Бактериологическое исследование кала на кишечные инфекции. Один из самых эффективных методов для диагностики половых инфекций — бактериологический посев

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ , ыи- кробиологич. анализ, служит для обнаружения различного рода микроорганизмов и определения их вида в подлежащем обследованию материале (в почве, воде, продуктах разного рода, отделениях животных и т. д.); состоит в изучении биологии микроба (его морфологических, биолог, и иммунологических свойств), а для патогенных микробов также и в определении их способности вызывать у экспериментальных животных специ-фич. пат. процессы. Изучение морфологии микробов производится при помощи микроскопа, для чего материал, подлежащий обследованию, подвергается предварительной обработке с тем, чтобы сделать микробов ясно видимыми среди неорганизованного распада, в к-ром они обычно находятся. Достигается это окрашиванием препаратов из исследуемого материала различными естественными или искусственными красками. Так как мертвые микробы окрашиваются 6»1 лучше, то препараты предварительно подвергаются т. н. фиксированию, т. е. обработке разного рода физич. и хим. агентами, быстро убивающими протоплазму-■ жаром, спиртом и т. д. Иногда материал микроеко-пируется и без предварит, обработки, когда требуется по ходу анализа изучение под микроскопом живых микробов (наблюдение подвижности их, отношения к О и пр.). В таких случаях приготовляется препарат в виде т. н. висячей капли. Наблюдение ведется или обычным способом или при затемненном поле зрения микроскопа. При исследовании на присутствие Protozoa весь анализ ограничивается одним микроскопированием, что считается достаточным, т. к. методы культивирования протозоа очень сложны и в широкую практику еще не вошли. В бактериологии анализ не останавливается на изучении формы микроба. Необычайно широкая изменчивость бактерий при ничтожнейших изменениях окружающей среды, прежде всего отражается на форме их; изучение только одной формы микробов привело бы к грубейшим ошибкам при определении их вида. Поэтому, для суждения о виде микроба необходимо знание, кроме морфологии,-и всех его биол. особенностей, его биохим. и иммунологических свойств, а для патогенных-и результата опыта на животном; только совокупность всех этих данных дает возможность б. или м. точно идентифицировать того или иного микроба, определить вид и тип его. Этому и служит вся бактериологическая техника. Культивирование микробов на искусственных питательных субстратах для изучения их биохим. свойств является главнейшим моментом Б. а. В настоящее время такое культивирование встречает еще ряд затруднений. Многих микробов и теперь еще нельзя получить в искусственных культурах. Препятствием служит ряд условий, заключающихся в необычайном разнообразии микробного мира, в резко выраженной специфичности биохим. функций микробов и вытекающей отсюда их изменчивости. Наше незнание многих из этих условий не дает возможности подобрать такие питательные среды, к-рые всегда были бы пригодны. Тем не менее, именно культивирование доступных нам микробов является основным методом их Б. а. В наст, время Б. а. начинается с получения отдельных микробов, подлежащих изучению, в чистых культурах, т. е. в культурах, состоящих из одного вида микроба, без примеси какого-либо другого. Достигается это тем, что материал, подлежащий изучению, распределяется на поверхности твердых питательных сред. Это распределение имеет целью отделить микробов друг от друга. Через известный период времени, чаще всего через сутки, на тех местах субстрата, на которых оказались микробные клетки, образуются скопления микробов, т. н. колонии разросшегося микроба. Эти колонии у многих микробных видов имеют очень характерную форму, чем и пользуются для первого ориентирования в составе микробной флоры. Отдельные колонии извлекаются и переносятся на подходящие питательные среды для дальнейшего культи- вирования. Предполагается, что каждая колония вырастает из одной клетки; но это бывает не всегда, и последнее время все больше и больше в практику входит способ получения колоний из заведомо одной микробной клетки. Такое отделение микроба производится под контролем глаза в микроскопе с помощью прибора, называемого микроманипулятором. Т.к. материал, подлежащий обследованию, заключает в себе огромное количество разнообразных микробов, выделить же необходимо одного определенного из них, то в таких случаях применяются особые питательные среды. В последних или содержатся хим. вещества, вступающие между собой во взаимодействие под влиянием роста микробов, что обнаруживается каким-либо легко доступным проявлением, напр., изменением цвета, выпадением или растворением осадка (среды Эндо, Дригальского, среды с мелом, с кровью), или эти среды заведомо благоприятствуют росту искомого микроба и подавляют рост микробов сопутствующих, напр., среды обогащения для тифа, дифтерии. Только после такой предварительной обработки получают чистые культуры. В тех случаях, когда искомый микроб находится в исходном материале в очень