Struktura bakteriološke laboratorije. Bakteriološki laboratorij, njegova struktura i namjena - mikrobiologija sa mikrobiološkim tehnikama istraživanja. Kako napraviti test stolice

Laboratorija datira još od osnivanja klinike za kožne bolesti, kada je 1911. godine organizovana laboratorija na klinici kožnih bolesti Moskovskog univerziteta. Za prvog laboratorijskog asistenta laboratorije imenovan je specijalizant N.A. Chernogubov.

Godine 1930. laboratoriju je vodio G.V.Vygodchikov, koji je 1926. godine osnovao bakteriološki odjel. Godine 1970 Laboratorija je postala dio Centralizirane kliničko-dijagnostičke laboratorije.

Trenutno je to strukturna dijagnostička jedinica Laboratorijskog i hemotransfuzijskog kompleksa Kliničkog centra Prvog moskovskog državnog medicinskog univerziteta po imenu. I. M. Sechenov.

Interklinička bakteriološka laboratorija jedna je od najvećih kliničkih mikrobioloških laboratorija u Moskvi.

Laboratorijom rukovodi doktor najviše kategorije, kandidat medicinskih nauka
Olga Aleksejevna Morozova, tel.: 8-499-245-38-71

Sastav osoblja

Laboratorija se sastoji od:

• 9 bakteriologa, među njima 6 visokokvalifikovanih, 2 dr.
• 11 medicinskih laboratorijskih asistenata, od kojih 5 ima najvišu kvalifikacionu kategoriju.

Svo medicinsko i medicinsko osoblje je certificirano za obavljanje medicinske djelatnosti u svojoj specijalnosti.

Struktura laboratorija

Struktura laboratorije uključuje sljedeće funkcionalne grupe:

• Studije mikroflore upalnih procesa.
• Intestinalne infekcije.
• Infekcije koje se prenose zrakom.
• Sanitarna i bakteriološka.
• Laboratorijska dijagnostika kožne i venerične patologije

Laboratorija vrši mikrobiološke dijagnostičke i preventivne studije materijala iz stacionara i ambulantnih pacijenata univerzitetskih bolnica na Devičjem polju, Kliničko-dijagnostičkog centra i interkliničkih odjeljenja. Značajan obim posla se obavlja na sanitarnoj i bakteriološkoj kontroli u univerzitetskim klinikama. Ugovorni i komercijalni radovi su u toku.

Laboratorijska oprema.

Laboratorija je opremljena savremenom analitičkom i opštom laboratorijskom opremom:

• Automatski sistem za pripremu i punjenje hranljivih podloga “MasterClave 09, APC 320/90” (AES, Francuska),
• Ormari sa laminarnim protokom II klase biološke sigurnosti NU-437 (NuAire, SAD),
• CO2 inkubatori NU-5500 (NuAire, SAD),
• Termostati MIR 262 (Sanyo, Japan),
• Autoklavi MLS (Sanyo, Japan),
• Sterilizatori na suvi vazduh FED 115 (Binder, Nemačka).

Za identifikaciju vrste izolovanih mikroorganizama i određivanje njihove osjetljivosti na antibakterijske lijekove koriste se automatski mikrobiološki analizator “WalkAway 96 Plus” (Siemens, Njemačka) i MALDI-TOF maseni spektrometar visoke preciznosti i visokih performansi (Bruker Daltonik, Njemačka). korišteno. Za svaki od izolovanih sojeva enterobakterija, radi se test na prisustvo b-laktamaza proširenog spektra (ESBL). Za ispitivanje sterilnosti uzoraka krvi koristi se bakteriološki analizator hemokulture “Bactec 9050” (Becton Dickinson, SAD). Uzgoj uzoraka na prisustvo anaerobne infekcije provodi se u anaerostatima uz korištenje posebnih uvoznih hranjivih podloga.

Sve metode istraživanja i reagensi koji se koriste su certificirani.

Uzorci kliničkog materijala prikupljaju se samo u sterilne plastične posude za jednokratnu upotrebu.
Laboratorija vodi profesionalni mrežni program za praćenje mikrobioloških istraživanja „Microbe-2“, koji vam omogućava analizu dobijenih rezultata, utvrđivanje aktivnosti antibiotika, etiološku strukturu određene upalne nozologije i identifikaciju bolničkih sojeva.

Naučna djelatnost.

Specifičnost laboratorije kliničke mikrobiologije izražava se u značajnoj potražnji za materijalima njenog rada u naučnoistraživačkom radu kliničara. Kao rezultat saradnje sa kliničkim odeljenjima, laboratorija ima najmanje 4 publikacije godišnje.

Laboratorija je licencirana i učestvuje u Federalnom sistemu eksternog ocjenjivanja kvaliteta.
Dozvola broj FS-77-01-007170 od 16.09.2015.

fotografija sa stranice lentachel.ru

Prije samo sto godina, kontaminacija tokom naučnih istraživanja smatrala se gotovo neizbježnom. Mnogi naučnici dovode svoja tijela u smrtnu opasnost proučavajući mikrobe i bakterije o čijoj prirodi nisu znali. Danas je opisana i proučena većina opasnih mikroorganizama koji nas okružuju, štaviše, za bakteriološke laboratorije su obezbeđeni specijalni medicinski proizvodi, čija upotreba sa 99% verovatnoće štiti istraživače od bilo kakvih profesionalnih rizika.

Svi predmeti s kojima rade zaposleni u bakteriološkoj laboratoriji zasićeni su patogenom mikroflorom. Za održavanje zdravog unutrašnjeg okruženja i izbjegavanje direktnog kontakta sa kontaminiranim materijalom, koristi se namještaj, odjeća i pribor s poboljšanom barijerom i antimikrobnim svojstvima.

Hermetički zatvoreni stakleni i metalni ormari i kutije, laboratorijski stolovi pogodni za dezinfekciju, sterilizaciju i opremu za autoklaviranje, te zaključani frižider su stvari koje osiguravaju sigurnost ljudi koji istražuju zaražene uzorke.

Svi kontejneri koji se koriste za čuvanje uzoraka: tikvice, graduirane čaše su hermetički zatvoreni kako bi se izbjeglo širenje mikroba u laboratorijskom zraku.

Za izradu kontejnera koristi se posebno nelomljivo staklo ili plastika visoke čvrstoće. Dvostruki zidovi, poseban stabilan oblik dna, gumeni elementi na poklopcima, tacnama i kivetama stvaraju najbolje uvjete za izolaciju opasnih susjeda poput meningokoka, streptokoka, stafilokoka, bacila i klostridija.

Prije početka istraživanja, osoblje oblači posebnu odjeću: zaštitnu haljinu, masku, zaštitne naočale. Za rad s vrlo opasnim tvarima koriste se gumirane pregače ili posebne haljine s impregnacijom koja odbija vlagu.

Pravilan pravovremeni tretman zraka ultraljubičastim ozračivačima i baktericidnim lampama, korištenje provjerenih modifikacija praonice, snabdijevanje svih zaposlenih kompletnom zaštitnom odjećom je općeprihvaćen standard od kojeg je odstupanje administrativno, au slučaju teških posljedica , krivično kažnjivo.

Sveobuhvatna oprema i provođenje svih mjera predostrožnosti pomažu u očuvanju zdravlja zaposlenih, smanjenju profesionalnog morbiditeta i osiguravanju visoke istraživačke produktivnosti: uočeno je da korištenje pouzdane, provjerene zaštitne opreme smanjuje anksioznost i potiče brže i efikasnije djelovanje.

U bakteriološkoj laboratoriji utvrđuje se vrsta infekcije koja je uzrokovala određenu bolest u tijelu. Da bi se to postiglo, krv, urin, cerebrospinalna tekućina i druge tjelesne tekućine uzgajaju se na različitim hranjivim podlogama. Ponekad se kulture uzimaju sa kože, sluzokože nosa i grla. Očni ljekari, nakon dijagnosticiranja konjuktivitisa, često upućuju pacijenta na bakteriološki pregled.

Ako se sumnja na akutni ili kronični konjuktivitis, studija pomaže da se razjasni dijagnoza i odredi vrsta bakterije koja je izazvala konjuktivitis. Studija počinje korištenjem posebnog uređaja za uzimanje sadržaja konjunktivalne vrećice i inokulaciju u posebnu juhu, a zatim u hranjivu podlogu. Nakon 24-48 sati na hranljivoj podlozi rastu kolonije bakterija. Nakon posebnog bojenja, pregledavaju se pod mikroskopom i utvrđuje se vrsta mikroorganizama koji žive na konjuktivi. To su najčešće bakterije, rjeđe - drugi mikroorganizmi (gljive, amebe).

Da bi se odlučilo o upotrebi najefikasnijeg antibiotika, utvrđuje se osjetljivost patogenih bakterija na lijekove.

U zaključku ćemo dati nekoliko brojeva i još jednom vas podsjetiti kako se možete zaštititi od infekcije.

Zapamtite da su zemlja, voda i vazduh nastanjeni mikroorganizmima. Svakim pokretom, treptanjem i dahom dolazimo u kontakt s njima. Naše sluzokože sprečavaju da uđu u vitalne organe. Obratite pažnju na zanimljive činjenice koje je prikupio jedan od entuzijasta mikrobiologije.

1 g ulične prašine sadrži oko 2 miliona mikroorganizama koji ulaze u vazduh iz zemlje. Najveći broj mikroba nalazi se u gornjih 50 cm tla.

Bazeni sa vodom sadrže od 5 do 10.000 bakterija po kvadratnom metru. cm, au gradskoj rijeci - 23.000 po 1 m2. cm.

Ali podaci o broju mikroorganizama u 1 kvadratu. m zraka koji nas okružuje: u zraku u šumi ili parku - od 100 do 1000 mikroba po 1 kvadratu. m, u morskom zraku 100 km od obale - samo 0,6, na nadmorskoj visini od 2000 m - 3.

Potpuno drugačija slika uočava se na centralnoj ulici srednjeg grada - 3.500 mikroba na 1 kvadratni metar. m, u novoj kući - 4500, u staroj - 36.000, u bolnici - 79.000, u studentskom domu - 40.000.

Ove brojke govore same za sebe. Mikroorganizmi uključuju viruse, bakterije, spore gljivica i plijesni. Osim toga, sam hemijski sastav prašine, posebno na gradskim ulicama, u stanovima i raznim industrijama, sadrži hemijske i fizičke nečistoće štetne za organizam. Naše sluznice i koža ne mogu se uvijek nositi s takvim opterećenjem bez naše pomoći. Da se ne biste razboljeli, morate zapamtiti pravila prevencije.

Uvod

Kao i opći dio svake druge nauke, opća bakteriologija se ne bavi specifičnim pitanjima (recimo, identifikacija pojedinih vrsta bakterija), već problemima općenito; njegova metodologija pokriva osnovne procedure koje se široko koriste u širokom spektru laboratorijskih studija. Ovo nastavno sredstvo nije usmjereno na identifikaciju bilo koje grupe mikroorganizama. To je zadatak sljedećih publikacija - o privatnoj i sanitarnoj mikrobiologiji. Međutim, metode predstavljene ovdje mogu biti korisne u bilo kojem polju gdje su bakterije uključene i mogu se primijeniti na praktične probleme koji uključuju izolaciju i tipizaciju bakterija.

Bakteriologija je postala nauka tek nakon što su razvijene jedinstvene tehnike pomoću kojih nastavlja da utiče i prodire u kasnija naučna polja kao što su virologija, imunologija i molekularna biologija. Tehnika upotrebe čistih kultura koju je razvio R. Koch i imunološke reakcije i hemijske analize koje je prvi koristio L. Pasteur nisu izgubile na značaju.

