनों में किया जाता है। यदि प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण सकारात्मक है, तो लाल रक्त कोशिकाओं की बाहरी झिल्ली पर एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, जिससे इन रक्त कोशिकाओं का विनाश होता है। इसका कारण पूर्व टाइपिंग के बिना रक्त आधान हो सकता है - पोस्ट-ट्रांसफ्यूजन हेमोलिटिक प्रतिक्रिया, साथ ही नवजात शिशु के एरिथ्रोब्लास्टोसिस, दवाओं के उपयोग के कारण हेमोलिटिक प्रतिक्रिया, प्राथमिक या माध्यमिक ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया। लाल रक्त कोशिकाओं का द्वितीयक विनाश प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस, इवांस सिंड्रोम, वाल्डेनस्ट्रॉम मैक्रोग्लोबुलिनमिया, पैरॉक्सिस्मल कोल्ड हीमोग्लोबिनुरिया, क्रोनिक लिम्फोसाइटिक ल्यूकेमिया, लिम्फोमा, संक्रामक मोनोन्यूक्लिओसिस, सिफलिस, माइकोप्लाज्मा निमोनिया के कारण हो सकता है।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का सकारात्मक परिणाम प्लाज्मा में आरएच कारक के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति को इंगित करता है। व्यवहार में, इसका मतलब है कि आरएच संवेदीकरण हो गया है, और गर्भावस्था के दौरान दाता रक्त के जलसेक के बाद आरएच संघर्ष विकसित होने की संभावना है। गर्भावस्था की जटिलताओं को रोकने के लिए, सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण परिणाम वाली महिलाओं को एक विशेष रजिस्टर पर रखा जाता है।

असामान्यताओं का उपचार

कॉम्ब्स परीक्षण आइसोसेरोलॉजिकल अध्ययन को संदर्भित करता है। इसके परिणाम हेमोलिटिक प्रतिक्रिया की पहचान करना संभव बनाते हैं, साथ ही आरएच संघर्ष के विकास को रोकने के लिए दाता और प्राप्तकर्ता, मां और भ्रूण के रक्त की अनुकूलता निर्धारित करते हैं। यदि परीक्षण का परिणाम सकारात्मक है, तो आपको अपने उपस्थित चिकित्सक - प्रसूति-स्त्री रोग विशेषज्ञ, हेमेटोलॉजिस्ट, सर्जन से सलाह लेने की आवश्यकता है।

चिकित्सा पद्धति में मौजूद कई एंटीजन में से, तीन प्रकार के रक्त एग्लूटीनोजेन को सबसे अधिक महत्व दिया जाता है। उनमें से एक आरएच कारक की अभिव्यक्ति के लिए जिम्मेदार प्रकार है: यदि यह एरिथ्रोसाइट झिल्ली पर मौजूद है, तो रक्त समूह का निदान आरएच + के रूप में किया जाता है, यदि अनुपस्थित है - आरएच-। यदि Rh+ एग्लूटीनोजेन वाले एरिथ्रोसाइट्स Rh-नकारात्मक रक्त में प्रवेश करते हैं, तो शरीर एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया शुरू कर देता है और इस एंटीजन के लिए एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू कर देता है, जो रोग संबंधी स्थितियों का कारण बनता है।

संदर्भ! आरएच कारक कई दर्जन एंटीजन की एक जटिल बहुघटक प्रणाली है। उनमें से सबसे आम एग्लूटीनोजेन्स टाइप डी (85% मामले), साथ ही ई और सी हैं।

कॉम्ब्स परीक्षण केवल प्रत्यक्ष प्रमाण होने पर ही किया जाता है। कॉम्ब्स परीक्षण निर्धारित करने के कारणों की सामान्य सूची:

• गर्भावस्था की योजना और प्रबंधन (माता-पिता का Rh अलग-अलग होता है);
• रक्त आधान के लिए दान और तैयारी (आरएच के अनुसार रक्त बेमेल एबी0 प्रणाली के अनुसार बेमेल से कम विनाशकारी नहीं है);
• नियोजित सर्जिकल हस्तक्षेप (रक्त आधान के साथ रक्त की हानि की पूर्ति के मामले में);
• हेमोलिटिक रोगों का निदान

अधिक विशिष्ट संकेत किए जा रहे अध्ययन के प्रकार पर निर्भर करते हैं।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण

प्रत्यक्ष परीक्षण लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर एंटीबॉडी का पता लगाता है। मौजूदा का निदान करने के लिए यह आवश्यक है हेमोलिटिक विकृति विज्ञान:

• ऑटोइम्यून (लाल रक्त कोशिकाएं और हीमोग्लोबिन शरीर के अपने एंटीबॉडी के हमले के परिणामस्वरूप नष्ट हो जाते हैं);
• औषधीय (पैथोलॉजिकल प्रक्रिया कुछ दवाएं जैसे क्विनिडाइन या प्रोकेनामाइड लेने से शुरू होती है);
• ट्रांसफ्यूजन के बाद (यदि ट्रांसफ्यूजन के दौरान रक्त का प्रकार मेल नहीं खाता है), साथ ही गर्भावस्था के दौरान आरएच संघर्ष के रूप में (नवजात शिशुओं के एरिथ्रोब्लास्टोसिस)।

संदर्भ! हेमोलिटिक एनीमिया हेमोलिसिस के परिणामस्वरूप लाल रक्त कोशिकाओं के समय से पहले विनाश से जुड़ी एक बीमारी है, जिससे रक्त में अपर्याप्त ऑक्सीजन संतृप्ति होती है और मस्तिष्क और/या आंतरिक अंगों में हाइपोक्सिया होता है।

रक्त तत्वों का हेमोलिसिस ऑन्कोलॉजिकल, संक्रामक और आमवाती रोगों में देखा जाता है, इसलिए प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का उपयोग रोग संबंधी स्थिति के निदान के एक अतिरिक्त साधन के रूप में किया जा सकता है। यह याद रखने योग्य है: एक नकारात्मक परीक्षण मूल्य हेमोलिसिस की संभावना को बाहर नहीं करता है, लेकिन अतिरिक्त परीक्षा का एक कारण है।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण

रोग संबंधी स्थितियों को रोकने के लिए अप्रत्यक्ष परीक्षण का अधिक उपयोग किया जाता है।यह रक्त प्लाज्मा में एंटीबॉडी का पता लगाने में मदद करता है, जो ट्रांसफ्यूजन अनुकूलता का आकलन करने और गर्भावस्था के दौरान आरएच संघर्ष के जोखिमों का निदान करने के लिए आवश्यक है।

80% से अधिक लोगों में क्रमशः सकारात्मक Rh कारक (Rh+) होता है, केवल 20% से कम Rh नकारात्मक होते हैं। यदि एक Rh- माँ में Rh+ बच्चा विकसित होता है, तो उसके शरीर में एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू हो जाता है जो भ्रूण की लाल रक्त कोशिकाओं पर हमला करता है, जिससे हेमोलिसिस होता है।

इस तथ्य को ध्यान में रखते हुए कि "विभिन्न रीसस" विवाहों का प्रतिशत 12-15% तक पहुँच जाता है, नवजात शिशुओं के हेमोलिटिक रोग का जोखिम अधिक होना चाहिए, लेकिन वास्तव में, ऐसे 25 मामलों में से केवल 1 में, महिलाओं को संवेदीकरण की घटना का अनुभव होता है (200 सफल जन्मों के लिए हेमोलिटिक पैथोलॉजी का 1 उदाहरण है)। यह आंशिक रूप से इस तथ्य के कारण है कि पहले आरएच-पॉजिटिव बच्चे में आमतौर पर मां के शरीर से खुली आक्रामकता नहीं होती है; अधिकांश मामले दूसरे और उसके बाद के बच्चों में होते हैं। किसी विशेष एलर्जेन के प्रति पारंपरिक संवेदीकरण के साथ भी यही सिद्धांत लागू होता है।

प्रथम संपर्क पर कोई प्रतिक्रिया नहीं होती है। शरीर अभी एक नए एंटीजन से परिचित हो रहा है, जो आईजीएम वर्ग के एंटीबॉडी का उत्पादन कर रहा है, जो तेजी से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए जिम्मेदार हैं, लेकिन शायद ही कभी बच्चे के रक्त में प्लेसेंटल बाधा को भेदते हैं। सभी पैथोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं दूसरी "बैठक" पर खुद को प्रकट करती हैं, जब शरीर आईजीजी श्रेणी के एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू करता है जो आसानी से भ्रूण के रक्तप्रवाह में प्रवेश करते हैं, जिससे हेमोलिसिस की प्रक्रिया शुरू होती है।

गर्भावस्था के दौरान अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणआपको मां के शरीर में एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने और संवेदीकरण के प्रारंभिक चरण की समय पर पहचान करने की अनुमति देता है। सकारात्मक उत्तर के लिए मासिक एंटीबॉडी टिटर परीक्षण के साथ पंजीकरण और जन्म से 3-4 सप्ताह पहले अनिवार्य अस्पताल में भर्ती होना आवश्यक है।

संदर्भ! आरएच कारक असंगति किसी भी तरह से मां की स्थिति को प्रभावित नहीं करती है, हेमोलिटिक रोग केवल बच्चे में विकसित होता है। गंभीर मामलों में और समय पर प्रतिक्रिया के अभाव में, भ्रूण गर्भ में या जन्म के तुरंत बाद मर सकता है।

प्रक्रिया और उसके कार्यान्वयन की तैयारी

निदान के लिए शिरापरक रक्त का उपयोग किया जाता है। कॉम्ब्स परीक्षण के लिए किसी विशेष दीर्घकालिक तैयारी की आवश्यकता नहीं होती है। विश्लेषण के लिए नस से रक्त लेने से पहले नियमों के एक मानक सेट का पालन करने का प्रयास करें:

• 3 दिन पहले, शराब और दवाएँ छोड़ दें (यदि संभव हो);
• विश्लेषण के लिए रक्त लेने से 8 घंटे पहले अपने अंतिम भोजन की योजना बनाएं;
• 1 घंटे के भीतर धूम्रपान, शारीरिक, मानसिक और भावनात्मक तनाव छोड़ दें;
• प्रक्रिया से पहले, एक गिलास साफ़ शांत पानी पियें।

शोध पद्धति हेमग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया पर आधारित है।

प्रत्यक्ष परीक्षण करते समयरक्त के नमूने को ज्ञात संकेतकों के साथ पहले से तैयार एंटीग्लोबुलिन सीरम के संपर्क में लाया जाता है, मिश्रण को कुछ समय के लिए रखा जाता है और एग्लूटीनेट्स की जांच की जाती है, जो लाल रक्त कोशिकाओं पर एंटीबॉडी मौजूद होने पर बनते हैं। एग्लूटीनेट्स के स्तर का निदान एग्लूटीनेटिंग टिटर का उपयोग करके किया जाता है।

अप्रत्यक्ष नमूनाकॉम्ब्स के पास एक समान तकनीक है, लेकिन क्रियाओं का अधिक जटिल क्रम है। एंटीजेनिक एरिथ्रोसाइट्स (आरएच कारक के साथ) को अलग किए गए रक्त सीरम में पेश किया जाता है, और इन जोड़तोड़ के बाद ही निदान और एग्लूटीनेट टिटर के लिए एंटीग्लोबुलिन सीरम जोड़ा जाता है।

शोध का परिणाम

आम तौर पर दोनों सीधे और अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणनकारात्मक परिणाम देना चाहिए:

• एक नकारात्मक प्रत्यक्ष परीक्षण इंगित करता है कि लाल रक्त कोशिकाओं से जुड़े आरएच कारक के विशिष्ट एंटीबॉडी रक्त में अनुपस्थित हैं और हेमोलिसिस का कारण नहीं बन सकते हैं
• एक नकारात्मक अप्रत्यक्ष परीक्षण से पता चलता है कि रक्त प्लाज्मा में आरएच कारक के लिए कोई मुक्त एंटीबॉडी भी नहीं हैं; यह तथ्य आरएच कारक के अनुसार दाता के रक्त की प्राप्तकर्ता के रक्त (या मां और बच्चे के रक्त) के साथ संगतता को इंगित करता है।

एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण शरीर के आरएच संवेदीकरण के तथ्य को इंगित करता है, जो रक्त आधान के मामले में या एक अलग आरएच स्थिति वाले बच्चे को ले जाने पर आरएच संघर्ष का मुख्य कारण है। इस मामले में, परिणाम 3 महीने (लाल रक्त कोशिकाओं का जीवनकाल) तक अपरिवर्तित रहते हैं। यदि कारण ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया है, तो एक सकारात्मक परीक्षण रोगी का कई वर्षों तक (कुछ मामलों में, उसके पूरे जीवन भर) पालन कर सकता है।

संदर्भ! एंटीग्लोबुलिन परीक्षण अत्यधिक संवेदनशील है, लेकिन इसमें जानकारी की मात्रा कम है। यह हेमोलिटिक प्रक्रिया की गतिविधि को रिकॉर्ड नहीं करता है, एंटीबॉडी के प्रकार का निर्धारण नहीं करता है और पैथोलॉजी के कारण की पहचान करने में सक्षम नहीं है। अधिक संपूर्ण तस्वीर प्राप्त करने के लिए, उपस्थित चिकित्सक को अतिरिक्त परीक्षण (रक्त माइक्रोस्कोपी, सामान्य और जैव रासायनिक विश्लेषण, आमवाती परीक्षण, ईएसआर, लौह और फेरिटिन स्तर) निर्धारित करना होगा।

संवेदीकरण की डिग्री को गुणात्मक रूप से ("+" से "++++") या मात्रात्मक रूप से अनुमापांक के रूप में व्यक्त किया जा सकता है:

• 1:2 - कम मूल्य, खतरनाक नहीं;
• 1:4 - 1:8 - एक प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया के विकास की शुरुआत; कोई खतरा नहीं है, लेकिन निरंतर निगरानी की आवश्यकता है;
• 1:16 -1:1024 - संवेदनशीलता का एक सशक्त रूप, तत्काल कार्रवाई की जानी चाहिए।

सकारात्मक परीक्षण का कारण हो सकता है:

• बिना टाइप किए रक्त का आधान (या टाइपिंग त्रुटि के साथ), जब दाता और प्राप्तकर्ता का आरएच कारक मेल नहीं खाता;
• गर्भावस्था के दौरान आरएच संघर्ष (यदि पिता और माता में रक्त प्रतिजनों की संरचना मेल नहीं खाती);
• ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया - जन्मजात (प्राथमिक) और माध्यमिक दोनों, जो कुछ बीमारियों (इवांस सिंड्रोम, संक्रामक निमोनिया, सिफलिस, शीत हीमोग्लोबिनुरिया, लिम्फोमा) का परिणाम है;
• दवा हेमोलिटिक प्रतिक्रिया.

उपरोक्त में से कोई भी समस्या रोगी द्वारा चिकित्सा सहायता के बिना हल नहीं की जा सकती है। सभी मामलों में, तत्काल परामर्श, पंजीकरण या आपातकालीन अस्पताल में भर्ती की आवश्यकता होगी।

ध्यान! दुर्लभ मामलों में, गलत-सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण संभव है। इसका कारण बार-बार रक्त आधान, साथ ही कई बीमारियाँ हो सकता है: संधिशोथ, ल्यूपस एरिथेमेटोसस, सारकॉइडोसिस। यह घटना प्लीहा को हटाने के बाद भी देखी जा सकती है, साथ ही जब प्रतिक्रिया बाधित होती है (सामग्री का बार-बार हिलना, दूषित पदार्थों की उपस्थिति)।

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया- अपूर्ण एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी निर्धारित करने के लिए एंटीग्लोबुलिन परीक्षण। कॉम्ब्स परीक्षण का उपयोग गर्भवती महिलाओं में आरएच कारक के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाने और आरएच असंगतता वाले नवजात शिशुओं में हेमोलिटिक एनीमिया का निर्धारण करने के लिए किया जाता है, जिससे लाल रक्त कोशिकाओं का विनाश होता है। यह विधि 1945 में अंग्रेजी चिकित्सक रॉबर्ट कॉम्ब्स द्वारा प्रस्तावित की गई थी, और इसलिए इसे बाद में "कूम्ब्स प्रतिक्रिया" कहा गया।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया

लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर पाए जाने वाले एंटीबॉडी रक्त प्लाज्मा में स्थिर या मुक्त हो सकते हैं। एंटीबॉडी की स्थिति के आधार पर, प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया की जाती है। यदि यह मानने का कारण है कि एंटीबॉडी लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर स्थिर हैं, तो प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण किया जाता है। इस मामले में, परीक्षण एक चरण में होता है - एंटीग्लोबुलिन सीरम जोड़ा जाता है। यदि लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर अपूर्ण एंटीबॉडी मौजूद हैं, तो लाल रक्त कोशिका समूहन होता है।

अप्रत्यक्ष प्रतिक्रिया

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया 2 चरणों में होती है। सबसे पहले, लाल रक्त कोशिकाओं को कृत्रिम रूप से संवेदनशील बनाना आवश्यक है। ऐसा करने के लिए, लाल रक्त कोशिकाओं और परीक्षण किए जा रहे रक्त सीरम को इनक्यूबेट किया जाता है, जिससे एंटीबॉडी लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर स्थिर हो जाती हैं। जिसके बाद कॉम्ब्स परीक्षण का दूसरा चरण किया जाता है - एंटीग्लोबुलिन सीरम जोड़ना।

टिप्पणियाँ

विकिमीडिया फ़ाउंडेशन. 2010.