незначительном количестве и трудно поддается непосредственному культивированию, прибегают к опыту на животных (tbc). Материал впрыскивают животному, и после того, как разовьются характерные для данного микроба пат. изменения, выделяют чистую культуру. Получив чистую культуру, приступают к изучению биохим. особенностей данного микроба. Т. к. состав питательных сред очень сложен, то для изучения биохимии к средам прибавляются различные, химически более простые вещества, изменения которых под влиянием роста микробов легко могут быть обнаружены прибавлением какого-либо индикатора-лакмуса,нейтраль-рота и др. Для этой цели служат различные углеводы, моно-, ди-, полисахариды и многоатомные спирты, а также желатина и кровь (эритроциты). На основании изменения того или иного из этих веществ заключают о биохимич. особенностях данного микроба. Громадное значение при определении вида микроба имеет иммунологический метод, основанный на способности животного организма крайне специфически реагировать на парэнтеральное введение инородных белков образованием и накоплением в крови различных т. н. антител. Сыворотка крови таких животных и служит реактивом. В ней присутствие этих антител легко может быть обнаружено рядом простых реакций. Некоторые из этих реакций получили широкое распространение и являются обязательными при идентификации микробных видов. Эти реакции-агглютинация, преципитация и реакция отклонения комплемента. Для непатогенных микробов Б. а. на этом может быть закончен. Для микробов же патогенных обязателен еще эксперимент на животном, особенно при обнаружении нового вида. Идеалом определения всякого патогенного микроба является получение у подходящего животного патологич. изменений, вызываемых данным микробом в естеств. условиях. Однако, наши знания необходимые для такого опыта условий далеко не полны, почему опыты и бывают часто безуспешными. Затем, пат.-анат. данные, полученные в результате опыта, не всегда могут быть достоверны, т. к. видимое здоровое состояние животного ничего не говорит о перенесенных им инфекциях и друг, заболеваниях; обнаруженные изменения, могут быть результатом уже ранее перенесенных заболеваний. Все эти соображения заставляют очень осторожно относиться к получаемым при эксперименте результатам и никогда не удовлетворяться одним удачным опытом. Все же в тех случаях, где реакция со стороны опытного животного по отношению к данному микробу строго определенна и постоянна (как, напр., отношение морской свинки к дифтерии или tbc, или кролика к оспе и бешенству), там эксперимент на животном является обязательным. Б. а. без такого эксперимента недостаточно убедителен. В нек-рых случаях при удачном опыте необходимо выделить в чистой культуре того микроба, который послужил для эксперимента, и идентифицировать его с исходным. Это необходимо потому, что часто введение в животный организм инородного материала пробуждает дремлющие там патогенные процессы и вызывает генерализацию ограниченного страдания, повышая активность находящихся там микробов. При выделении чистой культуры надо поэтому иметь в виду, что можно выделить не исходного микроба, а микроба, случайно находившегося в организме. Кроме того, кровь многих, видимо здоровых, животных содержит в себе различных микробов, к-рые также могут быть выделены и могут ввести в заблуждение исследователя. Общая схема хода Б. а. может быть представлена в таком виде: 1) изготовление препаратов из подлежащего обследованию материала; фиксация их; 2) микроскопирова-ние а) в неокрашенном виде, б) в окрашенном виде; 3) посев на агаровые пластинки для выделения чистой культуры; если необходимо, то после предварительного посева на избирательные или обогащающие среды; 4) биохим. анализ; 5) реакции иммунитета; 6) эксперимент на животных. Целью Б. а., кроме определения вида бактерии, служит и установление его места в систематике микробов. Однако, систематика микробов еще недостаточно разработана, вернее, существует несколько систематик, очень неполных, построенных на различных основах. Все это затрудняет точность анализа. В 1917 г. американские микробиологи создали специальную комиссию, к-рая и разработала систематику бактерий, базируясь, гл. обр., на их иммуно-биологических особенностях и свойствах, обнаруживаемых в культурах. Эта комиссия проверила характеристики всех известных микробов в указанном выше смысле, и результаты ее работ опубликованы. Все выходящие теперь на англ. яз. работы уже придерживаются номенклатуры, принятой в этом руководстве. Лит.: Златогоров С. И., Учение о микроорганизмах, П., 1914; Т а р а с е в и ч Л. А., Ме- дицинская микробиология, Киев, 1910; Омелян-с к и й В. Л., Основы микробиологии, М.-Л., 1926; К о 1 I e W. u. Wassermann A., Handbuch d. path. Mikroorg., В. I, 2 Ausg., Jena, 1912; К о 1 m e r J., Infection, immunity a. biologic therapy, L., 1924; Bergey H., Manual of determinative bacteriology, L., 1927; P a r k W. a. Williams A., Pathogenic microorganisms, N. Y., 1925; В e s s о n A., Technique microbiologique, P., 1925; Wadsworth A., Standard methods, N. Y., 1927.А. Челышй.