Metodologija opće bakteriologije reflektuje se u ovoj publikaciji koristeći strukturu koja je tipična za standardne udžbenike ove discipline. Međutim, za razliku od laboratorijskih radionica na predmetu mikrobiologije za univerzitete, on je detaljnije predstavljen u nekim odjeljcima i služi samo kao referenca. Ova struktura uzima u obzir specifičnu obuku i specijalizaciju bakteriologa i veterinarskih stručnjaka. Često se gradivo predstavlja proizvoljno, pa se neke metode spominju više puta, zbog želje da se pokaže njihova međusobna povezanost.

Bakteriološka laboratorija

Bakteriološke laboratorije kao strukturne jedinice organizovane su u sastavu regionalnih, okružnih, međuokružnih veterinarskih laboratorija, kao iu sastavu zonskih veterinarskih laboratorija. Organizuju se i u sanitarno-epidemiološkim nadzornim centrima, u infektivnim bolnicama, opštim bolnicama, nekim specijalizovanim bolnicama (npr. za tuberkulozu, reumatologiju, dermatovenerologiju) i u poliklinikama. Bakteriološke laboratorije su dio specijalizovanih istraživačkih institucija. Bakteriološke laboratorije se stalno koriste za potvrđivanje ili utvrđivanje procene podobnosti mesa za ishranu prema VSE.

Objekti istraživanja u bakteriološkim laboratorijama su:

1. Iscjedak iz organizma: urin, izmet, sputum, gnoj, kao i krv, patološki i kadaverični materijal.

2. Objekti spoljašnjeg okruženja: voda, vazduh, zemljište, ispiranja iz opreme, hrana za životinje, tehnološke sirovine dobijene klanjem domaćih životinja.

3. Prehrambeni proizvodi, uzorci mesa i mesnih prerađevina, mlijeko i mliječni proizvodi za koje je potrebno ocijeniti prikladnost za prehrambene svrhe.

Prostorije bakteriološke laboratorije i oprema radnog mjesta

Specifičnosti mikrobiološkog rada zahtijevaju da prostorija namijenjena laboratoriji bude izolirana od dnevnih soba, prehrambenih jedinica i drugih neosnovnih proizvodnih prostorija.

Bakteriološka laboratorija obuhvata: laboratorijske prostorije za bakteriološka istraživanja i pomoćne prostorije; autoklav ili sterilizacija za dezinfekciju otpadnog materijala i kontaminiranog pribora; praonica opremljena za pranje suđa; bakteriološka kuhinja – za pripremu, flaširanje, sterilizaciju i čuvanje hranljivih podloga; vivarij za držanje pokusnih životinja; materijal za skladištenje rezervnih reagensa, posuđa, opreme i kućne opreme.

Navedene pomoćne prostorije, kao samostalne strukturne cjeline, dio su velikih bakterioloških laboratorija. U malim laboratorijama, bakteriološka kuhinja i kuhinja za sterilizaciju su kombinovane u jednoj prostoriji; Ne postoji posebna prostorija za držanje pokusnih životinja.

Prostorije mikrobioloških laboratorija podijeljene su u 2 zone prema stepenu opasnosti za osoblje:

I. “Infektivna” zona - prostorija ili grupa laboratorijskih prostorija u kojima se manipuliše i čuva osoblje u odgovarajućoj vrsti zaštitne odjeće.

II. “Čista” zona - prostorije u kojima se ne radi sa biološkim materijalom, osoblje je obučeno u ličnu odjeću.

Najsvjetlije, najprostranije prostorije dodijeljene su laboratorijskim prostorijama u kojima se provode sve bakteriološke studije. Zidovi u ovim prostorijama, na visini od 170 cm od poda, okrečeni su u svijetle boje uljanom bojom ili obloženi pločicama. Pod je obložen relinom ili linoleumom. Ova vrsta završne obrade omogućava vam korištenje dezinfekcijskih otopina prilikom čišćenja prostorije.

Svaka prostorija treba da ima umivaonik sa tekućom vodom i policu za flašu dezinfekcionog rastvora.

Jedna od prostorija je opremljena staklenom kutijom - izolovanom prostorijom sa predprostorom (pre-boksom) za obavljanje radova u aseptičnim uslovima. U kutiju se postavlja sto za setvu i stolica, a iznad radnog mesta montirane su baktericidne lampe. U predprostoru je postavljen ormar za čuvanje sterilnog materijala. Prozori i vrata prostorija u "zaraznoj" zoni moraju biti zapečaćeni. Postojeća izduvna ventilacija iz „zarazne“ zone mora biti izolovana od drugih ventilacionih sistema i opremljena finim filterima za vazduh.

Laboratorijska prostorija je opremljena laboratorijskim stolovima, ormarićima i policama za odlaganje opreme, pribora, boja i reagensa neophodnih za rad.

Za rad bakteriologa i laboratorijskog asistenta veoma je važna pravilna organizacija radnog mjesta. Laboratorijski stolovi su postavljeni u blizini prozora. Kada ih postavljate, treba nastojati da svjetlo pada ispred ili sa strane osobe koja radi, po mogućnosti s lijeve strane, ali ni u kojem slučaju s leđa. Preporučljivo je da prostorije za analizu, posebno za mikroskopiju, imaju prozore orijentisane na sjever ili sjeverozapad, jer je za rad potrebno ravnomjerno, difuzno svjetlo. Površinska osvetljenost stolova za rad treba da bude 500 luxa. Radi lakše dezinfekcije, površina laboratorijskih stolova je prekrivena plastikom ili tapacirana željezom. Svaki radnik laboratorije ima posebno radno mjesto dimenzija 150 x 60 cm.

Sva radna mjesta opremljena su predmetima potrebnim za svakodnevni bakteriološki rad, čiji je popis dat u tabeli 1.

Tabela 1.

Potrebni predmeti za bakteriološki rad

Dezinfekcija

Dezinfekcija je uništavanje mikroorganizama u objektima životne sredine.

U mikrobiološkim laboratorijama mjere dezinfekcije se vrlo široko koriste. Prilikom završetka radova sa infektivnim materijalom, zaposleni u bakteriološkim laboratorijama provode preventivnu dezinfekciju ruku i radnog mjesta.

Potrošeni patološki materijal (izmet, urin, sputum, razne vrste tečnosti, krv) se dezinfikuje pre nego što se izbacuje u kanalizaciju.

Graduirane i Pasterove pipete, staklene lopatice i metalni instrumenti kontaminirani patološkim materijalom ili kulturom mikroba, odmah nakon upotrebe spuštaju se u staklene tegle sa dezinfekcijskim rastvorom koji se nalazi na stolu na svakom radnom mestu.

Stakalca i pokrivna stakla koja se koriste u radu također podliježu obaveznoj dezinfekciji, jer čak i fiksirani i obojeni razmaz ponekad zadržava vitalne mikroorganizme koji mogu biti izvor intralaboratorijske kontaminacije. Dezinficijensima se ne tretiraju samo ona jela u kojima su uzgajani mikroorganizmi. Stavlja se u metalne rezervoare ili kante, zatvara se i predaje na autoklaviranje.

Izbor dezinficijensa, koncentracija njegove otopine, omjer količine dezinficijensa i materijala koji se dezinficira, kao i trajanje perioda dezinfekcije određuju se ovisno o specifičnim uvjetima, uzimajući u obzir, prije svega, stabilnost dezinficiranih mikroba, stepena očekivane kontaminacije, sastava i konzistencije materijala u kojem se nalaze.

Dezinfekcija ruku nakon rada sa infektivnim materijalom i kada dođe u kontakt sa kožom. Po završetku rada sa infektivnim materijalom, profilaktički se dezinfikuju ruke. Vate ili ubrus od gaze navlažite 1% otopinom kloramina, najprije se lijeva, a zatim desna ruka obriše sljedećim redoslijedom: stražnja strana šake, površina dlana, međudigitalni prostori, nokatna ležišta. Dakle, prvo se tretiraju najmanje kontaminirana područja, a zatim se prelazi na najjače kontaminirana područja kože. Obrišite ruke 2 minute sa dva tampona uzastopno. Kada se ruke kontaminiraju kulturom patogenog mikroba ili patološkog materijala, kontaminirana područja kože prvo se dezinficiraju. U tu svrhu se 3-5 minuta prekrivaju vatom navlaženom u 1% rastvoru hloramina, zatim se vata sipa u rezervoar ili kantu sa otpadnim materijalom, a ruke se tretiraju drugim štapićem u istom. način kao i tokom preventivne dezinfekcije. Nakon tretmana hloraminom, operite ruke toplom vodom i sapunom. Kod rada s bakterijama koje stvaraju spore, tretman ruku se provodi sa 1% aktiviranim kloraminom. Ako infektivni materijal dođe u kontakt s rukama, izlaganje dezinficijensu se povećava na 5 minuta.

Sterilizacija

Sterilizacija, za razliku od dezinfekcije, podrazumeva uništavanje svih vegetativnih i sporonosnih, patogenih i nepatogenih mikroorganizama u predmetu koji se steriliše. Sterilizacija se vrši na različite načine: parom, suvim toplim vazduhom, ključanjem, filtracijom itd. Izbor jedne ili druge metode sterilizacije određen je kvalitetom i svojstvima mikroflore predmeta koji se steriliše.

Priprema i sterilizacija laboratorijske opreme

Pre sterilizacije, laboratorijsko stakleno posuđe se opere i osuši. Epruvete, bočice, boce, dušeci i tikvice zatvaraju se čepovima od pamučne gaze. Stavite papirne čepove preko čepova svake posude (osim epruveta).

Gumeni, pluteni i stakleni čepovi se sterilišu u posebnoj vrećici vezanoj za vrat posude. Petrijeve zdjelice se steriliziraju umotane u papir, po 1-10 komada. Pasterove pipete 3-15 kom. umotano u papir za umotavanje. Komad vate stavlja se na vrh svake pipete kako bi se spriječilo da materijal uđe u okolinu. Prilikom umotavanja pipeta treba paziti da se ne odlomi zapečaćeni krajevi kapilara. Tokom rada, pipete se iz vrećice vade za gornji kraj.

Sigurnosni pamuk se ubacuje u gornji dio graduiranih pipeta, kao u Pasteurovim pipetama, a zatim umotava u debeli papir, prethodno izrezan na trake širine 2-2,5 cm i dužine 50-70 cm lijevi kraj se savija i umota vrh pipete, a zatim, rotirajući pipetu, umotava traku papira na njega. Da bi se spriječilo odvijanje papira, suprotni kraj je uvrnut ili zalijepljen. Zapremina umotane pipete je napisana na papiru. Ako postoje pernice, u njima se steriliziraju graduirane pipete.

Laboratorijsko stakleno posuđe se steriliše:

a) suva toplota na temperaturi od 180°C odnosno 160°C u trajanju od 1 sata i 150 minuta.

b) u autoklavu pod pritiskom od 1,5 atm. 60 minuta, za uništavanje mikroflore spora - 90 minuta na 2 atm.

Sterilizacija špriceva. Šprice se sterilišu u rastavljenom obliku: odvojeno cilindar i klip u 2% rastvoru natrijum bikarbonata 30 minuta. Kada se radi sa mikroflorom koja nosi spore, sterilizacija se vrši u autoklavu na 132±2°C (2 atm.) 20 minuta, na 126±2°C (1,5 atm.) - 30 minuta. Sterilizirani špric se sastavlja nakon što se ohladi, u cilindar se ubacuje klip, stavlja se igla, nakon što se iz njega prvo ukloni trn. Igla, cilindar i klip se uzimaju pincetom, koja se zajedno sa štrcaljkom sterilizira.

