Tout le monde a sûrement subi un test de groupe sanguin au moins une fois dans sa vie. Le sujet de l'article d'aujourd'hui porte sur les méthodes existantes pour déterminer le groupe sanguin et laquelle d'entre elles est la meilleure pour tester l'appartenance à une espèce particulière.
Pourquoi faire des tests de groupe sanguin ?
En hématologie moderne, le groupe sanguin est compris comme un ensemble spécifique d'antigènes situés à la surface des globules rouges, qui déterminent leur spécificité. Il existe un grand nombre de ces antigènes (généralement, un tableau de groupes avec toutes sortes d'antigènes est utilisé), cependant, la classification du sang selon le système ABO et le facteur Rh est reconnue dans le monde entier.
Le groupe sanguin doit être déterminé avant toute opération. Les contingents obligatoires dans lesquels la détermination du groupe sanguin est effectuée comprennent les militaires, les forces de l'ordre et les agents des affaires intérieures. Cette mesure est nécessaire, car en cas d'évolution d'un état d'urgence (menaçant le pronostic vital), une transfusion peut s'avérer nécessaire lorsqu'on n'a pas le temps de procéder à une analyse et de tester sa compatibilité avec celle du donneur.
Détermination des groupes sanguins à l'aide de méthodes standard
Il existe de nombreuses techniques différentes, mais la technique du sérum standard est la plus souvent utilisée dans les laboratoires cliniques. Comment déterminer le groupe sanguin à l’aide d’un sérum standard ?
Cette méthode est utilisée pour déterminer les antigènes du système AB0. Le sérum isohémagglutinant standard contient un ensemble d'anticorps spécifiques dirigés contre les molécules de surface des globules rouges. En présence d'un antigène soumis à l'action des anticorps, se produit la formation d'un complexe antigène-anticorps, ce qui provoque le déclenchement d'une cascade de réactions immunitaires. Son résultat est une agglutination des globules rouges ; en fonction de la nature de l'agglutination, on peut conclure à la classification de l'échantillon dans un groupe sanguin particulier.
Les sérums standard sont préparés à partir du sang d'un donneur selon un certain système - en isolant le plasma contenant les anticorps présents et en le diluant ultérieurement. La dilution est réalisée à l'aide d'une solution isotonique de chlorure de sodium.
La dilution s'effectue comme suit : ajouter 1 ml de plasma dans un tube à essai avec 1 ml d'une solution à 0,9 pour cent de sel de table et bien mélanger la solution. Ensuite, 1 ml de la solution plasmatique obtenue est prélevé avec une pipette et ajouté dans un deuxième tube à essai contenant une solution isotonique. Ainsi, une dilution plasmatique de 1:256 est obtenue. L'utilisation d'autres dilutions peut conduire à des erreurs de diagnostic.
La technique de recherche est la suivante - sur une plaque spéciale pour déterminer le groupe sanguin, une goutte (volume total d'environ 0,1 ml) de chaque sérum est placée dans la zone portant la marque correspondante (les sérums de deux échantillons sont utilisés, dont l'un est le contrôle, et le second est utilisé pour l'étude). Après cela, l'échantillon à tester (0,01 ml) est placé à proximité de chaque goutte de sérum, après quoi il est mélangé séparément avec chaque type de diagnosticum.
Après un certain temps (en moyenne environ 5 minutes), les résultats sont analysés avec une description de la nature de la réaction survenue :
- si une agglutination se produit dans l’échantillon testé, le test est positif ;
- s'il n'y a pas d'agglutination, la réaction est négative.
En termes simples, la présence d'agglutination indique que le sang contient l'ensemble nécessaire d'agglutinogènes et, si cela se produit, le sang appartient au groupe pour lequel les anticorps sont contenus dans le sérum. Sur la base des résultats obtenus, un tableau ou un diagramme est construit qui affiche visuellement les résultats.
Méthode de réaction croisée
Cette technique consiste à doser les agglutinogènes à l'aide de coliclones ou de sérums standards avec détection parallèle des agglutinines à l'aide d'érythrocytes standards.
La méthodologie n'est pratiquement pas différente de la détermination du groupe sanguin à l'aide de sérum, cependant, il y a quelques ajouts.
Une petite goutte de globules rouges standards est ajoutée à la plaque sous les sérums appliqués. Après cela, le plasma est extrait d’un tube à essai contenant le sang du patient passé dans une centrifugeuse à l’aide d’une pipette, qui est ajouté aux globules rouges standard, et les globules rouges du fond sont ajoutés au sérum standard.