Классическое бактериологическое исследование - «золотой» стандарт микробиологической диагностики.

Цель бактериологического исследования - выделение чистой культуры возбудителя и ее идентификация.

Алгоритм бактериологического исследования:

Первичная микроскопия исследуемого материала (необязатель­ный этап, в зависимости от характера материала);

Первичный посев с целью выделения чистой культуры;

Накопление чистой культуры;

Изучение комплекса биологических свойств выделенной культуры;

Окончательная идентификация возбудителя.

1-й день исследования

1. Первичная микроскопия

Результат первичной микроскопии дает ориентировочное представление о наличии в клиническом материале различных морфологических форм микроорганизмов, а также позволяет провести их первичную идентификацию по морфолого-тинкториальным свойствам и существить выбор сред для первичного посева.

Гнойное отделяемое - первичная микроскопия обязательна.

Спинномозговая жидкость - первичная микроскопия осадка обязательна.

Мокрота - первичную микроскопию проводят из разведений 10 4 -10 5 .

Мазки из зева и носа - первичную микроскопию не проводят.

Кровь - первичную микроскопию не проводят.

Фекалии - первичную микроскопию не проводят.

2. Первичный посев

Исследуемый материал после первичной микроскопии или без нее (фекалии, моча, мазок из носа и зева, кровь) засевают на соответ­ствующие среды, для выделения чистой культуры:

Сахарный бульон, кровяной агар - для стрептококков;

Желточно-солевой агар, кровяной агар - для стафилококков;

Среда Эндо - для бактерий семейства Enterobacteriaceae;

МПА (мясо-пептонный агар) - для грамотрицательных бактерий;

МПА (посев по методу Шукевича) - для выделения протея;

Среда Китта-Тароцци - для выделения анаэробов;

Среда Сабуро - для выделения грибов.

Посев является первым этапом бактериологического исследования (если не проводят первичную микроскопию).

Посев осуществляется следующим образом:

Посев штрихом с обжигом петли. Материал забирают прокаленной бактериологической петлей и штрихом густо засевают верхнее поле чашки. Далее петлю опять прокаливают и вносят в густо засеянный сектор и проводят 2-3 вертикальные линии по всей чашке. После этого чашку переворачивают, густо засеянный сек­тор остается на нижнем поле чашки. Петлю опять прокаливают, и посев разносят по чашке 2-3 горизонтальными штрихами.

Посев шпателем. Материал наносят на поверхность среды шпате­лем или пипеткой, а затем шпателем рассеивают по всей поверх­ности.

Посев тампоном. Для посева тампон с исследуемым материалом вносят в чашку и круговыми движениями втирают его содержи­мое в питательную среду.

Посев по секторам. При таком посеве дно чашки расчерчивают на секторы, посев проводят штриховыми движениями от края чашки к центру и по секторам.

2-й день исследования

1. Проводят учет роста на питательных средах как однородный или неоднородный.

2. Проводят описание культуральных свойств.

Алгоритм описания колоний

В результате роста на питательной среде образуются колонии (потомки одной клетки). Отбирают изолированные колонии и изуча­ют их - начинается второй этап исследования, направленный на изучение культуральных свойств бактерий. Знания этих свойств необходимы для идентификации полученной чистой культуры, так как каждому виду микроорганизмов при росте на определенной пита­тельной среде соответствуют определенные культуральные свойства.

Колонии изучают:

Макроскопически: невооруженным глазом в проходящем и отра­женном свете;

Микроскопически: при малом увеличении сухой системы микро­скопа.

В проходящем свете изучают:

Величину колоний (крупные, средние, мелкие, карликовые);

Форму колоний (правильная, неправильная, круглая);

Прозрачность колоний (прозрачная, непрозрачная).