Sterilizacija metalnih instrumenata. Metalni instrumenti (makaze, skalpeli, pincete itd.) se sterilišu u 2% rastvoru natrijum bikarbonata, što sprečava rđu i gubitak oštrine. Preporučuje se da se oštrice skalpela i makaza omotaju vatom pre nego što ih uronite u rastvor.

Sterilizacija bakterijskih petlji. Bakterijske petlje napravljene od platinaste ili nikromske žice steriliziraju se u plamenu alkoholnog ili plinskog plamenika. Ova metoda sterilizacije naziva se kalcinacija ili flambiranje.

Petlja se postavlja u horizontalni položaj u donjem, najhladnijem dijelu plamena plamenika kako bi se spriječilo prskanje spaljenog patogenog materijala. Nakon što izgori, omča se pomiče u vertikalni položaj, prvo donji, a zatim gornji dio žice se zagrije užareno i držač omče progori. Kalcinacija obično traje 5-7 sekundi.

Priprema za sterilizaciju i sterilizaciju papira, gaze i vate. Vata, gaza, filter papir steriliziraju se u suhoj pećnici na temperaturi od 160°C u roku od sat vremena od trenutka kada termometar očita ovu temperaturu ili u autoklavu pod pritiskom od 1 atm. u roku od 30 minuta.

Prije sterilizacije, papir i gaza se režu na komade, a vata se uvalja u kuglice ili tampone potrebne veličine. Nakon toga, svaka vrsta materijala posebno, jedan ili više komada, umota se u debeli papir. Ako se pakiranje pokvari, sterilizirani materijal treba ponovo sterilizirati, jer je njegova sterilnost narušena.

Sterilizacija rukavica i ostalih proizvoda od gume. Gumeni proizvodi (rukavice, tube, itd.) kontaminirani vegetativnim oblikom mikroba steriliziraju se kuhanjem u 2% otopini natrijum bikarbonata ili vodenom parom 30 minuta; kada je kontaminiran mikroflorom koja nosi spore, u autoklavu pod pritiskom od 1,5-2 atm. 30 ili 20 minuta. Prije sterilizacije gumene rukavice se iznutra i izvana posipaju talkom kako bi se spriječilo lijepljenje. Između rukavica se stavlja gaza. Svaki par rukavica se posebno umota u gazu i u tom obliku stavlja u kutije.

Sterilizacija patogenih mikrobnih kultura. Epruvete i čaše sa mikrobnim kulturama koje nisu potrebne za dalji rad stavljaju se u metalni rezervoar, zatvaraju poklopac i podnose na sterilizaciju. Kulture patogenih mikroba, vegetativnih oblika, ubijaju se u autoklavu 30 minuta pod pritiskom od 1 atm. Isporuku rezervoara za sterilizaciju u autoklav vrši posebno određena osoba uz potpis. Režim sterilizacije se evidentira u posebnom dnevniku. Prilikom uništavanja kultura mikroba I i II grupe patogenosti, kao i materijala kontaminiranog ili za kojeg se sumnja da je kontaminiran patogenima koji su dodijeljeni ovim grupama, cisterne sa otpadnim materijalom se prebacuju na metalne tacne sa visokim stranicama u prisustvu osobe ovlaštene za praćenje. rad sa infektivnim materijalom.

Vrste sterilizacije

Sterilizacija ključanjem. Sterilizacija kuhanjem se vrši u sterilizatoru. Destilirana voda se sipa u sterilizator, jer voda iz slavine stvara kamenac. (Stakljeni predmeti se potapaju u hladnu vodu, metalni predmeti u toplu vodu sa dodatkom natrijum bikarbonata). Predmeti za sterilizaciju se kuvaju na laganoj vatri 30-60 minuta. Početkom sterilizacije smatra se trenutak kada voda proključa u sterilizatoru. Na kraju ključanja instrumenti se uzimaju sterilnom pincetom, koja se zajedno sa ostalim predmetima prokuva.

Sterilizacija suvom toplotom. Sterilizacija suvom toplotom vrši se u Pasteur pećnici. Materijal pripremljen za sterilizaciju stavlja se na police tako da ne dolazi u dodir sa zidovima. Orman se zatvara, a zatim se uključuje grijanje. Trajanje sterilizacije na temperaturi od 150°C je 2 sata, na 165°C - 1 sat, na 180°C - 40 minuta, na 200°C - 10-15 minuta (na 170°C okretanje papira i vate žuta, a na višim temperaturama ugljenisana). Početkom sterilizacije smatra se trenutak kada temperatura u pećnici dostigne željenu visinu. Na kraju perioda sterilizacije, pećnica se isključuje, ali se vrata ormarića ne otvaraju dok se potpuno ne ohlade, jer hladan zrak koji ulazi u ormar može uzrokovati stvaranje pukotina na vrućim posudama.

Sterilizacija parom pod pritiskom. Sterilizacija parom pod pritiskom se vrši u autoklavu. Autoklav se sastoji od dva kotla umetnuta jedan u drugi, kućišta i poklopca. Vanjski kotao se naziva vodeno-parna komora, unutrašnji kotao se naziva komora za sterilizaciju. Para se stvara u vodeno-parnom kotlu. Materijal koji se steriliše stavlja se u unutrašnji kotao. Na vrhu kotla za sterilizaciju postoje male rupe kroz koje prolazi para iz vodeno-parne komore. Poklopac autoklava je hermetički pričvršćen na kućište. Pored navedenih glavnih delova, autoklav ima niz delova koji regulišu njegov rad: manometar, vodomerno staklo, sigurnosni ventil, izlazni, vazdušni i kondenzacioni ventili. Manometar se koristi za određivanje pritiska stvorenog u komori za sterilizaciju. Normalni atmosferski pritisak (760 mmHg) uzima se kao nula, stoga je u autoklavu u praznom hodu igla manometra na nuli. Postoji određena veza između očitavanja manometra i temperature (tabela 2).

Tabela 2.

Odnos između očitavanja manometra i temperature ključanja vode

Crvena linija na skali manometra određuje maksimalni radni pritisak koji je dozvoljen u autoklavu. Sigurnosni ventil služi za zaštitu od prekomjernog povećanja pritiska. Postavlja se na zadani pritisak, odnosno pritisak pri kojem se mora izvršiti sterilizacija, kada igla manometra pređe liniju, ventil autoklava se automatski otvara i ispušta višak pare, čime se usporava dalji porast pritiska.

Na bočnoj stijenci autoklava nalazi se vodomjerno staklo koje pokazuje nivo vode u vodeno-parnom kotlu. Na staklenoj cijevi vodomjera nalaze se dvije horizontalne linije - donja i gornja, koje označavaju dozvoljeni donji i gornji nivo vode u vodeno-parnoj komori. Vazdušni ventil je dizajniran da odvodi vazduh iz sterilizacione i vodeno-parne komore na početku sterilizacije, jer vazduh, kao loš provodnik toplote, remeti režim sterilizacije. Na dnu autoklava nalazi se slavina za kondenzaciju koja oslobađa komoru za sterilizaciju od kondenzata koji nastaje tokom perioda zagrevanja sterilizovanog materijala.

Pravila za rad sa autoklavom. Prije početka rada pregledajte autoklav i kontrolnu opremu. U autoklavima sa automatskom kontrolom pare, strelice na električnom vakuumskom manometru vodeno-parne komore su postavljene u skladu sa režimom sterilizacije: donja strelica je postavljena na 0,1 atm. donji, gornji - za 0,1 atm. iznad radnog pritiska, vodeno-parna komora se puni vodom do gornje oznake mernog stakla. Za vrijeme punjenja vodom ventil na cijevi kroz koji para ulazi u komoru ostaje otvoren kako bi se omogućio slobodan izlaz zraka iz kotla. Komora za sterilizaciju autoklava je napunjena materijalom koji se steriliše. Nakon toga, poklopac (ili vrata) autoklava se zatvara, čvrsto se učvršćuje centralnom bravom ili vijcima; da biste izbjegli izobličenje, vijke zavijte poprečno (po prečniku). Zatim uključite izvor grijanja (električna struja, para), zatvarajući ventil na cijevi koja povezuje izvor pare sa komorom za sterilizaciju. Sa početkom stvaranja pare i stvaranjem pritiska u vodeno-parnoj komori, vrši se pročišćavanje (uklanjanje vazduha iz kotla za sterilizaciju). Način uklanjanja zraka određen je dizajnom autoklava. Najprije zrak izlazi u odvojenim dijelovima, a zatim se pojavljuje glatka, kontinuirana struja pare, što ukazuje da je zrak potpuno istisnut iz komore za sterilizaciju. Nakon uklanjanja zraka, slavina se zatvara i počinje postepeno povećanje tlaka u komori za sterilizaciju.

Početkom sterilizacije smatra se trenutak kada igla manometra pokaže podešeni pritisak. Nakon toga, intenzitet zagrijavanja se smanjuje tako da tlak u autoklavu ostaje na istom nivou potrebno vrijeme. Na kraju vremena sterilizacije, zagrijavanje se zaustavlja. Zatvorite ventil u cjevovodu koji dovodi paru u komoru za sterilizaciju i otvorite ventil na kondenzacijskoj (donjoj) cijevi da smanjite tlak pare u komori. Nakon što igla manometra padne na nulu, polako otpustite stezne uređaje i otvorite poklopac autoklava.

Temperatura i trajanje sterilizacije određuju se kvalitetom materijala koji se steriliše i svojstvima mikroorganizama kojima je zaražen.

Kontrola temperature u komori za sterilizaciju vrši se periodično bakteriološkim testovima. Biotestove proizvode bakteriološke laboratorije Centra za osjetljive nauke. Ako ovi testovi nisu položeni, provjerava se tehničko stanje autoklava.

Sterilizacija tekućom parom. Sterilizacija tekućom parom se vrši u aparatu za protočnu paru Koch ili u autoklavu sa odvrnutim poklopcem i otvorenim izlaznim ventilom. Koch aparat je metalni šuplji cilindar sa duplim dnom. Prostor između gornje i donje donje ploče ispunjen je vodom 2/3 (postoji slavina za ispuštanje preostale vode nakon sterilizacije). Poklopac uređaja ima rupu u sredini za termometar i nekoliko malih rupica za izlazak pare. Materijal koji se steriliše labavo se ubacuje u komoru uređaja kako bi se osigurao maksimalan kontakt s parom. Početkom sterilizacije smatra se vrijeme od trenutka kada voda proključa i para uđe u komoru za sterilizaciju. U aparatu za fluidnu paru, hranljivi mediji se uglavnom sterilišu, čija se svojstva menjaju na temperaturama iznad 100°C. Sterilizaciju tekućom parom treba ponoviti, jer jedno zagrijavanje na temperaturi od 100°C ne osigurava potpunu dezinfekciju. Ova metoda se naziva frakcijska sterilizacija: sterilizirani materijal se tretira tekućom parom 30 minuta dnevno tijekom 3 dana. U intervalima između sterilizacija materijal se drži na sobnoj temperaturi kako bi spore proklijale u vegetativne forme, koje uginu prilikom naknadnog zagrijavanja.

Tindalizacija. Tindalizacija je frakcijska sterilizacija korištenjem temperatura ispod 100°C, koju je predložio Tyndall. Materijal koji se steriliše se zagrijava u vodenom kupatilu opremljenom termostatom sat vremena na temperaturi od 60-65°C 5 dana ili na 70-80°C 3 dana. U intervalima između zagrevanja, tretirani materijal se drži na temperaturi od 25°C kako bi spore proklijale u vegetativne forme, koje pri naknadnom zagrevanju umiru. Tindalizacija se koristi za defertilizaciju hranljivih podloga koje sadrže protein.