Comme pour la méthode sérum standard, les résultats obtenus sont appréciés quelques minutes après le début de la réaction. En présence d'agglutination dans les sérums standards, la présence d'agglutinines du système AB0 est jugée, et lors du développement d'une réaction du plasma avec des érythrocytes standards, la présence d'agglutinogènes est jugée.
La méthode croisée s'est répandue car elle évite des erreurs de diagnostic majeures lors de la détermination du sang à l'aide de méthodes standard.
Définition d'un groupe par les zoliclones
L'utilisation de coliclones est utilisée lorsqu'il est impossible de déterminer les antigènes du système AB0 à l'aide de sérums standards.
Les tsoliklones sont des anticorps spécifiques obtenus en les hybridant dans un organisme vivant (on utilise généralement des tsoliklones obtenues à partir de souris en modifiant les lymphocytes B). Leur trait caractéristique est le développement d'une réaction immunitaire entre la coliclone et l'antigène A ou B situé à la surface de la membrane érythrocytaire.
L'algorithme d'utilisation des anticorps monoclonaux est le suivant : une grosse goutte d'une solution de tsoliclones est appliquée sur le comprimé (il est nécessaire de marquer où et quelles se trouvent les tsoliclones). Après cela, une goutte du sang testé est ajoutée au sérum et les résultats sont évalués après quelques minutes.
Le test doit être effectué dans des conditions spécialement créées dans le respect de la température et de l'humidité (avant d'effectuer cette analyse, vous devez vous assurer de l'adéquation des zoliclones).
Le test est considéré comme positif si une agglutination des globules rouges s'est produite dans l'échantillon testé (c'est-à-dire qu'une réaction a eu lieu entre l'anticorps et l'antigène). Si un résultat positif est observé en deux gouttes, l'échantillon est jugé appartenir au groupe IV. Si, au contraire, la réaction ne s'est produite dans aucun échantillon, alors le groupe sanguin est probablement I. Les erreurs dans la détermination du sang à l'aide de cette méthode sont rares.
Méthode express « Erythrotest »
Malgré le fait que les méthodes généralement acceptées pour déterminer le groupement sanguin soient très répandues, les méthodes expresses de détermination du groupement sanguin sont actuellement largement introduites dans la pratique médicale et de laboratoire. L'un d'eux est « Erythrotest ».
Le kit de détermination du groupe sanguin « Erythrotest-Groupcard » comprend les éléments suivants :
- une tablette universelle à cinq trous pour déterminer le groupe selon le système AB0 et son affiliation Rh ;
- scarificateur pour obtenir un échantillon pour la recherche;
- une pipette propre avec laquelle un ensemble de solutions est réalisé ;
- tiges de verre utilisées pour mélanger les échantillons.
Tous les équipements ci-dessus sont nécessaires pour un diagnostic express correct.
Cette technique vous permet de déterminer votre groupe sanguin et votre facteur Rh dans toutes les conditions, surtout s'il n'est pas possible d'utiliser les méthodes classiques.
Le processus d'analyse par la méthode Erythrotest
Les puits du comprimé contiennent des tsoliklones aux antigènes de surface (tsoliclone anti-A, anti-B, anti-AB), ainsi qu'à l'antigène principal qui détermine la transmission du facteur Rh (tsoliclone anti-D). Le cinquième puits contient un réactif de contrôle, qui permet d'éviter les erreurs et d'effectuer correctement l'analyse d'appartenance à un groupe.
Pour évaluer les résultats obtenus, un tableau spécial est utilisé, qui répertorie tous les résultats de recherche possibles.
De nos jours, la médecine a atteint des sommets. Les médecins sont capables d'effectuer de longues opérations et de sauver les gens même des situations les plus désespérées en termes de survie. Cependant, dans de tels cas, il faut faire face au problème de la nécessité d’une transfusion sanguine. Pendant longtemps, cela n’a pas été possible car les patients mouraient très rapidement. Mais ce problème a été résolu par la découverte du concept de groupes sanguins, ou plutôt par la détection d'antigènes sur les érythrocytes et, par conséquent, d'anticorps dans le plasma sanguin.
Détermination du groupe sanguin à l'aide de sérums standards
Quel est le groupe sanguin
Au début du XXe siècle, le médecin australien et scientifique à temps partiel K. Landsteiner a découvert la présence d'antigènes et d'anticorps dans le sang. Les antigènes se trouvent à la surface des globules rouges. Il en existe 2 types. Pour plus de simplicité, les biologistes les ont désignés par A et B. À leur tour, les anticorps sont contenus dans le plasma sanguin et sont appelés α et β. Si A est connecté à α et B à β, le processus de coagulation sanguine commencera. Cette réaction est appelée hémagglutination.