В отраженном свете определяют:

Цвет (бесцветные или окрашенные);

Характер поверхности (гладкая, бугристая, блестящая, шерохова­тая);

Высоту колоний над поверхностью среды (вдавленная, плоская, возвышающаяся).

Микроскопически оценивают:

Край (ровный, неровный);

Структуру (гомогенная, негомогенная).

Изучение колоний заканчивается приготовлением мазка, окраской его по методу Грама и микроскопией.

При взятии материала из колонии для приготовления мазка оцени­вают ее консистенцию (мягкая, слизистая, сухая).

Если при микроскопии культура оказалась чистая, то ее пересева­ют на скошенный агар для накопления.

3-й день исследования

1. Описание характера роста на скошенном агаре:

Однородный, неоднородный;

По штриху, сплошной, сливной.

2. Проверка чистоты накопленной культуры. Готовят мазки, окра­шивают по Граму и микроскопируют. Если накоплена чистая культу­ра, то она подвергается дальнейшей идентификации. Идентификация бактерий до рода и вида основана на изучении особенностей мета­болизма - биохимическая идентификация и антигенного строения - серологическая идентификация.

3. Изучение биохимических свойств. Биохимические свойства - способность бактерий расщеплять те или иные субстраты за счет продукции соответствующих ферментов. Для изучения биохимиче­ских свойств используют дифференциально-диагностические среды, содержащие различные субстраты (пестрый ряд). В их состав входят среды Гисса с углеводами, лакмусовое молоко, желатин, среды с ами­нокислотами, МПБ (мясо-пептонный бульон) с индикаторами на сероводород и индол.

Сахаролитические свойства изучают на средах Гисса. В их состав входят пептонная вода, субстрат-углевод (различные моно- и полисахариды), многоатомные спирты и индикатор.

Если у бактерий есть ферменты, расщепляющие субстрат-углевод, то они выделяют продукты метаболизма (кислоту или кислоту и газ). При кислотообразовании индикатор меняет цвет среды, при газообразовании регистрируют разрывы среды.

Протеолитические свойства изучают при посеве на желатин и лакмусовое молоко. Если у бактерий есть протеазы, то желатин разжижается. В молоке появляется сгусток кремового цвета, а над ним жидкость - пептонизация молока (за счет того, что протеазы бактерий расщепляют казеин молока до пептона).

Пептолитические свойства. Чаще бактерии способны расщеплять промежуточные продукты распада белков - пептоны. Продукты этого процесса: амины (скатол, индол), аминокислоты, газы (сероводород, аммиак, углекислый газ). Их можно обнаружить с помощью индикаторной бумаги:

Лакмусовая - для выявления аммиака;

Смоченная щавелевоуксусной кислотой - для выявления индола;

Смоченная ацетатом свинца - для выявления сероводорода. Продукты дезаминирования и декарбоксилирования аминокислот обнаруживают с помощью тест-полос, изменяющих свой цвет при изменении рН среды.

4-й день исследования

1. Проводят учет результатов биохимических тестов. После того как культура идентифицирована до вида, у нее изучают ряд дополнитель­ных признаков, таких как чувствительность к антибиотикам, токсигенность, наличие факторов вирулентности, плазмидный профиль, а также проводят внутривидовую дифференцировку.

2. Результаты биохимической идентификации служат основанием для проведения серологической идентификации. Серологическую идентификацию выделенной культуры проводят в реакции агглю­тинации на стекле с помощью соответствующих иммунных адсор­бированных сывороток, выбор которых определяется результатами биохимической идентификации.

Внутривидовая дифференциация - определение принадлежности штамма к тому или иному фаговару, бактериоциногеновару, бактериоциновару, биовару, резистовару и т.д. Она позволяет выявить эпи­демиологические связи между штаммами одного вида.

Идентификация выделенной культуры позволяет сделать заклю­чение о том, какой микроорганизм служит этиологическим фактором заболевания. При выделении условно-патогенных бактерий необхо­димо соблюдать критерии этиологической значимости:

Присутствие бактерий в материале из патологического очага в количестве не менее 10 5 КОЕ мл /г;

Повторное выделение из материала той же культуры;

Нарастания титра Ат в сыворотке крови больного к аутоштамму в 4 раза и более.