Mehanička sterilizacija pomoću bakterijskih ultrafiltera. Bakterijski filteri se koriste za oslobađanje tekućine od bakterija koje se u njoj nalaze, kao i za odvajanje bakterija od virusa, faga i egzotoksina. Virusi se ne zadržavaju bakterijskim filterima, pa se ultrafiltracija ne može smatrati sterilizacijom u prihvaćenom značenju te riječi. Za proizvodnju ultrafiltera koriste se fino porozni materijali (kaolin, azbest, nitroceluloza itd.) koji mogu uhvatiti bakterije.

Azbestni filteri (Seitz filteri) su azbestne ploče debljine 3-5 mm i prečnika 35 i 140 mm za filtriranje malih i velikih količina tečnosti. Kod nas se azbestni filteri proizvode u dvije marke: “F” (filterski), koji zadržavaju suspendirane čestice, ali propuštaju bakterije, i “SF” (sterilizirajući), gušći, zadržavajući bakterije. Prije upotrebe azbestni filteri se montiraju u filterske uređaje i zajedno sa njima steriliziraju u autoklavu. Azbestni filteri se koriste jednokratno. Membranski ultrafilteri su napravljeni od nitroceluloze i predstavljaju bijele diskove prečnika 35 mm i debljine 0,1 mm.

Bakterijski filteri se razlikuju po veličini pora i označeni su serijskim brojevima (tablica 3).

Tabela 3.

Bakterijski filteri

Neposredno prije upotrebe, membranski filteri se steriliziraju kuhanjem. Filteri se stavljaju u destilovanu vodu, zagrijanu na temperaturu od 50-60°C, da se ne bi savijali, i kuvaju na laganoj vatri 30 minuta, menjajući vodu 2-3 puta. Kako bi se izbjegla oštećenja, sterilizirani filteri se uklanjaju iz sterilizatora flambiranim i ohlađenim pincetama sa glatkim vrhovima.

Za filtriranje tekućina, bakterijski filteri se montiraju u posebne filterske uređaje, posebno u Seitz filter.

Sastoji se iz 2 dijela: gornjeg, u obliku cilindra ili lijevka, i donjeg nosećeg dijela aparata, sa tzv. filter stolom od metalne mreže ili čiste keramičke ploče, na kojoj je membrana ili azbest. postavljen filter. Noseći dio aparata ima oblik lijevka, čiji se suženi dio nalazi u gumenom čepu grla Bunsenove tikvice. U radnom stanju, gornji dio uređaja je pričvršćen za donji dio vijcima. Prije početka filtracije spojevi različitih dijelova instalacije se pune parafinom kako bi se stvorila nepropusnost. Izlazna cijev tikvice spojena je gumenom cijevi debelog zida na vodeni mlaz, ulje ili pumpu za bicikl. Nakon toga, filtrirana tekućina se sipa u cilindar ili lijevak aparata i pumpa se uključuje, stvarajući vakuum u prijemnoj posudi. Kao rezultat nastale razlike tlaka, filtrirana tekućina prolazi kroz pore filtera u prijemnik. Mikroorganizmi ostaju na površini filtera.

Priprema razmaza

Za proučavanje mikroorganizama u obojenom obliku, bris se pravi na stakalcu, suši, fiksira i zatim boji.

Ispitni materijal se raspoređuje u tankom sloju preko površine dobro odmašćenog staklenog tobogana.

Razmazi se pripremaju od mikrobnih kultura, patološkog materijala (sputum, gnoj, urin, krv itd.) i iz organa leševa.

Tehnika pripreme razmaza određena je prirodom materijala koji se ispituje.

Priprema razmaza iz mikrobnih kultura sa tečnim hranljivim medijumom i iz tečnog patološkog materijala (urina, likvora, itd.). Mala kap tečnosti za testiranje nanosi se bakterijskom petljom na staklo i kružnim pokretima se petlje raspoređuju u ravnomernom sloju u obliku kruga prečnika novčića za peni.

Priprema razmaza krvi. Kap krvi se nanosi na staklo, bliže jednom od njegovih krajeva. Drugo – brušeno – staklo, koje treba da bude uže od predmetnog stakla, postavlja se na prvo pod uglom od 45° i dovodi do kapi krvi dok ne dođe u dodir sa njim. Nakon što se krv proširi duž polirane ivice, staklom se pravi klizni pokret s desna na lijevo, ravnomjerno raspoređujući krv u tankom sloju po cijeloj površini stakla. Debljina poteza zavisi od ugla između stakala: što je ugao oštriji, to je tanji potez. Pravilno pripremljen bris ima svijetloružičastu boju i istu debljinu po cijeloj površini.

Priprema guste kapi. Kap krvi se nanosi na sredinu stakalca pomoću Pasteurove pipete ili se staklo nanosi direktno na kap krvi koja strši. Krv nanesena na čašu razmazuje se bakterijskom petljom tako da promjer dobivenog razmaza odgovara veličini novčića. Čaša se ostavlja u vodoravnom položaju dok se krv ne osuši. Krv u "debeloj kapi" je neravnomjerno raspoređena, formirajući neravnu ivicu.

Priprema razmaza od viskoznog materijala (sputum, gnoj). Sputum ili gnoj naneseni na stakalcu bliže uskom rubu prekriva se drugim stakalcem. Čaše su malo pritisnute jedna uz drugu.

Nakon toga se slobodni krajevi čaše hvataju prstima 1 i 2 obje ruke i pomjeraju u suprotnim smjerovima tako da pri pomicanju obje čaše čvrsto pristaju jedna uz drugu. Rezultat su mrlje sa ravnomjerno raspoređenim materijalom koji zauzimaju veliku površinu.

Priprema razmaza iz kultura iz čvrstih hranljivih podloga. U sredinu čistog, dobro podmazanog stakalca stavlja se kap vode, a u nju se ubacuje bakterijska omča sa malom količinom mikrobne kulture koja se proučava, tako da se kap tečnosti blago zamuti. Nakon toga, višak mikrobnog materijala na petlji se spaljuje u plamenu, a razmaz se priprema prema gore opisanoj metodi.

Priprema briseva iz organa i tkiva. U svrhu dezinfekcije, površina organa se kauterizira zagrijanim čeljustima pincete, na tom mjestu se napravi rez i šiljastim makazama iz dubine izreže mali komadić tkiva koji se stavlja između dva stakla. . Zatim postupite na isti način kao i kada pripremate bris od gnoja i sputuma. Ako je tkivo organa gusto, tada se skalpelom vrši struganje iz dubine reza. Materijal dobiven struganjem raspoređuje se u tankom sloju po površini stakla pomoću skalpela ili bakterijske petlje.

Da bi se proučio relativni položaj elemenata tkiva i mikroorganizama u njemu, prave se razmazi otiska prsta. Da bi se to učinilo, mali komadić tkiva izrezan iz sredine organa hvata se pincetom i nekoliko puta uzastopno nanese na reznu površinu na stakalce, čime se dobija niz mrlja-otisaka.

Sušenje i fiksiranje mrlja. Razmaz pripremljen na predmetnom predmetu se suši na vazduhu i fiksira nakon potpunog sušenja. Kada se fiksira, razmaz se fiksira na površini predmetnog stakla, pa se pri naknadnom bojenju preparata mikrobne ćelije ne ispiru. Osim toga, ubijene mikrobne ćelije bolje se boje od živih.

Postoji fizička metoda fiksacije koja se zasniva na dejstvu visoke temperature na mikrobnu ćeliju i hemijske metode koje podrazumevaju upotrebu sredstava koja izazivaju koagulaciju proteina. Nemojte snimati razmazove koji sadrže patogene grupe patogenosti I–II na plamenu.

Fizička metoda fiksacije. Stakalca sa preparatom se uzima pincetom ili prstima I i II desne ruke po rebrima potezom nagore i lagano se pomera 2-3 puta preko gornjeg dela plamena gorionika. Cijeli proces fiksacije ne bi trebao trajati više od 2 sekunde. Pouzdanost fiksacije provjerava se sljedećom jednostavnom tehnikom: na stražnju površinu lijeve ruke nanosi se površina staklenog predmetnog stakla bez mrlja. Kada je bris pravilno fiksiran, staklo treba da bude vruće, ali ne izaziva peckanje.

Metoda hemijske fiksacije. Za fiksiranje mrlja također se koriste hemikalije i spojevi navedeni u Tabeli 4.

Tabela 4.

Supstance za hemijsku fiksaciju

Stakalna pločica sa osušenim razmazom uroni se u bocu sa sredstvom za fiksiranje i zatim se suši na zraku.

Bojenje poteza

Tehnika slikanja premaza. Za bojenje mrlja koriste se otopine boja ili papir za bojenje, kako je predložio A.I. Sinev. Jednostavnost pripreme, jednostavnost upotrebe, kao i mogućnost neograničenog čuvanja papira sa mastilom bili su osnova za njihovu široku upotrebu u različitim metodama bojanja.

Bojenje poteza papirom sa mastilom. Na osušeni i fiksirani preparat nanosi se nekoliko kapi vode, a papiri u boji veličine 2´2 cm moraju ostati vlažni i čvrsto prianjati uz površinu stakla. Prilikom sušenja, papir se dodatno navlaži vodom. Trajanje bojenja razmaza određuje se metodom bojenja. Na kraju bojenja papir se pažljivo uklanja pincetom, a bris se ispere vodom iz slavine i suši na zraku ili filter papirom.

Bojenje mrlja rastvorima boja. Boja se na osušeni i fiksirani preparat nanosi pipetom u tolikoj količini da pokrije cijeli razmaz. Prilikom bojenja mrlja koncentriranim otopinama boja (Ziehl carbol fuchsin, carbolic gentian ili kristalno ljubičasto), bojenje se vrši kroz filter papir koji zadržava čestice boje: traka filter papira se stavlja na fiksni razmaz i na njega se izlije otopina boje. .

Za mikroskopski pregled, pripremljeni razmazi, osušeni i fiksirani, se boje. Bojanje može biti jednostavno ili složeno. Jednostavno farbanje uključuje nanošenje jedne boje na mrlju u određenom vremenskom periodu. Najčešće se za jednostavno bojenje koriste alkohol-voda (1:10) Pfeiffer fuksin, Lefflerovo metilensko plavo i safranin. Eozin, kao i kisela boja, koristi se samo za bojenje citoplazme stanica i nijansiranje pozadine. Kiseli fuksin je potpuno neprikladan za bojenje bakterija.

Kliničko-dijagnostičke bakteriološke laboratorije u bolnicama provode studije neophodne za utvrđivanje ili razjašnjavanje dijagnoze zarazne bolesti, praćenje efikasnosti liječenja.

Specijalizacija bakterioloških laboratorija u bolnicama određena je profilom bolnice (akutne zarazne bolesti, dječje zarazne bolesti, polno prenosive bolesti, tuberkuloza i dr.). Bakteriološke laboratorije pri sanitarno-epidemiološkim stanicama, kao i kliničke laboratorije, bave se dijagnostičkim radom, opslužuju bolnice koje nemaju svoje laboratorije, sprovode preventivne preglede stanovništva i sanitarno-bakteriološke preglede prehrambenih proizvoda i vode.