Ainsi, à partir des ensembles d'antigènes et d'anticorps disponibles, il est possible de créer 4 types de sang, présentés dans le tableau ci-dessous :
Groupes sanguins et caractère
Important! Selon le type de sang du donneur fourni pour la transfusion, le sang du patient coagule ou non. Le premier cas est mortel.
Sérums de réaction
Actuellement, il existe un assez grand nombre de façons de déterminer le groupe sanguin. Mais la plupart d’entre eux sont conçus pour être analysés dans de grands laboratoires. Cependant, même si vous êtes dans un petit village ou dans un endroit où il n'y a aucun moyen de contacter de telles institutions, la possibilité d'identifier votre numéro de groupe sanguin demeure.
La détermination du groupe sanguin est effectuée à l'aide de quatre sérums étalons spéciaux, fabriqués à partir de sang humain. Ils sont disponibles soit en flacons, soit en ampoules de 2 à 5 ml et correspondent à différents groupes sanguins :
- 0. Livré avec une étiquette blanche et de couleur claire.
- A. Liquide bleu. Deux bandes bleues sont appliquées sur la bouteille.
- B. Liquide rose pâle. Il y a trois bandes de la même couleur sur la bouteille.
- UN B. Liquide jaune. La bouteille comporte 4 bandes de la même couleur.
Sérums pour tests de groupes sanguins
Important! En fait, ces réactifs sont incolores lors de leur fabrication. Ils sont spécialement peints pour qu'il soit impossible de les confondre lors de leur utilisation.
Sur les étiquettes figurent également :
- titre ;
- date de fabrication;
- date de péremption ;
- informations sur le fabricant ;
- numéro de série.
Comment est déterminé le groupe sanguin ?
Pour déterminer votre groupe sanguin, vous aurez besoin de :
- plaque plate avec 8 évidements ;
- tiges ou pipettes en verre - 8 pièces;
- 2 ensembles de sérums de séries différentes pour éliminer la possibilité d'erreurs ;
- régulier ou sablier.
Instruments pour la détermination du sang à l'aide de sérums standards
Les sérums sont placés en 2 rangées sur une assiette plate, après quoi des tiges de verre sont prélevées. Avec leur aide, le sang testé est introduit dans les rangées. Elle remue avec ces bâtons, après quoi l'assiette commence à basculer. Si vous avez de la chance, le processus peut être surveillé en 10 à 30 secondes, mais il est préférable de le faire pendant 5 minutes maximum pour éliminer la possibilité d'une réaction lente. Ensuite, les résultats obtenus sont étudiés et décryptés.
Attention! Tout d'abord, vous devez faire attention aux tasses dans lesquelles a été versé du sérum des groupes sanguins II et III. Il est intéressant de noter la présence de petits flocons qui apparaissent à la suite d'une agglutination - l'agglutination des globules rouges.
- S'il n'y a pas d'écailles ni en II ni en III, et que lors d'un contrôle complémentaire, rien n'a coagulé ni en I ni en IV, alors il y a un premier groupe sanguin.
- Si, de ce fait, une coagulation est observée partout sauf dans le sérum du groupe II, alors le sang testé appartient au deuxième groupe.
- Si une coagulation est observée dans tous les échantillons à l'exception du sérum du groupe III, alors le sang testé appartient au groupe du même nom.
- Si une coagulation s'est produite dans tous les échantillons, à l'exception du sérum du groupe IV, le groupe sanguin du même nom a été analysé.
Détermination du groupe sanguin
Important ! À proprement parler, le groupe sanguin peut être déterminé en ayant uniquement du sérum des groupes sanguins 2 et 3. Cependant, comme on peut le déduire de l’essence de la méthode, le facteur humain a une grande influence. Pour cette raison, les sérums des groupes sanguins I et IV sont utilisés comme contrôle supplémentaire.
Après la procédure, les ustensiles utilisés doivent être bien rincés à l'eau tiède et séchés. Il peut ensuite être utilisé pour des recherches ultérieures.
Résultats inexacts et leurs raisons
Il arrive parfois que les caillots de globules rouges collés ensemble ne soient pas très clairement visibles. Une solution isotonique de chlorure de sodium peut souvent être ajoutée pendant les tests. Il élimine la possibilité d'une fausse agglutination, provoquant l'effritement des flocons qui ne résultent pas du processus de coagulation.
Important! Si le résultat de l'analyse n'est pas très visible, il faut la refaire et utiliser un microscope pour examiner l'agglutination fine.
Dans le cas d'un résultat clairement identifié, vous pouvez immédiatement indiquer avec précision au patient son groupe sanguin. Sinon, vous devriez vous tourner vers d’autres méthodes d’analyse.