Определение фаговаров бактерий (фаготипирование)

Определение фаговаров проводят по эпидемиологическим пока­заниям для установления эпидемиологических связей между забо­левшими. Для проведения исследования берут чашки Петри с МПА, подсушивают поверхность, расчерчивают дно на квадраты и марки­руют. Далее 3-4-часовую культуру в бульоне засевают газоном, под­сушивают и на каждый квадрат наносят каплю соответствующего типового фага в рабочем разведении. Посевы помещают в термостат на сутки. Через 24ч учитывают спектр чувствительности культуры к определенным фагам по литическому действию.

определение бактериоциновара

Для определения бактериоциновара определяют чувствительность исследуемых штаммов к эталонным бактериоциноварам. Как и фаго- типирование, его проводят по эпидпоказаниям.

Для проведения исследования соответствующие стандартные культуры-продуценты типовых бактериоцинов засевают на питательные среды. Посевы помещают в термостат при 37 °С на 48 ч.

Выросшие колонии индикаторных культур инактивируют хлоро­формом, после чего на поверхность наливают 2-4 мл расплавленного агара, в который предварительно вносят 0,2 мл исследуемой 4-часовой бульонной культуры. После того как агар застыл, посевы вновь поме­щают в термостат на 18-24 ч. Через указанное время учитывают нали­чие зон задержки роста вокруг индикаторных культур, тем самым определяют бактериоциновар изучаемых бактерий.


©2015-2019 сайт
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2016-04-27

Бактериологический (микробиологический) анализ включает в себя исследования кала, мочи, мокроты, маки из зева и т.д. Они проводятся с целью выявить причину инфекционного воспалительного процесса, поставить диагноз и назначить соответствующее лечение.

Бактериологический анализ также позволяет провести определение чувствительности бактерий к антибиотикам, и в ряде случаев к бактериофагам. Он заключается в выделении чистой культуры возбудителя заболевания и его идентификации, то есть изучении свойств микроорганизмов в бактериологической лаборатории с целью принадлежности их к тому или иному виду или роду.

Выделение чистой культуры возбудителя из посева – это первый этап исследования. Последующими являются:

  • идентификация микроорганизма;
  • определение чувствительности выявленных патогенных микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам.

Для выделения чистых культур могут использоваться как механические, так и биологические методы.

При механическом методе каплю исследуемого материала растирают по поверхности плотной питательной среды в первой, второй и третьей чашках Петри. А само выделение чистой культуры включает ее исследование и отсев на свежую питательную среду.

Биологические методы в свою очередь, основаны на учете специфических свойств выделяемого микроба, отличающего его от других микробов в исследуемом материале. При этом методе используются питательные среды, в которых созданы благоприятные условия для развития определенного вида микробов.

Предварительная заявка на консультацию

Бактериологический посев - один из видов лабораторного исследования, основанный на анализе биологического материала посредством его высева на специальные питательные среды. По результатам бакпосева выявляется наличие/отсутствие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов определенного типа с целью дальнейшего изучения их физико-химических свойств и определения схемы лечения диагностированных инфекционных заболеваний.

Ценность данного способа исследований заключается в том, что он позволяет не только обнаружить болезнетворные бактерии, но и установить степень их чувствительности к препаратам антибактериального действия. Иными словами, на основании анализа можно безошибочно подобрать комплекс медикаментозных средств для проведения успешной терапии.

Основными плюсами бактериологического посева можно назвать следующие:

  • Высокая точность исследований. В отличие от ИФА (иммуноферментный анализ), ПЦР (полимеразная цепная реакция), вероятность получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов практически равна нулю.
  • В качестве биологического материала возможно использование абсолютно любой жидкости, выделяемой из организма человека.
  • Разработка атибиотикограммы. То есть, установление степени воздействия на выявленные микробы того или иного антибиотика, что позволяет проводить лечебные назначения с максимально высокой точностью.

Недостатки метода

К минусам бакпосева можно отнести такие факторы:

  • Сложность выполнения процедуры и необходимость соблюдения специфических требований к забору материала.
  • Длительность ожидания результат исследований.
  • Наличие специальной лаборатории, а также соответствующей квалификации медперсонала, задействованного в проведении анализа.

Цель проведения бактериологического посева

Метод бакпосева достаточно распространен в медицинской практике, применяясь для диагностики заболеваний в самых разных областях медицины: хирургии, онкологии, гастроэнтерологии, отоларингологии и т. д. В гинекологии и урологии данный вид лабораторного анализа используется для исследования микрофлоры в целях диагностики следующих возбудителей:

  • микоплазмоза и уреаплазмоза;
  • трихомониаза;
  • кандидоза (молочницы);
  • хламидиоза.