Pored medicinskih laboratorija, postoji široka mreža veterinarskih bakterioloških laboratorija koje obavljaju dijagnostičke i preventivne studije zaraznih bolesti kod životinja (vidi Veterinarski laboratorij). Bakteriološke laboratorije koje obavljaju kontrolne funkcije su visoko specijalizovane, kao što su, na primer, bakteriološke laboratorije u vodovodima, kontrolne laboratorije u preduzećima koja proizvode vakcine, serume i druge bakterijske preparate. U dezinfekcionim ustanovama organizovane su posebne bakteriološke laboratorije. Njihov zadatak je bakteriološka kontrola kvaliteta izvršene dezinfekcije. Uz bakteriološke laboratorije medicinskog i veterinarskog profila, postoje i specijalizovane bakteriološke laboratorije za potrebe prehrambene industrije (vinarska, pekarska, pivarska i druga preduzeća), poljoprivrede i dr. Za razliku od navedenih bakterioloških laboratorija, koje rješavaju praktične probleme, u sastavu odgovarajućih naučnoistraživačkih instituta imaju bakteriološke laboratorije različitih profila, dizajnirane za rješavanje različitih istraživačkih problema. Bakteriološke laboratorije mogu biti stacionarne i mobilne. Potonji se koriste za sanitarno i protivepidemijsko održavanje vojnih jedinica, kao i u ekspedicijskim i terenskim uslovima (vidi Laboratorija, u vojno-poljskim uslovima). Pored mobilnih, trupe imaju i stacionarne laboratorije. Specifičnost istraživanja koja se provode u bakteriološkim laboratorijama određuje strukturu laboratorija i način rada u njima.

Osnovni zahtjev za bakteriološke laboratorije i proizilazi iz specifičnosti njenog rada je stvaranje uslova koji osiguravaju da se istraživanja obavljaju u najsterilnijim uslovima i garantuju osoblju i drugima od moguće infekcije. Struktura bakteriološke laboratorije uključuje: samu laboratoriju i niz dodatnih jedinica. To uključuje: okoliš, pranje, pripremu, sterilizaciju i vivarij (vidi). Navedeni odjeli, kao samostalne strukturne jedinice, dio su velikih bakterioloških laboratorija. U malim bakteriološkim laboratorijama ne postoji vivarijum i posebna prostorija za pripremu, ali se okruženje i prostorija za sterilizaciju mogu kombinovati u jednoj prostoriji.

Uređaj i oprema

Prostorije bakterioloških laboratorija trebaju biti dovoljno svijetle i prostrane. Zidovi bi trebali biti ofarbani uljanom bojom, a pod ne bi trebao imati pukotine. Prozori laboratorija trebaju biti orijentirani na sjever ili sjeverozapad. Kada su okrenuti prema jugu, prozori su prekriveni bijelim zavjesama. Bakteriološka laboratorija treba da ima umivaonik ili umivaonik, iznad kojeg se na policu stavlja boca rastvora za dezinfekciju ruku. Radni sto bakteriologa, ako je moguće, nalazi se na udaljenosti od 1 m od prozora i prekriven linoleumom ili staklom. Na sto se postavlja plinski gorionik (ako nema plinski gorionik na alkohol). Obavezna oprema za radno mesto je tegla za pipete sa dezinfekcionim rastvorom (3% rastvor karbonske kiseline), zatvorena porculanska ili staklena posuda za vatu, blok - držač za bakterijsku petlju, set bakterijskih standarda, stalci za epruvete , emajl kivete, pincete, makaze i skalpel, čista stakalca sa i bez udubljenja i pokrovna stakalca. Obično se koriste dijapozitivi dimenzija 26 X X 76 mm i debljine 1 - 1,2 mm, pokrivna stakla 18 x 18 ili 20 x 20 mm. Bakteriološka laboratorija treba da bude opremljena metalnim tacnama za nošenje Petrijevih posuda, pocinkovanim kantama ili rezervoarima za odlaganje zaraženog pribora ili opreme. Mikroskop se čuva u kutiji ili ispod staklenog poklopca. Radna površina ne bi trebala biti pretrpana nepotrebnim objektima. Obično je bakteriološka laboratorija opremljena dodatnim malim stolom za bojenje fiksnih preparata. Na takvom stolu nalazi se: set potrebnih boja i reagensa u bloku sa pipetama i gumenim patronama (slika 1), emajlirana kiveta ili kristalizator sa postoljem za preparate, žičana pinceta ili kornet pinceta (slika 2) za fiksiranje staklenih stakala, listova filter papira za uklanjanje tečnosti iz opranih preparata, podloška za pranje (slika 3) ili boca vode. Bakteriološka laboratorija je opremljena raznim staklenim posuđem neophodnim za istraživanja. Pored uobičajene hemijske staklene posude (cilindri, tikvice, čaše, merne pipete i sl.), potrebno je posebno stakleno posuđe namenjeno bakteriološkim i imunološkim analizama: 1) staklene Petrijeve zdjelice koje se koriste za uzgoj bakterija na čvrstim podlogama i dobijanje izolovanih bakterijskih kolonija; 2) bakterijski dušeci (sl. 4) - ravne tikvice (veličine 22 x 17 x 5 cm), koje se koriste za uzgoj velikog broja bakterija; 3) Roux epruvete sa vezom za uzgoj bakterija na jatama krompira; 4) Wassermann epruvete dužine 90 mm i unutrašnjeg prečnika 9-10 mm za izvođenje reakcije fiksacije komplementa i reakcije aglutinacije; 5) precipitacione cevi dužine 90 mm i prečnika 3-5 mm za insceniranje reakcije taloženja; 6) bakterijske epruvete koje se koriste za uzgoj bakterija na čvrstim i tečnim hranljivim podlogama; 7) Pasterove pipete koje se koriste za inokulaciju tečnih materijala, razređivanje tečnosti kapanjem, nanošenje boja itd. ; 8) Mohrove pipete ili pipete sa sfernim proširenjem u srednjem dijelu za inokulaciju zaraženog tečnog materijala, kao i automatske pipete ili pipete sa gumenim sijalicama, koje eliminišu sisanje materijala na usta. Za uzgoj usjeva u tekućim hranjivim podlogama, skladištenje i flaširanje hranljivih podloga, reagensa itd. koristi se obično laboratorijsko stakleno posuđe. Stakleno posuđe koje se koristi u bakteriološkoj laboratoriji mora se prvo isprati, za šta se obično prokuva u 1-2% rastvoru hlorovodonične kiseline. Dezinfekciju bakterioloških posuda u kojima se uzgajaju mikrobi treba provoditi samo na visokoj temperaturi bez upotrebe bilo kakvih dezinficijensa, jer njihovo prisustvo, čak i u obliku tragova, može dodatno inhibirati razvoj mikroba. Inokulacija mikroorganizama u bakteriološkoj laboratoriji vrši se pomoću bakterioloških petlji, staklenih ili platinastih lopatica (sl. 5 i 6). Uzgoj bakterija se vrši u zračnom termostatu (vidi), au velikim bakteriološkim laboratorijama - u posebnim termostatskim prostorijama.

Kada je potrebna precizna kontrola temperature i bakterije se uzgajaju u relativno kratkom vremenskom periodu ili kada se insceniraju imunološke reakcije, zgodno je koristiti vodene ultratermostate. Svaka bakteriološka laboratorija u kojoj proučavaju anaerobe mora biti opremljena anaerostatom (vidi), eksikatorima i vakuum pumpama za uklanjanje zraka. Potonji se također koriste prilikom filtriranja. Za postizanje najboljih aseptičkih uslova potrebnih prilikom inokulacije, izolacije ili ponovnog zasijavanja kultura, bakteriološke laboratorije su opremljene posebnim staklenim kutijama sa pred-boksovima. Kutija sadrži plinski gorionik, posudu sa rastvorom za dezinfekciju i, gde je moguće, baktericidnu uviolnu lampu. U nedostatku stacionarne kutije, pri obavljanju nekih poslova koji zahtijevaju visok stupanj asepse, možete koristiti prijenosnu kutiju za stol (vidi kutije, mikrobiološke).

Bakterijske kulture, terapeutski i dijagnostički serumi, fagi i drugi biološki supstrati (serumi, rastvori peptona i dr.) čuvaju se u frižideru. Bakterijske kulture bi trebalo da se čuvaju u zatvorenim epruvetama ili ampulama, za šta bakteriološke laboratorije moraju imati gorionik za zatvaranje ili običnu puhalicu. Obavezni pribor za svaku bakteriološku laboratoriju je mikroskop (vidi). Za većinu studija koriste se mikroskop MBI-3 i iluminatori. Istraživačke bakteriološke laboratorije opremljene su i fazno-kontrastnim, fluorescentnim i elektronskim mikroskopima. Za kvantitativno brojanje kolonija bakterija uzgojenih na Petrijevim zdjelicama koriste se brojači različitih sistema. Jedan takav brojač je automatski brojač sa uređajem za skeniranje i uređajem za kontrolu televizije koji vam omogućava da izbrojite do 500 šoljica na sat (slika 7). Važni elementi opreme u bakteriološkim laboratorijama su uređaji za mućkanje, koji se koriste u slučajevima kada je potrebno obezbijediti miješanje i mućkanje materijala određeno vrijeme (defibrinacija krvi, homogenizacija materijala i sl.). Za taloženje gustih čestica (mikrobnih ćelija, ćelija tkiva, suspenzije ispitivanog materijala) koje se nalaze u tečnosti, koriste se centrifuge (vidi). Za većinu studija najčešće se koriste centrifuge koje se rotiraju brzinom od 3000 - 3500 o/min. U nedostatku električnih centrifuga, koriste se centrifuge s ručnim pogonom.

Djelatnost bakterioloških laboratorija u velikoj mjeri zavise od ispunjavanja osnovnog zahtjeva – rada u aseptičnim uslovima sa sterilnim predmetima (instrumenti, podloge za kulturu, stakleno posuđe). Stoga oprema za sterilizaciju (vidi) zauzima značajno mjesto u opremanju bakterioloških laboratorija. Svaka bakteriološka laboratorija ima autoklav (vidi), Koch aparat, Pasteurovu peć (vidi Pasteurova peć) i aparat za koagulaciju seruma. Za sterilizaciju ključanjem koriste se konvencionalni sterilizatori (vidi), grijani iz električne mreže ili na neki drugi način.

Za sterilizaciju tekućih supstrata koji se mijenjaju pod utjecajem temperature koriste se bakterijski filteri (vidi). Sušenje navlaženih predmeta (posuđa, instrumenata) nakon sterilizacije parom ili pod pritiskom vrši se u ormarićima za sušenje (vidi). Oprema bakterioloških laboratorija neophodna za pripremu najčešće korišćenih hranljivih podloga, pored navedene opreme, obuhvata i uređaje za punjenje medija, komplete reagensa i stakleno posuđe za obavljanje nekih hemijskih analiza (određivanje aminskog azota, triptofana, hlorida). i dr.), kao i instrumenti i reagensi za određivanje pH okoline; univerzalni indikator, indikatori i Michaelis komparator ili potenciometar.

Rad sa životinjama u bakteriološkim laboratorijama obavlja se u posebnoj prostoriji - vivarijumu. U samim bakteriološkim laboratorijama eksperimenti sa životinjama nisu dozvoljeni. Za obavljanje osnovnih poslova sa životinjama (vađenje krvi, izvođenje bioloških pretraga, dijagnostičke reakcije i sl.), morate imati: vagu za vaganje miševa, svinja i zečeva, mašine ili uređaje za njihovo fiksiranje (Sl. 8), komplet špricevi, brojevi za oznake životinja (ili boje), depilatori.