देखें अन्य शब्दकोशों में "कूम्ब्स प्रतिक्रिया" क्या है:

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया- (कूम्ब्स परीक्षण) एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर रेज़ुसएंटीबॉडी निर्धारित करने की एक विधि, जो रक्त सीरम में ग्लोब्युलिन की वर्षा का कारण बनती है। इस परीक्षण का उपयोग Rh असंगति वाले शिशुओं में हेमोलिटिक एनीमिया का निदान करने के लिए किया जाता है... ... चिकित्सा का व्याख्यात्मक शब्दकोश

एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर पुनर्जीवन एंटीबॉडी निर्धारित करने की एक विधि, जो रक्त सीरम में ग्लोब्युलिन की वर्षा का कारण बनती है। इस परीक्षण का उपयोग आरएच असंगति वाले शिशुओं में हेमोलिटिक एनीमिया का निदान करने के लिए किया जाता है, जिनमें... ... चिकित्सा शर्तें

- (एंटीग्लोबुलिन परीक्षण) एंटीग्लोबुलिन की (ए.एस.) का उपयोग करके प्राकृतिक या कृत्रिम रूप से कोशिकाओं (आमतौर पर एरिथ्रोसाइट्स) से जुड़े अधूरे एब्स का पता लगाने की एक विधि। ए.एस., अपूर्ण एब्स को अवक्षेपित करते हुए, इस प्रक्रिया में वाहक कोशिकाओं को शामिल करता है,... ... सूक्ष्म जीव विज्ञान का शब्दकोश

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया- (ब्रिटिश इम्यूनोलॉजिस्ट आर.आर.ए. कॉम्ब्स के नाम पर, जिनका जन्म 1921 में हुआ था, पर्यायवाची - एंटीग्लोबुलिन परीक्षण) - एंटीग्लोबुलिन सीरम की उपस्थिति में अपूर्ण ऑटो- और आइसोएंटीबॉडी द्वारा एरिथ्रोसाइट्स के एग्लूटीनेशन पर आधारित एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया। पर… … मनोविज्ञान और शिक्षाशास्त्र का विश्वकोश शब्दकोश

ट्रांसफ़्यूज़न हेमोलिटिक प्रतिक्रिया- शहद ट्रांसफ्यूजन हेमोलिटिक रिएक्शन (टीएचआर) प्राप्तकर्ता या दाता की लाल रक्त कोशिकाओं का हेमोलिसिस है (शायद ही कभी), जो रक्त और उसके घटकों के आधान के दौरान होता है। प्रतिक्रियाएं प्रकृति में प्रतिरक्षा या गैर-प्रतिरक्षा हो सकती हैं। एटियलजि और रोगजनन प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं... ... रोगों की निर्देशिका

- (आर. आर. ए. कॉम्ब्स, जन्म 1921, अंग्रेजी प्रतिरक्षाविज्ञानी) एंटीग्लोबुलिन सीरम की उपस्थिति में अपूर्ण ऑटो और आइसोएंटीबॉडी द्वारा एरिथ्रोसाइट्स के समूहन पर आधारित सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया; ट्रांसफ़्यूज़ियोलॉजी, फ़ोरेंसिक मेडिसिन, और भी... में उपयोग किया जाता है बड़ा चिकित्सा शब्दकोश

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया- कॉम्ब्स प्रतिक्रिया, एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया जो लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर या रक्त प्लाज्मा में निहित अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देती है। के.आर. हाइपरइम्यूनाइजेशन द्वारा प्राप्त एंटीग्लोबुलिन सीरम के उपयोग पर आधारित है... पशु चिकित्सा विश्वकोश शब्दकोश

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया- मोनोवैलेंट या तथाकथित आंशिक एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से सूअरों और कुछ अन्य जानवरों के रक्त समूहों के विश्लेषण के लिए... कृषि पशुओं के प्रजनन, आनुवंशिकी और प्रजनन में प्रयुक्त नियम और परिभाषाएँ