Nous ne devons pas oublier la possibilité d'erreurs, qui se produisent généralement pour les raisons suivantes :
- utilisation de lactosérum périmé ou faible ;
- utiliser trop de sang d’analyse par rapport au volume sérique ;
- la réaction prend beaucoup plus de temps que ne l'exige la réglementation ;
- la température ambiante ne correspond pas à la normale, entraînant une agglutination à froid des globules rouges.
Les causes les plus courantes d'erreurs dans la détermination des groupes sanguins
De plus, il convient de noter que pendant le processus de séchage, des zones granuleuses peuvent se former le long des bords du mélange de sérum et de sang testé, ce qui ne peut pas servir d'indicateur d'une réaction.
Utiliser le résultat en pratique
Comme déjà mentionné, la détermination du groupe sanguin est effectuée pour exclure la mort lors d'une transfusion sanguine. Idéalement, le patient qui reçoit du sang – le receveur – devrait recevoir une transfusion de sang du même type que le sien. Cependant, ce n'est pas toujours le cas. Ne serait-ce que parce que le nombre écrasant de personnes appartenant au premier groupe sanguin est de 50 %. En même temps, ce sont des donneurs universels car ils manquent d’agglutinogènes qui stimulent le processus de coagulation sanguine.
Attention! Quant aux patients du groupe sanguin IV, ils peuvent être qualifiés de receveurs universels, puisque leur corps est capable d'accepter le sang de n'importe quel groupe. Dans le même temps, leur sang ne peut pas être transfusé aux représentants d'un autre groupe.
Pour illustrer la compatibilité des donneurs et des receveurs, nous présentons un tableau :
Compatibilité des groupes sanguins
Dans le monde moderne, la connaissance du groupe sanguin est vitale. Du point de vue des médecins, le taux de survie des patients en dépendra. Du point de vue des gens ordinaires, c’est une chance de sauver leur vie en cas d’urgence. À cet égard, il ne sera pas superflu de connaître votre groupe sanguin et, si possible, de l'inscrire sur votre passeport ou d'autres documents, car un risque pour la santé et la vie peut survenir à tout moment.
Vidéo - Détermination du groupe sanguin
Vidéo - Détermination du groupe sanguin et du facteur Rh
De nos jours, la médecine a atteint des sommets. Les médecins sont capables d'effectuer de longues opérations et de sauver les gens même des situations les plus désespérées en termes de survie. Cependant, dans de tels cas, il faut faire face au problème de la nécessité d’une transfusion sanguine. Pendant longtemps, cela n’a pas été possible car les patients mouraient très rapidement. Mais ce problème a été résolu par la découverte du concept de groupes sanguins, ou plutôt par la détection d'antigènes sur les érythrocytes et, par conséquent, d'anticorps dans le plasma sanguin.
Au début du XXe siècle, le médecin australien et scientifique à temps partiel K. Landsteiner a découvert la présence d'antigènes et d'anticorps dans le sang. Les antigènes se trouvent à la surface des globules rouges. Il en existe 2 types. Pour plus de simplicité, les biologistes les ont désignés par A et B. À leur tour, les anticorps sont contenus dans le plasma sanguin et sont appelés α et β. Si A est connecté à α et B à β, le processus de coagulation sanguine commencera. Cette réaction est appelée hémagglutination.
Ainsi, à partir des ensembles d'antigènes et d'anticorps disponibles, il est possible de créer 4 types de sang, présentés dans le tableau ci-dessous :
| Numéro de groupe | Désignation mondiale | Antigènes | Anticorps |
|---|---|---|---|
| je | 0 | Aucun | α et β |
| II | UN | UN | β |
| III | B | B | α |
| IV | UN B | A et B | Aucun |
Important! Selon le type de sang du donneur fourni pour la transfusion, le sang du patient coagule ou non. Le premier cas est mortel.
Sérums de réaction
Actuellement, il existe un assez grand nombre de façons de déterminer le groupe sanguin. Mais la plupart d’entre eux sont conçus pour être analysés dans de grands laboratoires. Cependant, même si vous êtes dans un petit village ou dans un endroit où il n'y a aucun moyen de contacter de telles institutions, la possibilité d'identifier votre numéro de groupe sanguin demeure.
La détermination du groupe sanguin est effectuée à l'aide de quatre sérums étalons spéciaux, fabriqués à partir de sang humain. Ils sont disponibles soit en flacons, soit en ampoules de 2 à 5 ml et correspondent à différents groupes sanguins :
- 0. Livré avec une étiquette blanche et de couleur claire.
- A. Liquide bleu. Deux bandes bleues sont appliquées sur la bouteille.
- B. Liquide rose pâle. Il y a trois bandes de la même couleur sur la bouteille.
- UN B. Liquide jaune. La bouteille comporte 4 bandes de la même couleur.