Besplatni pravni savjeti:

Specifičnost bakteriološkog rada određuje posebno visoke zahtjeve za čistoćom prostorija bakterioloških laboratorija. Od posebnog značaja je čistoća vazduha i odsustvo prašine u njemu. Prostorije bakterioloških laboratorija je bolje očistiti na kraju radnog dana ili nekoliko sati prije početka rada, jer prašina koja se diže u zrak tokom čišćenja povećava sadržaj mikroba u njemu i otežava sterilan rad. Preporučljivo je nakon čišćenja prostorija prije rada zračiti ih uviol baktericidnim lampama u trajanju od 0,5-1 sat. Da bi se spriječila unutarlaboratorijska kontaminacija i mogućnost širenja infekcije pri radu u bakteriološkim laboratorijama, moraju se poštovati sljedeća osnovna pravila: 1) sve osobe u laboratoriji moraju nositi ogrtače; 2) nepotrebno pričanje i hodanje nisu dozvoljeni; 3) svaki zaposleni mora da koristi samo radno mesto koje mu je dodeljeno; 4) je zabranjeno jesti i pušiti u bakteriološkoj laboratoriji; 5) pri radu sa infektivnim materijalom morate koristiti alat (pincete, igle, kuke) i ni u kom slučaju ga ne dodirivati ​​rukama; sva oprema koja je bila u kontaktu sa zaraznim materijalom mora biti sterilizirana ili uništena; 6) kod usisavanja tečnog materijala preporučuje se upotreba gumenih sijalica; pipete moraju biti zatvorene pamučnim čepovima; 7) transfuzija zaraženih tečnosti iz posude u posudu vrši se preko tacne ili kristalizatora napunjenog dezinfekcionom tečnošću; 8) svi poslovi u vezi sa setvom, ponovnim zasejavanjem, izolovanjem kultura i pripremanjem preparata od zaraženog materijala izvode se na gorioniku, spaljivanjem ivica epruveta, petlji, lopatica i sl.; 9) epruvete, tikvice, boce i sl., u koje se u toku rada stavlja zaraženi materijal, odmah se označavaju sa naznakom prirode materijala, naziva i broja kulture i datuma; 10) ako zarazni materijal dospije na okolne predmete, potrebno je odmah izvršiti temeljnu dezinfekciju: popuniti prostor dezinfekcionim rastvorom, a zatim ga, ako je moguće, spaliti tamponom zapaljenog alkohola; 11) predmeti i materijali zaraženi tokom rada se evidentiraju, sakupljaju u rezervoare ili kante, zatvaraju, zatvaraju i sterilišu istog dana; 12) kulture se po potrebi čuvaju u agar kolonama pod uljem u zatvorenim epruvetama sa etiketama; 13) evidentiranje i evidentiranje svih useva, kao i životinja zaraženih tokom rada, vodi se u dnevnik na posebnom obrascu.

Bibliografija: Meynell D. i Meynell E. Eksperimentalna mikrobiologija, trans. iz engleskog, M., 1967, bibliogr.; Timakov V. D. i Goldfar b D. M. Osnove eksperimentalne medicinske bakteriologije, M., 1958; F l όρη n s k i y A. V. Nove tehničke metode laboratorijskih istraživanja, M., 1954; Metode identifikacije za mikrobiologiju, ur. od W. M. Gibbsa a. F. A. Skinner, v. 1 - 2, L.-N.Y., 1966-1968.

Sanitarne i bakteriološke laboratorije i njihova oprema

Sanitarne i bakteriološke laboratorije su dio SES-a kao samostalne strukturne jedinice. Osim toga, u pravilu se organiziraju sanitarne i mikrobiološke laboratorije za istraživanje vode, smještene u blizini velikih rezervoara i postrojenja za prečišćavanje.

Predmeti istraživanja u sanitarnim i bakteriološkim laboratorijama su:

• voda - voda za piće, otvoreni rezervoari, otpadne vode;
• vazdušno-operacione sale, porodilišta, jaslice, bolnička odeljenja, apoteke, kao i vrtići, škole, bioskopi i drugi slični prostori;
• lijekovi za injekcije, kapi za oči, destilirana voda iz ljekarni;
• zemljište prilikom izgradnje dječijih ustanova, komunalnih objekata, nekih drugih objekata i za epidemiološke indikacije;
• Hirurški materijal za sterilitet;
• prehrambeni proizvodi za trovanje hranom;
• predmeti za domaćinstvo, inventar, oprema javnih ugostiteljskih objekata, privrednih objekata i ruke osoblja navedenih preduzeća.

Sanitarno-bakteriološki laboratorij se sastoji od nekoliko prostorija: prostorija za bakteriološka istraživanja; Mediji za pripremu i flaširanje hranjivih podloga; autoklav, u kojem se vrši sterilizacija medija za uzgoj i dezinfekcija staklenog posuđa i otpadnog materijala (autoklavi moraju biti odvojeni i označeni); prostorija za pranje posebno opremljena za pranje laboratorijskog staklenog posuđa; prostorija za odlaganje posuđa, suhih hranljivih podloga i sl.; vivarij za držanje laboratorijskih životinja (izgrađen odvojeno od laboratorije ili smješten u podrumu); recepcija za polaganje testova, kancelarija upravnika.

Besplatni pravni savjeti:

Laboratorijske prostorije za izvođenje bakterioloških studija moraju biti prostrane - svako radno mjesto mora imati 7,5 m2. Prostoriji je dodijeljen prostor za jednu ili dvije zastakljene plafonske kutije sa predbokserskim površinama, u kojima se izvode radovi koji zahtijevaju aseptične uvjete. U kutije moraju biti ugrađene germicidne lampe. Orijentacija laboratorijskih prozora je poželjno sjeverna, što osigurava ujednačeno osvjetljenje tokom cijelog radnog dana. Zidovi su ofarbani svetlim uljanim bojama ili popločani do visine od 1,5-1,7 m. Pod je obložen linoleumom. Stolovi bakteriologa su obloženi plastikom ili ofarbani laganim emajlom kako bi se mogli tretirati dezinficijensima na radnom mjestu svakog zaposlenika mora biti sve što je potrebno za svakodnevni rad: bakterijska omča, stalak za epruvete, staklo i naočale za pokrivanje. set boja, instalacija za preparate za bojenje i pranje, ulje za potapanje, isečeni komadi filter papira dimenzija 2x3 mm, tegle sa dezinfekcionim rastvorom, Pasteur i graduirane pipete (1, 2, 5 i 10 ml), lopatice, pincete, makaze, skalpel, sterilne epruvete, staklo za olovke, plinski ili alkoholni plamenik, mikroskop sa imersionom sočivom.

Pravila i način rada. U sanitarnim i bakteriološkim laboratorijama primjećuje se isti režim rada kao iu drugim mikrobiološkim laboratorijama gdje rade sa infektivnim materijalom. Također treba imati na umu da ne postoji oštra granica između patogenosti i nepatogenosti mikroorganizama. Primjer za to je sve veća uloga oportunističkih mikroorganizama u ljudskoj patologiji, posebno u etiologiji bolničkih infekcija. Iz toga proizlazi da se sa svim bakterijama mora postupati kao sa potencijalnim izvorom opasnosti po ljudsko zdravlje. Stoga se svi zaposleni moraju pridržavati pravila koja osiguravaju sterilnost u radu, eliminišući mogućnost intralaboratorijskih infekcija, razvoja alergija među osobljem i širenja patogenih bakterija van laboratorije.

1. Rad se izvodi u posebnoj odjeći (ogrtač, kapa ili marama). Preporučljivo je nositi posebno donje rublje i haljinu u laboratoriju i ne nositi ovu odjeću izvan laboratorije.

2. Zabranjeno je ulazak u laboratoriju bez ogrtača, izlazak van laboratorije u njoj i oblačenje vanjske odjeće preko ogrtača.

3. Vrata laboratorije moraju biti zatvorena.

Besplatni pravni savjeti:

4. U prostorijama laboratorije zabranjeno je čuvati strane predmete, jesti hranu i pušiti.

5. Sve manipulacije (zasijavanje, otvaranje ampula, obrada materijala, filtriranje, centrifugiranje, itd.) moraju se izvoditi pažljivo, izbjegavajući stvaranje aerosola.

6. Zabranjeno je usisavanje rastvora pipetom u usta, potrebno je koristiti posebne uređaje: sfernu sijalicu, klipne pumpe ili druge uređaje koji sprečavaju ulazak klica u usta.

7. Po završetku posla zaposleni čiste svoje radno mesto i dezinfikuju površinu stola. Nepotreban zarazni materijal i kontaminirani pribor se steriliziraju. Pipete i otpadno staklo stavljaju se u tegle sa dezinfekcionim rastvorom. Novo inokulirane epruvete i čaše stavljaju se u termostat i zatvaraju. Frižideri u kojima se čuvaju patogeni mikroorganizmi su takođe zapečaćeni. Na kraju rada ruke se dezinfikuju i peru sapunom.

8. U dnevnike odobrenog obrasca, prethodno uvezane, sa numerisanim stranicama, evidentira se materijal, vodi evidencija izolovanih mikrobnih kultura i zaraženih životinja. Spisak radnih časopisa: a) dnevnik registracije materijala primljenih za istraživanje; b) dnevnik odabranih usjeva i njihovo uništenje; c) dnevnik kretanja usjeva i zaraženih životinja; d) knjiga inventara muzejskih kultura; e) dnevnik autoklaviranja infektivnog materijala.

Besplatni pravni savjeti:

9. U slučaju nesreće u laboratoriji (prosipanje tečnosti koja sadrži infektivni materijal ili razbijanje posude) vrši se dezinfekcija. Ostaci posude se zgrabe pincetom i urone u teglu s dezinfekcijskim rastvorom, površina kontaminiranog ogrtača i ruku tretira se etil alkoholom ili kloraminom.

Laboratorija se svakodnevno mokro čisti pomoću dezinfekcionih rastvora (1-5% rastvor fenola ili 1-5% rastvor hloramina).

Rad u sanitarno-bakteriološkim laboratorijama izvodi se sa potencijalno infektivnim materijalom za ispitivanje (otpadne vode, zemljište, prehrambeni proizvodi za trovanje hranom itd.) i sa izolovanim patogenim kulturama. Prema sovjetskom zakonodavstvu, svi mikroorganizmi patogeni za ljude podijeljeni su u 5 grupa ovisno o stupnju opasnosti za ljude, uzimajući u obzir savremene naučne podatke o etiologiji, kliničkoj slici, prevenciji i liječenju zaraznih bolesti.

Grupa I. Agent kuge

Grupa II. Uzročnik kolere, antraksa, tularemije, bruceloze, leptospiroze, žlijezde, melioidoze; uzročnici gljivičnih bolesti - histoplazmoza; biološki otrovi - botulinum toksin tipovi A, B, E, P.

Besplatni pravni savjeti:

III grupa. Uzročnici crijevnih infekcija - trbušni tifus, dizenterija; uzročnici tuberkuloze, difterije; uzročnici gljivičnih bolesti - aktinomikoza, blastomikoza, dermatomikoza; atenuirani sojevi bakterija grupa I-III.

IV grupa. Uzročnici toksičnih infekcija i akutnog trovanja bakterijama (salmonela, stafilokok, vibrio, klostridija, itd.), enteritisa - Escherichia itd.

V grupa. Mikroflora sluzokože i kože zdrave osobe, sanitarni indikatorski mikroorganizmi (ešerihije, enterokoki itd.).

Prilikom sanitarnog i bakteriološkog pregleda objekata životne sredine češće se određuju bakterije III grupe.

Besplatni pravni savjeti:

Bakteriološki laboratorij, njegova struktura i namjena - Mikrobiologija sa mikrobiološkim tehnikama istraživanja

Za obavljanje mikrobioloških studija postoje bakteriološke laboratorije u bolnicama i klinikama ili nezavisno od njih. Za istraživanje dobijaju razni materijal dobijen od bolesnih ljudi (sputum, urin, gnoj, izmet, krv, likvor itd.). Pored toga, postoje i sanitarne i bakteriološke laboratorije u kojima se voda, vazduh i prehrambeni proizvodi podvrgavaju bakteriološkoj kontroli.