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया देखें। (

आम तौर पर, रक्त में लाल रक्त कोशिकाओं के प्रति कोई एंटीबॉडी नहीं होती हैं।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण (एक जेल में एग्लूटिनेशन जो पूर्ण डाइवेलेंट एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देता है) है, जो आईजीजी वर्ग के एंटीबॉडी और लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर पूरक के सी 3 घटक का पता लगाता है। आमतौर पर, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण द्वारा पता लगाए गए एंटीबॉडी में एक व्यापक विशिष्टता होती है जो एक अच्छी तरह से स्थापित एंटीजन से जुड़ी नहीं होती है। एक सकारात्मक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण स्पष्ट रूप से इंगित करता है कि रोगी को हेमोलिटिक एनीमिया है, हालांकि सकारात्मक प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण वाले सभी रोगी इस बीमारी से पीड़ित नहीं हैं। लगभग 10% रोगियों में, लाल रक्त कोशिका झिल्ली पर एंटीबॉडी या पूरक घटकों को प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण (परीक्षण नकारात्मक है) द्वारा निर्धारित नहीं किया जा सकता है, लेकिन फिर भी वे ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया से पीड़ित हैं। ऐसे मामलों में एंटीबॉडी की विशिष्टता को स्पष्ट करने के लिए, उनके निस्पंदन के साथ परीक्षणों का उपयोग किया जाता है। एक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण, जो केवल पूरक के लिए सकारात्मक है, आमतौर पर आईजीएम प्रकार के ठंडे एंटीबॉडी को संदर्भित करता है। इस मामले में, शरीर के बेसल तापमान पर लाल रक्त कोशिकाओं पर IgM एंटीबॉडी मौजूद नहीं होते हैं। हालांकि, इस तथ्य के कारण कि आईजीएम एंटीबॉडी सक्रिय रूप से पूरक को ठीक करते हैं, और पूरक लाल रक्त कोशिकाओं पर रहता है, ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया (कोल्ड एगुटिनिन रोग) के इस रूप के साथ, कॉम्ब्स परीक्षण केवल पूरक के लिए सकारात्मक होगा।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण गर्म एंटीबॉडी के कारण होने वाले ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया, ऑटोइम्यून दवा-प्रेरित एनीमिया (मेथिल्डोपा लेने पर, 20% रोगियों तक सकारात्मक प्रतिक्रिया होती है), हेमोलिटिक एनीमिया के दवा-सोखने के प्रकार, हेमोलिटिक के प्रतिरक्षा जटिल प्रकार के लिए सकारात्मक है। एनीमिया (परीक्षण केवल C3 के लिए सकारात्मक है), शीत एंटीबॉडी के कारण होने वाले ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया के साथ - शीत एग्लूटीनिन रोग (परीक्षण केवल C3 के लिए सकारात्मक है)। पैरॉक्सिस्मल कोल्ड हीमोग्लोबिनुरिया में, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण नकारात्मक होता है।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण - एक अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण (अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगाता है) आपको रक्त में असामान्य एंटीबॉडी की पहचान करने की अनुमति देता है, जिसमें एलोएंटीबॉडी से लेकर विदेशी एरिथ्रोसाइट एंटीजन भी शामिल हैं। इसे इसका नाम (अप्रत्यक्ष) इसलिए मिला क्योंकि यह 2 चरणों में होता है। प्रारंभ में, रोगी का रक्त सीरम, जिसमें अपूर्ण एंटीबॉडी होते हैं, दृश्यमान अभिव्यक्तियों के बिना अतिरिक्त कॉर्पसकुलर एजी डायग्नोस्टिकम के साथ बातचीत करता है। दूसरे चरण में, जोड़ा गया एंटीग्लोबुलिन सीरम एक दृश्य अवक्षेप की उपस्थिति के साथ, एंटीजन पर अधिशोषित अपूर्ण एंटीबॉडी के साथ परस्पर क्रिया करता है। समजात (एलोजेनिक) लाल रक्त कोशिकाओं का आधान या गर्भावस्था इन लाल रक्त कोशिका एंटीबॉडी के निर्माण का सबसे आम कारण है। एक सकारात्मक अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का एक नकारात्मक प्रत्यक्ष परीक्षण के साथ संयोजन ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया के निदान के लिए कुछ भी प्रदान नहीं करता है। एक सकारात्मक अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण आधान के लिए रक्त का चयन करते समय और संरक्षित रक्त के साथ संगतता के लिए एक क्रॉस-परीक्षण आयोजित करते समय कुछ कठिनाइयों का कारण बनता है, लेकिन इसका कोई अन्य नैदानिक ​​​​मूल्य नहीं है।

एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण, जिसे अपूर्ण एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किया गया था, 1945 में कॉम्ब्स, मोरेंट, रीस द्वारा प्रस्तावित किया गया था और बाद में इसे कॉम्ब्स परीक्षण कहा गया। इस पद्धति का सार यह है कि मानव इम्युनोग्लोबुलिन के प्रति एंटीबॉडी युक्त एंटीग्लोबुलिन सीरम, जब अपूर्ण एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील लाल रक्त कोशिकाओं के साथ प्रतिक्रिया करता है, तो उनका समूहन होता है।

इस पर निर्भर करते हुए कि एंटीबॉडी लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर स्थिर हैं या रक्त प्लाज्मा में मुक्त अवस्था में हैं, प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का उपयोग किया जाता है।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण उन मामलों में किया जाता है जहां यह मानने का कारण होता है कि अध्ययन की जा रही लाल रक्त कोशिकाएं पहले से ही मौजूद हैं विवो मेंउचित एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील किया गया है, अर्थात। प्रतिक्रिया का पहला चरण - लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर एंटीबॉडी का निर्धारण - शरीर में हुआ और उसके बाद एंटीग्लोबुलिन सीरम के जुड़ने से संवेदनशील कोशिकाओं का समूहन होता है।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का उपयोग करके, परीक्षण सीरम में मौजूद अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। इस मामले में, प्रतिक्रिया दो चरणों में होती है। पहला चरण परीक्षण सीरम के साथ परीक्षण एरिथ्रोसाइट्स का ऊष्मायन है, जिसके दौरान परीक्षण सीरम नमूने में निहित एंटीबॉडी एरिथ्रोसाइट सतह पर तय होते हैं। दूसरा चरण एंटीग्लोबुलिन सीरम को जोड़ना है।

अब तक, इम्यूनोपैथोलॉजिकल स्थितियों के निदान के लिए प्रयोगशाला अभ्यास में कॉम्ब्स परीक्षण का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया में, जो एंटीबॉडी और (या) घटकों के साथ कोशिका झिल्ली के बंधन के कारण लाल रक्त कोशिकाओं के विनाश की विशेषता है। पूरक प्रणाली. इसका उपयोग एरिथ्रोसाइट झिल्ली (आमतौर पर आईजी जी1 और आईजी जी3) पर आईजी जी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए किया जाता है, जो पूरक को सक्रिय कर सकता है, और कभी-कभी पूरक (सी3डी) को भी सक्रिय कर सकता है। हालाँकि, रोग की तीव्र अवधि में, लाल रक्त कोशिकाओं के विनाश के कारण, जिस पर बड़ी संख्या में एंटीबॉडी दर्ज की गई थीं, हेमोलिटिक संकट के दौरान, साथ ही क्रोनिक कोर्स के दौरान एंटीबॉडी की अपर्याप्त संख्या के मामले में। रोग, एक नकारात्मक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण देखा जा सकता है।

इस बात पर जोर दिया जाना चाहिए कि ट्रांसफ्यूजन मीडिया के व्यक्तिगत चयन के लिए अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण सबसे अच्छा तरीका है, क्योंकि यह एरिथ्रोसाइट एंटीजन के लिए दाता और प्राप्तकर्ता की व्यक्तिगत अनुकूलता के सबसे सटीक निर्धारण की अनुमति देता है।