Important! En fait, ces réactifs sont incolores lors de leur fabrication. Ils sont spécialement peints pour qu'il soit impossible de les confondre lors de leur utilisation.
Sur les étiquettes figurent également :
- titre ;
- date de fabrication;
- date de péremption ;
- informations sur le fabricant ;
- numéro de série.
Comment est déterminé le groupe sanguin ?
Pour déterminer votre groupe sanguin, vous aurez besoin de :
- plaque plate avec 8 évidements ;
- tiges ou pipettes en verre - 8 pièces;
- 2 ensembles de sérums de séries différentes pour éliminer la possibilité d'erreurs ;
- régulier ou sablier.
Les sérums sont placés en 2 rangées sur une assiette plate, après quoi des tiges de verre sont prélevées. Avec leur aide, le sang testé est introduit dans les rangées. Elle remue avec ces bâtons, après quoi l'assiette commence à basculer. Si vous avez de la chance, le processus peut être surveillé en 10 à 30 secondes, mais il est préférable de le faire pendant 5 minutes maximum pour éliminer la possibilité d'une réaction lente. Ensuite, les résultats obtenus sont étudiés et décryptés.
Attention! Tout d'abord, vous devez faire attention aux tasses dans lesquelles a été versé du sérum des groupes sanguins II et III. Il est intéressant de noter la présence de petits flocons qui apparaissent à la suite d'une agglutination - l'agglutination des globules rouges.
- S'il n'y a pas d'écailles ni en II ni en III, et que lors d'un contrôle complémentaire, rien n'a coagulé ni en I ni en IV, alors il y a un premier groupe sanguin.
- Si, de ce fait, une coagulation est observée partout sauf dans le sérum du groupe II, alors le sang testé appartient au deuxième groupe.
- Si une coagulation est observée dans tous les échantillons à l'exception du sérum du groupe III, alors le sang testé appartient au groupe du même nom.
- Si une coagulation s'est produite dans tous les échantillons, à l'exception du sérum du groupe IV, le groupe sanguin du même nom a été analysé.
Important! À proprement parler, le groupe sanguin peut être déterminé en n’ayant que des sérums des groupes sanguins 2 et 3. Cependant, comme on peut le déduire de l’essence de la méthode, le facteur humain a une grande influence. Pour cette raison, les sérums des groupes sanguins I et IV sont utilisés comme contrôle supplémentaire.
Après la procédure, les ustensiles utilisés doivent être bien rincés à l'eau tiède et séchés. Il peut ensuite être utilisé pour des recherches ultérieures.
Résultats inexacts et leurs raisons
Il arrive parfois que les caillots de globules rouges collés ensemble ne soient pas très clairement visibles. Une solution isotonique de chlorure de sodium peut souvent être ajoutée pendant les tests. Il élimine la possibilité d'une fausse agglutination, provoquant l'effritement des flocons qui ne résultent pas du processus de coagulation.
Important! Si le résultat de l'analyse n'est pas très visible, il faut la refaire et utiliser un microscope pour examiner l'agglutination fine.
Dans le cas d'un résultat clairement identifié, vous pouvez immédiatement indiquer avec précision au patient son groupe sanguin. Sinon, vous devriez vous tourner vers d’autres méthodes d’analyse.
Nous ne devons pas oublier la possibilité d'erreurs, qui se produisent généralement pour les raisons suivantes :
- utilisation de lactosérum périmé ou faible ;
- utiliser trop de sang d’analyse par rapport au volume sérique ;
- la réaction prend beaucoup plus de temps que ne l'exige la réglementation ;
- la température ambiante ne correspond pas à la normale, entraînant une agglutination à froid des globules rouges.
De plus, il convient de noter que pendant le processus de séchage, des zones granuleuses peuvent se former le long des bords du mélange de sérum et de sang testé, ce qui ne peut pas servir d'indicateur d'une réaction.
Utiliser le résultat en pratique
Comme déjà mentionné, la détermination du groupe sanguin est effectuée pour exclure la mort lors d'une transfusion sanguine. Idéalement, le patient qui reçoit du sang – le receveur – devrait recevoir une transfusion de sang du même type que le sien. Cependant, ce n'est pas toujours le cas. Ne serait-ce que parce que le nombre écrasant de personnes appartenant au premier groupe sanguin est de 50 %. En même temps, ce sont des donneurs universels car ils manquent d’agglutinogènes qui stimulent le processus de coagulation sanguine.
Attention! Quant aux patients du groupe sanguin IV, ils peuvent être qualifiés de receveurs universels, puisque leur corps est capable d'accepter le sang de n'importe quel groupe. Dans le même temps, leur sang ne peut pas être transfusé aux représentants d'un autre groupe.