Uloga bakterioloških laboratorija velika je i u prevenciji zaraznih bolesti. Neki ljudi nakon zarazne bolesti (tifusna groznica, dizenterija, difterija itd.) nastavljaju da ispuštaju patogene mikrobe u okolinu. To su takozvani prenosioci bakterija. Nosioci bakterija se nalaze i među zdravim ljudima. Identificiranjem takvih nositelja bakterija, bakteriološke laboratorije pomažu zdravstvenim vlastima u provedbi niza preventivnih mjera.

Voda i prehrambeni proizvodi kontaminirani patogenim mikroorganizmima mogu izazvati epidemije (masovne bolesti) trbušnog tifusa, kolere i dr., zbog čega je svakodnevna sanitarna i bakteriološka kontrola kvaliteta vode za piće, mlijeka i drugih proizvoda toliko važna.

Bakteriološka laboratorija mora imati na raspolaganju najmanje tri prostorije: 1) malu prostoriju - prostoriju za prijem i izdavanje testova; 2) srednje kuvanje i pranje - za pripremu hranljivih materija i pranje posuđa; 3) laboratorija za bakteriološka istraživanja. Preporučljivo je imati prostoriju za držanje pokusnih životinja (vivarijum). Svaka prostorija treba imati odgovarajući namještaj (kuhinjski i laboratorijski stolovi, razni ormari, taburei i sl.).

U nastavku slijedi lista najvažnijih predmeta potrebnih u svakodnevnom laboratorijskom radu. Svrha njihove upotrebe, način rukovanja njima, kao i princip njihovog dizajna opisani su u odgovarajućim odjeljcima kursa.

Optički uređaji. Biološki mikroskop sa imerzionim sistemom, povećala, aglutinoskop.

Besplatni pravni savjeti:

Uređaji za sterilizaciju i grijanje. Autoklav, aparat za fluidnu paru, orman za sušenje, Seitz filteri, termostati, sterilizatori za instrumente.

Oprema za kuvanje medija. Lijevak za vruće filtriranje, lijevak za sipanje medija, vodeno kupatilo, lonci različitih veličina, tarirane vage sa utezima, mlin za meso, metalni i drveni stalci za filtriranje.

Alati. Skalpeli raznih oblika i tipova: makaze, ravne, zakrivljene, tupog vrha, crevne makaze, anatomske i hirurške pincete, špricevi.

Stakleni predmeti. Stakalne čaše, predmetna stakalca sa bunarčićem, pokrovne stakalce, bakteriološke epruvete, kratke epruvete za serološke reakcije (aglutinacija), centrifuge, Heidepreichove posude*, staklene epruvete i štapići, graduirane pipete od 1, 2, 5, 10 ml, Pasteurove pipete, staklo boce za farbanje sa pipetama, staklene čaše i tikvice različitih veličina, cilindri različitih veličina, lijevci za filtriranje itd.

*Do sada se kod većine mikrobiologa i u udžbenicima posude za dobijanje izolovanih kolonija mikroba nazivaju Petrijeve, a ne Heidenreichove posude, što ne odgovara pravom stanju stvari. Čaše je prvi u laboratorijsku praksu uveo ruski mikrobiolog Heidenreich.

Besplatni pravni savjeti:

Razni predmeti. Bakterijska petlja, platinasta žica, gumene cijevi, ručne rogaste vage sa utezima, stalci (drveni, metalni) za epruvete, termometri, kavezi za životinje, uređaji za fiksiranje životinja, centrifuga.

Hemikalije, boje, materijali za podloge, itd. Agar-agar, želatina, bela u listovima, ulje za potapanje, filter papir, upijajuća i obična vata, gaza, etil alkohol, anilinske boje (magenta, gentian i kristal violet, vesuvin, metilen plava, neutralna rot, safranin, itd.), Giemsa boja, kiseline (dušična, hlorovodonična, sumporna, karbonska, fosforna, pikrinska, oksalna, itd.), lužine (kaustični kalij, kaustična soda, amonijak, soda), soli (kalijev nitrat , kalijum permanganat, natrijum sulfid, natrijum hlorid, itd.).

Laboratorijski sto

Za obavljanje mikrobioloških istraživanja, laboratorijski asistent mora imati odgovarajuće opremljeno radno mjesto. Laboratorijski sto mora imati određenu visinu kako bi se mogao lako mikroskopirati dok sedi za njim (slika 9). Ako je moguće, stol treba prekriti linoleumom, a svako radno mjesto prekriti pocinčanim tacnom ili ogledalom. Radno mesto treba da bude opremljeno mikroskopom, postoljima za epruvete i boje, platinskom petljom i iglom za inokulaciju, šoljom sa mostom za preparate, peračem, peščanim satom, dijapozitivima i pokrivnim čašama, pipetama, kompletom boja, filter papir, alkoholni ili plinski plamenik i tegla sa rastvorom za dezinfekciju (lizol, karbonska kiselina, sublimat, hloramin ili lizoform), u koju se stavljaju upotrebljena stakalca i pokrovna stakla, pipete, staklene šipke i sl. za dezinfekciju mikrobi koji se uzgajaju ne mogu se dezinfikovati hemikalijama. Tragovi dezinficijensa na takvom posuđu ga kasnije čine neprikladnim za rast i razmnožavanje mikroorganizama. Nakon upotrebe posuđe se stavlja u metalne rezervoare ili kante sa poklopcem, zatvara i steriliše u autoklavu. Nakon upotrebe, mali instrumenti (pincete, skalpeli, makaze) stavljaju se u sterilizator i kuhaju 30-60 minuta ili potapaju u 3-5% sapunsko-karbonski rastvor hloramina 30-60 minuta.

Rice. 9. Tehnika mikroskopije bakterioloških objekata.

Radno mesto mora biti potpuno čisto. Neprihvatljivo je da stol bude kontaminiran infektivnim materijalom koji se ispituje (urinom, fecesom, gnojem itd.). U potonjem slučaju, infektivni materijal sa stola može se proširiti na druge okolne objekte i tada je moguća intralaboratorijska infekcija. Po završetku rada, laboratorijski asistent mora urediti radno mjesto za koje je odgovoran, a radi prevencije obrisati staklo na radnom mjestu komadom vate navlaženim u 5% otopini karbonske kiseline ili hloramina.

Besplatni pravni savjeti:

Prilikom rada sa infektivnim materijalom, laboratorijski radnici moraju imati na umu mogućnost da se i sami zaraze i prenesu zaraznu bolest u svoju porodicu, stan i sl. Stoga moraju biti pažljivi, pažljivi, uredni i pedantni u radu.

Prilikom rada u laboratorijama potrebno je poštovati sljedeća pravila:

1. Obavezno je biti u laboratoriji, a još više raditi u njoj, u ogrtaču i marami ili kapu.
2. Ne prelazite iz jedne laboratorijske prostorije u drugu bez potrebe i koristite samo predviđeno radno mjesto i opremu.
3. Nemojte jesti niti pušiti u laboratoriji.
4. Pri radu sa zaraznim materijalom i živim kulturama koristiti odgovarajući alat: pincete, kuke, lopatice i druge predmete koji se nakon upotrebe moraju uništiti ili učiniti neškodljivima (spaljivanje na plamenu plamenika, ključanje i sl.). Tečni infektivni materijal isisati u pipete ne ustima, već uz pomoć balona, ​​sijalica, tečnost sa infektivnim materijalom preliti iz jedne posude u drugu samo preko nekog prijemnika (tacne, posude) u koji se unosi dezinfekciona tečnost (rastvor karbonske kiseline, Lisol) se sipa. Sjetva i ponovno zasijavanje vrši se spaljivanjem epruveta, lopatica, platinastih petlji, pipeta i sl. na plamenu plamenika.
5. Ako se posuđe razbije ili se prolije tekućina koja sadrži zarazni materijal ili žive kulture, odmah temeljito dezinficirajte kontaminirani radni prostor, haljinu i ruke. Sve ovo treba raditi u prisustvu ili pod nadzorom rukovodioca laboratorije, koji mora biti odmah obaviješten o nesreći.
6. Ako je moguće, uništite sve korištene i nepotrebne predmete i materijal (najbolje ih je spaliti ili temeljito neutralizirati u mašinama za sterilizaciju ili tečnostima za dezinfekciju).

Sve predmete koji se dezinfikuju prikupiti unutar laboratorije u posebne prijemnike, rezervoare, kante sa poklopcima i sl. i zatvoriti preneti u autoklav, gde će istog dana biti dezinfikovani. Dostavljanje infektivnog materijala u autoklav i njegovu sterilizaciju moraju nadgledati posebno određeni odgovorni laboratorijski radnici.

1. Održavajte strogu čistoću i urednost. Dezinfikujte i perite ruke što je češće moguće tokom radnog dana i nakon završetka posla.
2. Laboratorijski radnici podliježu obaveznoj vakcinaciji protiv teških zaraznih bolesti (prvenstveno protiv crijevnih bolesti).
3. Obavezno je voditi dnevnu kvantitativnu evidenciju svih živih usjeva i zaraženih životinja sa upisima u posebne dnevnike i knjigovodstvene knjige.
4. Po završetku rada sav materijal i kulture neophodan za dalji rad ostaviti u zaključanom frižideru ili sefu, a radno mesto dovesti u potpuni red.
5. Svakodnevno temeljno čišćenje laboratorijskih prostorija mora se obavljati mokro pomoću tečnosti za dezinfekciju.

Bakteriološka laboratorija u sanitarno-epidemiološkoj stanici br. 1 Moskve

Naziv organizacije Bakteriološka laboratorija u sanitarno-epidemiološkoj stanici br. 1 Moskve Moskva - telefonske adrese i službena web stranica kompanije

Besplatni pravni savjeti:

Zvanična web stranica organizacije Bakteriološka laboratorija u Sanitarnoj i epidemiološkoj stanici br. 1 u Moskvi - http://sanapedemstation.rf Prikaži stranicu

Bakteriološka laboratorija u sanitarno-epidemiološkoj stanici br. 1 moskovske adrese- Moskva, Yaroslavskoe Shosse, 9, Moskva, Rusija Prikaži adresu Sve adrese organizacije

Način rada- raspored rada dnevno, 24 sata dnevno. Prikaži radno vrijeme

Bakteriološka laboratorija u sanitarno-epidemiološkoj stanici br. 1 moskovskog moskovskog telefona- broj telefona, Prikaži telefon

Besplatni pravni savjeti:

(Unesite naziv vaše organizacije prije ažuriranja)

Bakteriološka laboratorija

Opće informacije

Bakteriološke laboratorije kao samostalne strukturne jedinice organizovane su pri sanitarno-epidemiološkim stanicama (SES), u infektivnim bolnicama, opštim bolnicama, nekim specijalizovanim bolnicama (npr. za tuberkulozu, reumatologiju, kožne i venerične bolesti) i u klinikama.

Bakteriološke laboratorije SES-a ispituju objekte životne sredine na opštu bakterijsku kontaminaciju, kao i kontaminaciju objekata životne sredine uslovno patogenom i patogenom mikroflorom: vazduh, voda, zemljište, hrana; vršiti preglede organizovanih grupa i pojedinaca na prenos patogenih bakterija crevne grupe, korinebakterije difterije, velikog kašlja, parapertusisa, meningokoka. Rad mikrobiološke laboratorije u saradnji sa drugim odeljenjima SES-a ima specifičan zadatak – unapređenje životne sredine i smanjenje incidencije stanovništva.