प्रीट्रांसप्लांटेशन अवधि में सभी अंग और ऊतक प्राप्तकर्ताओं और प्रत्यारोपण के बाद हेमटोपोइएटिक स्टेम सेल प्राप्तकर्ताओं की जांच करते समय ऑटोएंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए एक अतिरिक्त प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण की सिफारिश की जाती है।

इम्यूनोहेमेटोलॉजी और ट्रांसफ़्यूज़ियोलॉजी के अलावा, एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों का व्यापक रूप से कई रोग स्थितियों के निदान में उपयोग किया जाता है: हेमटोलॉजिकल रोग, जिनमें लिम्फोप्रोलिफेरेटिव रोग, प्रणालीगत संयोजी ऊतक रोग, स्जोग्रेन रोग, क्रोनिक सक्रिय हेपेटाइटिस आदि शामिल हैं।

सतह एरिथ्रोसाइट एंटीजन को निर्धारित करने के लिए कॉम्ब्स परीक्षणों का सक्रिय रूप से चिकित्सा आनुवंशिकी और फोरेंसिक चिकित्सा में उपयोग किया जाता है।

कॉम्ब्स परीक्षण एक श्रम-गहन शोध पद्धति है जिसके कार्यान्वयन में विशेष देखभाल की आवश्यकता होती है। इसका उपयोग करते समय, विशेष रूप से कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रियाओं की व्याख्या के साथ कुछ कठिनाइयाँ जुड़ी होती हैं। यह ज्ञात है कि कॉम्ब्स परीक्षण करते समय झूठी, कमजोर सकारात्मक या नकारात्मक प्रतिक्रियाएं लाल रक्त कोशिकाओं की अपर्याप्त प्रभावी धुलाई, सीरम के निशान द्वारा एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक के बेअसर होने के साथ-साथ एक गैर-चिकना सतह के संपर्क का परिणाम हो सकती हैं जिस पर एंटीग्लोबुलिन होता है ठीक किया जा सकता है, जिससे इसकी गतिविधि ख़त्म हो सकती है। कॉम्ब्स परीक्षण का एक और नुकसान एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक की अस्थिरता है, जिसकी तैयारी और भंडारण में कुछ विशेषताएं हैं, जिससे एंटीग्लोबुलिन सीरम के साथ हेमग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया को मापना भी मुश्किल हो जाता है।

इसके अलावा, ए. होल्बर्न, डी. वोक एट अल द्वारा किए गए अध्ययन। , से पता चला कि गलत-नकारात्मक परिणामों का कारण लाल रक्त कोशिका निलंबन को फिर से निलंबित करते समय अत्यधिक हिलना हो सकता है। एंटीग्लोबुलिन परीक्षण करते समय त्रुटिपूर्ण परिणाम एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक में एंटी-पूरक एंटीबॉडी के मिश्रण की उपस्थिति के कारण भी हो सकते हैं, विशेष रूप से C3d-, C3c-, C4c- और C4d- पूरक घटकों के लिए, जो सतह पर सोख लिए जाते हैं। ऊष्मायन के दौरान लाल रक्त कोशिकाओं का परीक्षण करें और सकारात्मक परिणाम की उपस्थिति बनाएं।

अध्ययन के तहत नमूनों को अच्छी तरह से धोने और प्रतिक्रिया स्थितियों की निगरानी करके इन नुकसानों को आसानी से समाप्त किया जा सकता है।

पिछले दशक में, अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण करने के लिए आवश्यक समय को कम करने और इसकी संवेदनशीलता को बढ़ाने के लिए कम आयनिक ताकत वाले आइसोटोनिक सेलाइन (एलआईएसएस) का उपयोग किया गया है।

कई लेखकों के अनुसार, एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों का निर्विवाद लाभ उनकी उच्च संवेदनशीलता है, जो गैर-एग्लूटीनेटिंग एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए उपयोग किए जाने वाले वैकल्पिक अनुसंधान विधियों के रिज़ॉल्यूशन से काफी अधिक है।

हमने पॉलीग्लुसीन, जिलेटिन और एंटीग्लोबुलिन सीरम का उपयोग करके अपूर्ण एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए रक्त सीरा का अध्ययन करने के तरीकों के समाधान की तुलना की। अध्ययन के दौरान, जिलेटिन, पॉलीग्लुसीन और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों का उपयोग करके आइसोइम्यून दाताओं के 140 रक्त सीरम नमूनों में अपूर्ण एंटी-डी एंटीबॉडी के टाइटर्स की निगरानी की गई। इन विधियों का निर्माण आम तौर पर स्वीकृत विधियों के अनुसार किया गया था।

यह पाया गया कि, उनके रिज़ॉल्यूशन के संदर्भ में, एंटी-डी एंटीबॉडी द्वारा एरिथ्रोसाइट्स के संवेदीकरण का पता लगाने के तरीकों को निम्नानुसार व्यवस्थित किया गया है: सबसे संवेदनशील अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण है, फिर जिलेटिन परीक्षण और सबसे कम जानकारीपूर्ण पॉलीग्लुसीन परीक्षण है। प्रयोगों की इस श्रृंखला में प्राप्त परिणाम पूरी तरह से साहित्यिक डेटा के अनुरूप हैं, जो हमें यह निष्कर्ष निकालने की अनुमति देता है कि कॉम्ब्स परीक्षणों की संवेदनशीलता काफी अधिक है, जिससे हमें उच्च स्तर की विश्वसनीयता के साथ एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी की उपस्थिति की पहचान करने की अनुमति मिलती है। शरीर जो लाल रक्त कोशिकाओं के एकत्रीकरण का कारण नहीं बनता है।

हालाँकि, व्यवहार में कॉम्ब्स परीक्षण करते समय, ऐसे मामले होते हैं जब अपूर्ण एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया जाता है, हालांकि रोग की नैदानिक ​​​​तस्वीर या पिछले टीकाकरण उनकी संभावित उपस्थिति का संकेत देते हैं। ऐसे मामलों में, यह माना जा सकता है कि एंटीग्लोबुलिन सीरम के एंटीबॉडी द्वारा अवक्षेपित होने के लिए एंटीबॉडी की मात्रा अपर्याप्त है।