Pour illustrer la compatibilité des donneurs et des receveurs, nous présentons un tableau :
Numéro de groupe Pour quels groupes devient-il donateur ? Pour quels groupes devient-il destinataire ? je I, II, III, IV je II II, IV Moi, II III III, IV Moi, III IV IV I, II, III, IV
Dans le monde moderne, la connaissance du groupe sanguin est vitale. Du point de vue des médecins, le taux de survie des patients en dépendra. Du point de vue des gens ordinaires, c’est une chance de sauver leur vie en cas d’urgence. À cet égard, il ne sera pas superflu de connaître votre groupe sanguin et, si possible, de l'inscrire sur votre passeport ou d'autres documents, car un risque pour la santé et la vie peut survenir à tout moment.
Vidéo - Détermination du groupe sanguin
Vidéo - Détermination du groupe sanguin et du facteur Rh
La procédure de détermination des groupes sanguins à l'aide du système ABO consiste à identifier les antigènes A et B dans les érythrocytes à l'aide d'anticorps standards et à l'aide d'agglutinines dans le plasma ou le sérum du sang analysé avec des érythrocytes standards. La technique a été développée au début du 20e siècle et est toujours activement utilisée en médecine. La détermination des antigènes A et B est réalisée grâce à des cyclones anti-A et anti-B.
Concepts de base
Chez les donneurs, non seulement les antigènes des érythrocytes sont toujours déterminés, mais également les agglutinines du sérum (plasma) à l'aide d'érythrocytes standards. Le sang veineux est utilisé comme biomatériau. Avant le test, vous devez renoncer aux aliments gras un jour avant le test et ne pas fumer une demi-heure avant de passer le test. Les groupes sanguins sont déterminés deux fois : d'abord dans le service médical, où le matériel est préparé, puis confirmés par des recherches en laboratoire.
La détermination des groupes sanguins par le système ABO est le principal test utilisé en transfusiologie. De plus, certains animaux ont un système de groupes sanguins similaire, comme les chimpanzés, les gorilles et les bonobos.
Histoire de la découverte
Il existe une opinion scientifique généralement acceptée selon laquelle la méthode de détermination des groupes sanguins à l'aide du système ABO a été identifiée pour la première fois par Karl Landsteiner, un scientifique autrichien, en 1900. Puis il a décrit dans ses travaux trois types d'antigènes. Pour cela, trente ans plus tard, il reçut le prix Nobel de médecine et de physiologie. En raison du fait qu'il n'y avait pas de liens étroits entre les scientifiques auparavant, il a été établi plus tard que le sérologue tchèque Jan Jansky, indépendamment des recherches de K. Landsteiner, était le premier à décrire les quatre groupes sanguins humains, mais ses recherches n'ont pas été connu d'un large public. Actuellement, c'est la classification développée par J. Jansky qui est utilisée en Russie et dans les républiques de l'ex-URSS. Aux États-Unis, W. L. Moss a créé une œuvre similaire en 1910.
Méthode de détermination des groupes sanguins selon le système ABO à l'aide de zoliclones
Le groupe sanguin doit être déterminé dans une pièce bien éclairée, en maintenant une plage de température de 15 à 25 degrés Celsius, car des écarts par rapport à cette norme peuvent affecter les résultats de l'étude. Les initiales et le nom du patient sont inscrits sur la plaque ou la plaque. De gauche à droite ou en cercle, les désignations de groupe standard sont appliquées (O(I), A(II), B(III)). Les sérums correspondants sont déposés goutte à goutte sous ceux-ci à l'aide de pipettes distinctes pour chaque type. Le sang du patient y est ensuite ajouté. Le matériel d'étude provient du lobe de l'oreille ou du doigt. Ceci est requis par la technique de détermination du groupe sanguin à l'aide du système ABO.
Il est également légal d’utiliser des globules rouges qui se trouvent dans un tube à essai après la formation d’un caillot. Il faut que la quantité de sérum soit dix fois supérieure à la quantité de sang ajoutée. Après cela, les gouttes sont mélangées avec des tiges de verre (séparément pour chacune). Pendant cinq minutes, en secouant doucement la plaque, surveillez l'apparition d'une réaction d'hémagglutination. Elle se révèle par l’apparition de petits grumeaux rouges, qui se fondent ensuite en de plus gros. Le sérum perd alors presque complètement sa couleur.
Afin d'éliminer la fausse hémagglutination due à la simple adhésion des globules rouges, vous devez ajouter une goutte de solution saline après trois minutes et vérifier si l'agglutination persiste. Si oui, alors c'est vrai. Ça y est, la détermination des groupes sanguins selon le système ABO est terminée.