Besplatni pravni savjeti:

Bakteriološke laboratorije u medicinskim ustanovama obavljaju pretrage neophodne za utvrđivanje i pojašnjenje dijagnoze zarazne bolesti, omogućavajući pravilan izbor specifičnog lečenja i određivanje vremena otpuštanja pacijenta iz infektivne bolnice. Predmeti istraživanja u bakteriološkim laboratorijama su:

• iscjedak iz ljudskog tijela: urin, izmet, sputum, gnoj, kao i krv, likvor i kadaverični materijal;
• objekti životne sredine: voda, vazduh, tlo, hrana, ispiranje sa opreme, ruku itd.

Prostorije bakteriološke laboratorije i oprema radnog mjesta

Specifičnosti mikrobiološkog rada zahtijevaju da prostorija namijenjena laboratoriji bude izolirana od bolničkih odjela, dnevnih soba i prehrambenih jedinica. Bakteriološka laboratorija obuhvata: laboratorijske prostorije za bakteriološka istraživanja i pomoćne prostorije; autoklav ili sterilizacija za dezinfekciju otpadnog materijala i kontaminiranog pribora; praonica opremljena za pranje suđa; Kuhalo za medije za pripremu, punjenje, sterilizaciju i čuvanje hranjivih podloga; vivarij za držanje pokusnih životinja; materijal za skladištenje rezervnih reagensa, posuđa, opreme i kućne opreme.

Navedene pomoćne prostorije, kao samostalne strukturne cjeline, dio su velikih bakterioloških laboratorija. U malim laboratorijama prostorije za pripremu i sterilizaciju su kombinovane u jednoj prostoriji; Ne postoji posebna prostorija za držanje pokusnih životinja.

Najsvjetlije, najprostranije prostorije dodijeljene su laboratorijskim prostorijama u kojima se provode sve bakteriološke studije. Zidovi u ovim prostorijama, na visini od 170 cm od poda, ofarbani su u svijetle boje uljanom bojom. Pod je obložen relinom ili linoleumom. Ova vrsta završne obrade omogućava vam korištenje dezinfekcijskih otopina prilikom čišćenja prostorije.

Svaka prostorija treba da ima umivaonik sa tekućom vodom i policu za flašu dezinfekcionog rastvora.

Besplatni pravni savjeti:

Jedna od prostorija je opremljena staklenom kutijom sa predboksom za obavljanje radova u aseptičnim uslovima. U kutiju se postavlja sto za setvu i stolica, a iznad radnog mesta montirane su baktericidne lampe. U pretprostoru je postavljen ormar za čuvanje sterilnog materijala. Laboratorijska prostorija je opremljena laboratorijskim stolovima, ormarićima i policama za odlaganje opreme, pribora, boja i reagenasa neophodnih za rad.

Pravilna organizacija radnog mjesta ljekara - bakteriologa i laboratorijskog asistenta je veoma važna za rad. Laboratorijski stolovi su postavljeni u blizini prozora. Kada ih postavljate, treba nastojati da svjetlo pada ispred ili sa strane osobe koja radi, po mogućnosti s lijeve strane, ali ni u kojem slučaju s leđa. Preporučljivo je da prostorije za analizu, posebno za mikroskopiju, imaju prozore orijentisane na sjever ili sjeverozapad, jer je za rad neophodna jednaka difuzna svjetlost. Površinska osvetljenost stolova za rad treba da bude 500 luxa. Radi lakše dezinfekcije, površina laboratorijskih stolova je prekrivena plastikom, a svako radno mjesto na njoj je prekriveno ogledalom.

Svakom radniku laboratorije dodijeljeno je posebno radno mjesto površine 150x60 cm. Sva radna mjesta su opremljena predmetima neophodnim za svakodnevni rad.

Pravila rada i ponašanja u laboratoriji

Značajka bakteriološkog rada je stalni kontakt laboratorijskog osoblja sa infektivnim materijalom, kulturama patogenih mikroba, zaraženim životinjama, krvlju i izlučevinama pacijenta. Stoga su svi zaposleni u bakteriološkoj laboratoriji dužni da se pridržavaju sljedećih pravila rada, koja osiguravaju sterilnost u radu i sprječavaju mogućnost intralaboratorijskih infekcija:

1. U prostorije bakteriološke laboratorije ne možete ući bez posebne odjeće – ogrtača i bijele kape ili marame.
2. Ne smijete unositi strane predmete u laboratoriju.
3. Zabranjeno je izlaziti iz laboratorije u mantilima ili stavljati ogrtač preko ogrtača.
4. U prostorijama bakteriološke laboratorije strogo je zabranjeno pušiti, jesti i čuvati prehrambene proizvode.
5. Sav materijal koji ulazi u laboratorij mora se smatrati kontaminiranim.
6. Prilikom raspakivanja poslanog infektivnog materijala potrebno je voditi računa: tegle sa materijalom za istraživanje po prijemu se prebrišu vani dezinfekcionim rastvorom i ne postavljaju direktno na sto, već na tacne ili u kivete.
7. Transfuzija tečnosti koja sadrži patogene mikrobe vrši se preko posude napunjene dezinfekcionim rastvorom.
8. Svaka nezgoda koja uključuje stakleno posuđe koje sadrži zarazni materijal ili prolivanje tečnog zaraznog materijala mora se odmah prijaviti šefu laboratorije ili njegovom zamjeniku. Mjere dezinfekcije dijelova tijela, predmeta na radnom mjestu i površina kontaminiranih patogenim materijalom za odjeću sprovode se odmah.
9. Prilikom proučavanja infektivnog materijala i rada sa patogenim mikrobnim kulturama potrebno je striktno pridržavati se općeprihvaćenih tehničkih tehnika u bakteriološkoj praksi koje isključuju mogućnost kontakta ruku sa infektivnim materijalom.
10. Zaraženi materijal i nepotrebni usjevi moraju se uništiti, ako je moguće, istog dana. Alati koji se koriste u radu sa infektivnim materijalom se odmah nakon upotrebe dezinfikuju, kao i površina radnog mesta.
11. Prilikom obavljanja bakterioloških radova morate strogo pratiti čistoću ruku: nakon završetka rada sa zaraznim materijalom, one se dezinficiraju. Na kraju dana radno mjesto se sređuje i temeljno dezinficira, a infektivni materijal i mikrobne kulture neophodne za daljnji rad pohranjuju se u zaključani frižider ili sef.
12. Radnici bakterioloških laboratorija podliježu obaveznoj vakcinaciji protiv onih zaraznih bolesti čiji se uzročnici mogu naći u predmetima koji se proučavaju.

Čišćenje laboratorijskih prostorija

Mikrobiološki laboratorij mora biti čist. Higijensko čišćenje laboratorijskih prostorija treba provoditi redovno. Veoma je teško osigurati potpunu sterilnost laboratorije i nije uvijek potrebno, ali je moguće značajno smanjiti broj mikroorganizama u zraku i na raznim površinama u laboratorijskim prostorijama. To se postiže praktičnom primjenom metoda dezinfekcije, odnosno uništavanjem uzročnika zaraznih bolesti u objektima okoliša.

Besplatni pravni savjeti:

Pod, zidovi i namještaj u mikrobiološkoj laboratoriji se usisavaju i brišu raznim dezinfekcijskim otopinama. Usisavanje osigurava da se predmeti oslobode prašine i da se iz njih ukloni značajan broj mikroorganizama. Utvrđeno je da se četkom usisivača 4 puta po površini predmeta uklanja oko 47% mikroorganizama, a kada se prođe 12 puta do 97%. Najčešći rastvori za dezinfekciju su 2-3% rastvor sode (natrijum bikarbonat) ili Lysol (fenol preparat sa dodatkom zelenog sapuna), 0,5-3% vodeni rastvor hloramina i neka druga dezinfekciona sredstva.

Vazduh u laboratoriji najlakše se dezinfikuje ventilacijom. Dugotrajno provjetravanje prostorije kroz prozor (najmanje nekoliko minuta) dovodi do naglog smanjenja broja mikroorganizama u zraku, posebno kada postoji značajna razlika u temperaturi između vanjskog zraka i zraka prostorije. Efikasnija i najčešće korišćena metoda dezinfekcije vazduha je zračenje UV zracima talasne dužine od 200 do 400 nm. Ove zrake imaju visoko antimikrobno djelovanje i mogu uzrokovati smrt ne samo vegetativnih stanica, već i mikrobnih spora.

Književnost

• "Mikrobiologija s tehnologijom mikrobiološkog istraživanja" Labinskaya.

• Wikifikujte članak.
• Ispravite članak prema stilskim pravilima Wikipedije.
• Pronađite i uredite u obliku fusnota linkove na autoritativne izvore koji potvrđuju napisano.
• Dodajte ilustracije.
• Kreirajte interwikije u okviru Interwiki projekta.

Wikimedia fondacija. 2010.

Pogledajte šta je "Bakteriološka laboratorija" u drugim rječnicima:

Laboratorija - 1) obrazovna, naučna, praktična, proizvodna ustanova ili odjeljenje te ustanove, preduzeća, koje vrši eksperimentalna, kontrolna ili analitička istraživanja; 2) prostoriju u kojoj se ove studije izvode. U... ... Mikrobiološkom rječniku

bakteriološka laboratorija - laboratorija u sastavu sanitarno-epidemiološke stanice ili kliničko-dijagnostičke laboratorije, namijenjena za provođenje mikrobioloških (bakterioloških, imunoloških i dr.) studija u cilju identifikacije patogena, razjašnjavanja dijagnoze i ... Veliki medicinski rječnik

Istraživačka laboratorija - Ovaj članak ili odjeljak treba revidirati. Molimo da poboljšate članak u skladu sa pravilima za pisanje članaka. Naučno-istraživačka laboratorija Laboratorija za izvođenje eksperimenata i naučnih istraživanja od strane naučnika i... ... Wikipedia

Besplatni pravni savjeti:

baklab - bakteriološka laboratorija ... Rječnik ruskih skraćenica

bakteriološka laboratorija ... Rječnik skraćenica ruskog jezika

baklabor - bakteriološka laboratorija ... Rječnik ruskih skraćenica

INSTITUCIJE - naučnoistraživačke ustanove koje se bave posebnim razvojem naučnih problema i vode naučnoistraživačke i istraživačke delatnosti u relevantnim oblastima. Zadatak je naučno istražen. I. je udruženje naučnih. sile oko određenih problema... Velika medicinska enciklopedija

Pokretna vozila i kompleksi za medicinske svrhe su posebno projektovane vrste sanitetskog prevoza ili vozila prilagođena za pružanje medicinske i sanitarne nege, prevoz bolesnika, povređenih, medicinskog osoblja i medicinske opreme. Na glavne vrste ... ... Medicinska enciklopedija

Besplatni pravni savjeti:

Mišji tifus - Prof. Loeffler je 1892. opisao epizootiju koju je uočio u Greifswaldu među bijelim miševima namijenjenim raznim eksperimentima. Uzročnik ove epizootike tokom istraživanja ispostavilo se da je specifičan mikroorganizam, koji su Leffler i... ... Enciklopedijski rječnik F.A. Brockhaus i I.A. Efron

Medicinske laboratorije su ustanove zdravstvenog sistema ili strukturne jedinice medicinsko-preventivnih ili sanitarnih ustanova namijenjene za obavljanje različitih medicinskih istraživanja. Ova grupa ne uključuje naučnu... ... Medicinsku enciklopediju

Knjige

• Bakteriološka laboratorija, Jesse Russell. Ova knjiga će biti proizvedena u skladu sa vašom narudžbom koristeći tehnologiju Print-on-Demand. Visokokvalitetni sadržaj WIKIPEDIJA članaka! Bakteriološke laboratorije kao nezavisne… Pročitajte višeKupite za 743 RUR

Koristimo kolačiće kako bismo vam pružili najbolje iskustvo na našoj web stranici. Nastavkom korištenja ove stranice, slažete se s ovim. U redu