इस निष्कर्ष की पुष्टि हमारे अपने प्रयोग से हुई, जिसमें, कोशिकाओं के विश्लेषणात्मक माइक्रोइलेक्ट्रोफोरेसिस की विधि का उपयोग करके, परीक्षण एरिथ्रोसाइट्स पर एंटी-डी एंटीबॉडी की उपस्थिति स्थापित की गई, जो अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण में नहीं पाए गए थे। प्रयोगों की इस श्रृंखला में, एंटीग्लोबुलिन सीरम को एंटीबॉडीोजेनेसिस की प्रगति की अवधि के दौरान प्रतिरक्षित दाताओं के रक्त से प्राप्त सीरा के साथ पूर्व-इनक्यूबेटेड एरिथ्रोसाइट्स में जोड़ा गया था, यानी। उस अवधि के दौरान जब कॉम्ब्स परीक्षण सहित ज्ञात तरीकों का उपयोग करके उनमें एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया गया था।

किए गए अध्ययनों में, एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर अपूर्ण एंटीबॉडी की उपस्थिति का प्रमाण एंटीग्लोबुलिन सीरम के शामिल होने के बाद संवेदनशील लाल रक्त कोशिकाओं की इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण परिवर्तन था। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि रक्त सीरम में अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण में सभी प्रतिरक्षित दाताओं में एंटी-डी एंटीबॉडी निर्धारित की गईं।

गिलरैंड एट अल. यह भी पता चला है कि एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों को एक निश्चित संवेदनशीलता सीमा की विशेषता होती है: एक सकारात्मक परिणाम तभी नोट किया जाता है जब एक लाल रक्त कोशिका की सतह पर कम से कम 500 आईजी जी अणु दर्ज किए जाते हैं।

इसके अलावा, साहित्य साक्ष्य प्रदान करता है कि कॉम्ब्स परीक्षण का संभावित नकारात्मक परिणाम लाल रक्त कोशिकाओं को संवेदनशील बनाने वाले एंटीबॉडी की कम आत्मीयता से जुड़ा हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप वे धोने की प्रक्रिया के दौरान लाल रक्त कोशिकाओं की सतह से आसानी से निकल जाते हैं। .

उपरोक्त को ध्यान में रखते हुए, हम यह निष्कर्ष निकाल सकते हैं कि कुछ मामलों में कॉम्ब्स परीक्षण का नकारात्मक परिणाम अभी तक लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर तय एंटीबॉडी की अनुपस्थिति का प्रमाण नहीं है।

यह ज्ञात है कि कॉम्ब्स प्रतिक्रियाएं अत्यधिक विशिष्ट हैं और अधिकांश प्रकार के अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगा सकती हैं। हालाँकि, जैसा कि कुछ प्रायोगिक डेटा से पता चलता है, एंटीग्लोबुलिन परीक्षण गैर-प्रतिरक्षाविज्ञानी स्थितियों में भी सकारात्मक हो सकते हैं। ई. मुइरहेड एट अल. कुत्तों को फेनिलहाइड्रेज़िन देने के दूसरे दिन, एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण देखा गया। सकारात्मक प्रतिक्रिया की इतनी तीव्र उपस्थिति इसकी प्रतिरक्षात्मक प्रकृति के विरुद्ध तर्क देती है और, बल्कि, एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर प्रोटीन के गैर-विशिष्ट सोखना से जुड़ी होती है।

एम. विलियम्स एट अल. पाया गया कि क्लैवुलैनीक एसिड भी एक सकारात्मक प्रतिक्रिया का कारण बन सकता है, जो लेखकों के अनुसार, एरिथ्रोसाइट सतह पर प्लाज्मा प्रोटीन के गैर-विशिष्ट सोखने से जुड़ा है। सेफलोस्पोरिन एंटीबायोटिक दवाओं के साथ उपचार के दौरान एक समान प्रभाव देखा गया।

उपरोक्त अध्ययनों के लेखक कॉम्ब्स परीक्षणों के सकारात्मक परिणामों की गैर-प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रकृति पर जोर देते हैं और इस बात पर जोर देते हैं कि ये पदार्थ लाल रक्त कोशिकाओं की झिल्लियों में संशोधन करने में सक्षम हैं, जिसके परिणामस्वरूप लाल रक्त कोशिकाएं प्रोटीन को अवशोषित कर सकती हैं। विशेष रूप से, एल्बुमिन) जो आम तौर पर रक्त प्लाज्मा में मौजूद होते हैं और उनमें एंटीबॉडी के गुण नहीं होते हैं। इसके अलावा, यह संभव है कि ज़ेनोबायोटिक, कोशिका की सतह पर अवशोषित होकर, कोशिका झिल्ली और प्लाज्मा प्रोटीन के बीच एक कड़ी के रूप में कार्य करता है।

एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों के परिणामों की सही व्याख्या करने के लिए, परिधीय रक्त में युवा और परिपक्व लाल रक्त कोशिकाओं के बीच मात्रात्मक अनुपात को भी ध्यान में रखा जाना चाहिए। यह पाया गया कि बढ़े हुए एरिथ्रोन पुनर्जनन की अवधि के दौरान शरीर से अलग किए गए रेटिकुलोसाइट्स को एंटीग्लोबुलिन सीरम द्वारा एग्लूटीन किया जा सकता है।

सकारात्मक प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण परिणाम यह प्रतिरक्षा प्रणाली के विकारों, सूजन प्रक्रियाओं के साथ विभिन्न रोग स्थितियों में भी होता है, जिससे एरिथ्रोसाइट्स की झिल्लियों पर विभिन्न विशिष्टताओं के एंटीबॉडी का गैर-विशिष्ट सोखना होता है। इससे पता चलता है कि आईजी जी अणु एरिथ्रोसाइट्स के विशिष्ट एंटीजन के साथ बातचीत नहीं करते हैं, बल्कि केवल अध्ययन के तहत कोशिकाओं की सतह पर तय होते हैं।

यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि डिस्प्रोटीनीमिया के विकास या पैराप्रोटीन की उपस्थिति से संबंधित बीमारियों के मामलों में कॉम्ब्स परीक्षण करते समय, सकारात्मक परिणाम एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर प्रोटीन की उपस्थिति के कारण होता है जिसमें गुण नहीं होते हैं एंटीबॉडीज़, जो उनकी मदद से पता लगाए गए प्रोटीन की प्रकृति के संबंध में एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों की विशिष्टता की कमी को भी इंगित करता है।

इस प्रकार, जैसा कि कई अध्ययनों से पता चला है, प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों के सकारात्मक परिणाम एंटीबॉडी की उपस्थिति का पूर्ण प्रमाण नहीं हैं, क्योंकि सकारात्मक प्रतिक्रियाएं विभिन्न रोग स्थितियों में भी देखी जा सकती हैं जो शरीर के आइसोसेंसिटाइजेशन या ऑटोसेंसिटाइजेशन से जुड़ी नहीं हैं। इसलिए, रोग की नैदानिक ​​​​तस्वीर के साथ कई इम्यूनोसेरोलॉजिकल तरीकों के परिणामों की तुलना ही हमें विकासशील रोग प्रक्रिया का पूरी तरह से न्याय करने की अनुमति देती है।

नकारात्मक प्रत्यक्ष परीक्षण के साथ एक सकारात्मक अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण आमतौर पर परीक्षण सीरम में मुक्त एलोएंटीबॉडी की उपस्थिति को इंगित करता है, जो पिछले रक्त संक्रमण या गर्भधारण से जुड़ा हुआ है।

पैरॉक्सिस्मल नॉक्टर्नल हीमोग्लोबिनुरिया की तीव्रता के दौरान कॉम्ब्स परीक्षण अक्सर सकारात्मक होता है; एंटी-सी3 और एंटी-सी3डीजी के साथ एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण कोल्ड एग्लूटीनिन रोग का एक मार्कर है।

ऐसे मामलों में जहां नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग विकसित होने का उच्च जोखिम होता है, निदान करने के लिए प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों के परिणाम बहुत महत्वपूर्ण होते हैं (अक्सर गर्भावस्था के दौरान) और, यदि आवश्यक हो, उपस्थिति और परिवर्तनों की गतिशील निगरानी एंटीबॉडी टिटर में. अक्सर, नवजात शिशुओं की हेमोलिटिक बीमारी एंटीजन डी के लिए मां और भ्रूण की असंगति से जुड़ी होती है, कम अक्सर एबीओ सिस्टम के एंटीजन के लिए, और यहां तक ​​​​कि अन्य एंटीजन (सी, सी, के, आदि) के लिए भी कम होती है। इस प्रक्रिया के दौरान एंटीबॉडीज बनती हैं ला, एक नियम के रूप में, आईजी जी वर्ग के अपूर्ण एंटीबॉडी, अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण में स्पष्ट रूप से पाए जाते हैं। इस बीमारी में, सही ढंग से स्थापित टिटर और पहचाने गए एंटीबॉडी की विशिष्टता का बहुत महत्व है, क्योंकि गर्भवती महिला के रक्त में एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी के स्तर और हेमोलिटिक की गंभीरता के संभावित पूर्वानुमान के बीच एक निश्चित संबंध है। बीमारी।

सुरक्षित ट्रांसफ़्यूज़न थेरेपी सुनिश्चित करने के लिए नैदानिक ​​​​अभ्यास में अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण भी आवश्यक है। इसका कार्यान्वयन दाताओं और प्राप्तकर्ताओं की विभिन्न श्रेणियों के इम्यूनोहेमेटोलॉजिकल अध्ययन के साथ-साथ चिकित्सा संस्थानों में उन सभी रोगियों की नियमित जांच का एक अनिवार्य घटक है, जिन्हें रक्त और उसके घटकों के आधान की आवश्यकता हो सकती है।

अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण का उपयोग निम्नलिखित मामलों में किया जाता है:

अन्य तरीकों (पॉलीग्लुसीन, जिलेटिन, आदि) द्वारा आरएच कारक के निर्धारण के अस्पष्ट परिणामों के मामले में आरएच संबद्धता (एंटीजन डी) के अधिक सटीक निर्धारण के लिए;

कमजोर एरिथ्रोसाइट एंटीजन (केल, डफी, किड, लुईस, आदि सिस्टम) और इन एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी की पहचान करने के लिए;

एलोइम्यून एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाने और पहचान के लिए, जिसमें एंटीबॉडी भी शामिल हैं जो हेमोलिटिक पोस्ट-ट्रांसफ्यूजन प्रतिक्रियाओं का कारण बनते हैं;

आधान हेमोलिटिक जटिलताओं के दौरान AB0 प्रणाली के प्रतिरक्षा एंटीबॉडी की उपस्थिति का निर्धारण करने के लिए;

ट्रांसफ्यूज्ड रक्त और उसके घटकों के व्यक्तिगत चयन के लिए अनुकूलता परीक्षण के रूप में।

इस प्रकार, कॉम्ब्स परीक्षण एक महत्वपूर्ण नैदानिक ​​​​परीक्षण है जिसका उपयोग चिकित्सा के विभिन्न क्षेत्रों (हेमेटोलॉजी, प्रसूति विज्ञान, रुमेटोलॉजी, ट्रांसफ्यूसियोलॉजी, नैदानिक ​​​​और प्रयोगशाला निदान, आदि) में किया जाता है। कॉम्ब्स परीक्षण करने की विशिष्टताओं का ज्ञान प्राप्त परिणामों की विश्वसनीयता बढ़ाने में मदद करेगा और प्रयोगशाला डेटा की सही व्याख्या में योगदान देगा।

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