Interprétation des résultats
En conséquence, quatre réactions peuvent être observées :
- l'agglutination ne se produit avec aucun des sérums - premier groupe O(I) ;
- la réaction est apparue avec les sérums I(ab) et III(a) - le deuxième groupe A(II);
- l'agglutination se produit avec les sérums I(ab) et II(b) - troisième groupe B(III) ;
- si la réaction se produit avec trois sérums, vous devez effectuer une procédure supplémentaire avec des réactifs du groupe AB (IV), qui sont standards ; s'il n'y a pas d'agglutination dans une telle goutte, on peut supposer qu'il s'agit du 4ème groupe sanguin AB (IV).
Méthode express pour le facteur Rh
La méthode de détermination des groupes sanguins à l'aide du système ABO implique la détection simultanée du facteur Rh (Rh).
La surface de la plaque est pré-humidifiée et « sérum de contrôle » et « sérum anti-rhésus » y sont inscrits. Ensuite, une ou deux gouttes des réactifs requis sont placées sous les inscriptions et le matériel analysé y est ajouté. Pour cela, vous pouvez également utiliser le sang d'un doigt (dans la même quantité que le volume de sérum) ou les globules rouges restant au fond du tube après l'apparition du caillot (la moitié du volume de sérum). Le choix du matériau n'affecte pas le résultat final. Ensuite, le sang et le sérum sont mélangés avec une tige de verre sèche, après quoi la réaction est attendue pendant cinq minutes. Afin d'éliminer les fausses lectures, une solution isotonique de chlorure de sodium (quelques gouttes seulement) est ajoutée après trois à quatre minutes. La détermination du groupe sanguin selon les systèmes ABO et Rh est effectuée très souvent.
Si une agglutination des globules rouges dans une goutte de sérum se produit, cela indique un sang Rh positif. Selon les statistiques, le Rh+ est présent chez 85 % de la population mondiale. Son absence permet de parler d'affiliation Rh négatif. Si une agglutination apparaît dans le sérum de contrôle, cela signifie qu'il est devenu inutilisable. Malheureusement, l'algorithme de détermination du groupe sanguin à l'aide du système ABO ne fonctionne pas toujours parfaitement.
Quelles erreurs peut-on commettre avec cette technique ?
Les inexactitudes dans la détermination de l'appartenance du sang à un groupe particulier dépendent des raisons suivantes :
- Technique.
- Spécificité biologique du sang testé.
- Infériorité des sérums standards et des érythrocytes.
Erreurs techniques
Erreurs possibles lors de la détermination du groupe sanguin ABO par la méthode croisée :
Erreurs de spécificité biologique
Les erreurs liées à la spécificité biologique du sang analysé sont divisées en deux types.
- En fonction des caractéristiques des globules rouges.
- Erreurs causées par les caractéristiques biologiques du sérum.
Examinons chaque type plus en détail.
En fonction des caractéristiques des globules rouges
- Agglutination tardive, expliquée par des formes « faibles » de globules rouges et d’antigènes. Afin d’éviter les erreurs, il est nécessaire de déterminer le groupe sanguin des donneurs et des receveurs à l’aide de globules rouges standards. L'agglutinogène A2 doit être identifié en répétant l'étude avec d'autres types de réactifs et d'autres verreries, augmentant ainsi le temps d'enregistrement de la réaction.
- La « panagglutination » (« autoagglutination ») est la capacité du sang à présenter la même réaction de nature non spécifique avec tous les sérums, y compris le sien. Après cinq minutes, la gravité d'une telle agglutination s'affaiblit, même si elle devrait augmenter. Des cas similaires sont observés chez des patients atteints de cancer, de brûlés, etc. À titre de contrôle, il est nécessaire d'évaluer la manifestation de l'agglutination des globules rouges analysés dans le sérum standard du quatrième groupe et une solution saline. Avec la « panagglutination », le groupe sanguin est déterminé à la suite d’un triple lavage des globules rouges. Si cela ne donne pas le résultat souhaité, il vaut la peine de prélever à nouveau un échantillon de sang dans un tube à essai chauffé avant la procédure et de placer l'échantillon dans un récipient thermique pour aider à maintenir une température de 37 degrés Celsius ou plus. Ensuite, il doit être transporté au laboratoire, où la température ci-dessus est maintenue et où une solution saline réchauffée, une plaque et des réactifs sont utilisés.
- Parfois, les globules rouges du sang analysé sont disposés comme des « colonnes de pièces de monnaie » et peuvent être confondus avec des agglutinats. Si vous ajoutez deux gouttes d’une solution isotonique et secouez doucement la plaque, les globules rouges se déplaceront dans la bonne position.
- Agglutination incomplète ou mixte, survenant chez les patients des deuxième, troisième et quatrième groupes à la suite d'une transplantation de moelle osseuse ou au cours des trois premiers mois suivant une transfusion sanguine 0(I).
En raison des caractéristiques biologiques du sérum
Erreurs liées à l’utilisation de globules rouges et de sérums standards défectueux
Les sérums faibles qui ont dépassé leur date de péremption ou qui ont un titre inférieur à 1:32 sont capables de générer une agglutination faible et tardive. L'utilisation de tels réactifs est inacceptable.
L'utilisation d'érythrocytes ou de sérums standards inutilisables, préparés dans des conditions non stériles et insuffisamment conservés, conduit à l'apparition d'agglutinations « bactériennes », de nature non spécifique.
Il existe de nombreuses hypothèses populaires sur les groupes sanguins ABO qui sont apparus immédiatement après leur découverte dans différentes cultures du monde. Par exemple, dans les années 30 du siècle dernier, au Japon et dans certains autres pays, une théorie reliant le groupe sanguin à l'un ou l'autre type de personnalité a gagné en popularité. Des théories similaires sont encore populaires aujourd’hui.
Il existe également une opinion selon laquelle une personne du groupe A est sujette à une grave gueule de bois, O est associée à de bonnes dents et le groupe A2 est associé au niveau de QI le plus élevé. Mais de telles affirmations n’ont pas été prouvées scientifiquement.
Nous avons examiné la détermination des groupes sanguins selon le système ABO à l'aide de sérums standards.
Les indications: la nécessité d'une transfusion sanguine, la préparation à la chirurgie.
Préparer: plaque standard avec évidements ; un jeu de tiges de verre ; solution isotonique de chlorure de sodium; un ensemble de sérums hémagglutinants des groupes 1, 2, 3, 4 de deux séries ; pipettes; sang prélevé dans une veine ou un doigt; montre; plateaux; gants; conteneurs pour déchets; conteneurs avec des solutions désinfectantes.
Préparation aux manipulations :
- L'infirmière est entièrement préparée à réaliser l'intervention : vêtue d'une combinaison (blouse), d'un masque, de gants, d'une casquette et de chaussures de remplacement.
- Vérifier la qualité des sérums hémagglutinants standards par : marquage couleur, aspect (clair, transparent) ; la sécurité de l'emballage, la présence d'une étiquette correctement conçue.
- Préparez tout le nécessaire pour effectuer la manipulation.
Effectuer la manipulation :
Sur une plaque blanche, selon la désignation, appliquer séquentiellement une goutte de sérum des groupes 1, 2, 3 de deux séries. Abaissez immédiatement chaque pipette dans la même ampoule (flacon) à partir de laquelle elles ont été prélevées ;
À l'aide d'une tige de verre, appliquez une goutte du sang à tester à côté des empreintes (6 empreintes). Une goutte de sang doit être 10 fois plus petite qu’une goutte de sérum ;
Marquez l'heure et mélangez le sang avec 1 g de sérum avec un bâtonnet de verre propre et sec, puis avec un autre stick 2 g. etc. dans tous les recoins ;
Au fur et à mesure que l'agglutination se produit, mais au plus tôt 3 minutes, ajoutez une goutte de solution isotonique de chlorure de sodium aux gouttes dans lesquelles la réaction d'agglutination s'est produite pour exclure une fausse agglutination et poursuivez l'observation pendant 5 minutes.
Évaluation des résultats :
a) en cas de réaction positive, de minuscules grains visibles à l'œil apparaissent dans le mélange, constitués de globules rouges collés ensemble. Les petits grains se fondent en gros grains, et parfois en flocons, et le lactosérum se décolore ;
b) en cas de réaction négative, le liquide reste uniformément coloré en rose ;
c) 4 combinaisons de réactions positives et négatives sont possibles :
1. S’il n’y a aucune agglutination dans aucune des cellules, alors le sang appartient au groupe I (0).
2. S'il y a une agglutination dans les première et troisième cellules, alors le sang appartient au groupe II (A).
3. Si l'agglutination se situe dans les premier et deuxième groupes, alors le sang appartient au groupe III (B).
4. Si l'agglutination se situe dans les première, deuxième et troisième cellules, alors le sang appartient au groupe IV (AB).
Pour exclure les erreurs, le sang est testé avec du sérum du groupe 4, où il ne devrait y avoir aucune agglutination.
Fin des manipulations :
- Retirez les gants et placez-les dans une solution désinfectante.
- Lavez-vous les mains et séchez-les avec une serviette.
Note: La détermination du groupe sanguin est effectuée dans une pièce bien éclairée à une température de 15 à 25 0 C.