По итогам исследования можно не только выявить наличие патогенных бактерий, но и определить их количественных состав. Что, в свою очередь, дает понимание того, на какой стадии прогрессирует болезнь, и скоординировать дальнейшее лечение.

Помимо мазка из половых органов для бакпосева используется также и ряд других разновидностей биологического материала. Например:

  • Кровь - для проверки на стерильность, при внутрисосудистых инфекциях, эндокардите.
  • Слизистая из носа, горла - для выявления вирусов и бактерий, провоцирующих риниты, синуситы, ангины и другие ЛОР-заболевания.
  • Кал - для диагностирования дисбактериоза и прочих нарушений желудочно-кишечного тракта.
  • Желчь - при наличии воспалительных заболеваний печени, поджелудочной железы, желчного пузыря.
  • Мокроты - для определения инфекций дыхательных путей, в частности, туберкулеза легких.
  • Слизистая глаз - при развитии гнойных воспалений глаз и других офтальмологических патологий.
  • Кожный жир - для выявления стафилококков, грибков и прочих представителей патогенной флоры, скапливающихся в эпителиальном слое кожи лица.

Механизм проведения

Процедуру лабораторного исследования условно можно разделить на несколько этапов:

  • Забор материала и помещение его на специальные питательные среды. Тип используемой среды зависит от цели проведения бакпосева (выращивание одного определенного возбудителя или расшифровка бактериальных культур с целью дальнейшего построения антибиотикограммы). При необходимости жидкие среды могут заменяться впоследствии на твердые поверхности, что позволяет проводить более точную идентификацию колоний бактерий.
  • Помещение питательной среды в специальное оборудование (термостат), где создаются соответствующие условия для роста и размножения патогенных возбудителей. Имеют значение показатели влажности воздуха, температуры, освещения и т. д.
  • Подкрашивание материала различными реагентами для лучшего осмотра и дальнейшего анализа. За счет красителей бактерии меняют свою расцветку и становятся более заметными на общем фоне питательной среды.
  • Оценка выросших колоний по определенным показателям: плотность, форма, расцветка, химический состав и т. д.

Важно! Одним из важнейших условий проведения бактериологического посева является соблюдение абсолютной стерильности помещения лаборатории, а также используемой посуды и инструментов. Для переноса материала на среду применяются такие приспособления как стеклянная палочка, бактериальная петля, пастеровская пипетка.

В данном видео, на примере бактериологического анализа мочи, рассказывается о принципе проведения бакпосева.

Расшифровка бакпосева

Результат анализа оценивается по нескольким показателям, учитывающим не только качественный фактор (подтверждение наличия бактерий-возбудителей в среде), но и количественный - то есть, степень концентрации патогенных микроорганизмов в исследуемом материале. Для подсчета количества микробных клеток используется понятие колониеобразующей единицы (КОЕ), по которому можно определить уровень насыщенности бактериями изучаемого образца.

Выделяют 4 степени роста возбудителей:

  • Первая - скудный рост бактерий на жидкой питательной среде и отсутствие роста на твердой среде. Такой результат не считается отклонением от нормы.
  • Вторая - рост бактерий на твердой среде до 10 колоний. Свидетельствует не о наличии болезни, а скорее о загрязненности лабораторных принадлежностей для исследования.
  • Третья - рост бактерий на твердой среде в пределах 10-100 колоний.
  • Четвертая - более 100 колоний.

В заключении, выдаваемом на руки пациенту, результаты бакпосева обозначаются следующим образом:

  • указывается название выявленного возбудителя на латинском языке (например, Trichomonas vaginalis - трихомонада);
  • прописывается концентрация микроорганизма, выращенного в условиях питательной среды (норма - до 10 3 КОЕ/мл, ненорма - от 10 5 КОЕ/мл);
  • указывается характер среды: флора условно-патогенна, патогенная.

Одновременно с определением концентрации бактерий производится анализ их чувствительности к антибиотикам. Наличие положительной реакции на тот или иной антибактериальный препарат обозначается символом «S», отрицательной - «R».

Правила проведения бакпосева на микрофлору у женщин

Перед сдачей анализа необходимо учесть ряд обязательных требований в части соблюдения правил личной гигиены, а также непосредственно механизма забора биологического материала. Заключаются они в следующем:

  • за сутки до процедуры избегать половых контактов любого вида (анальный, оральный, вагинальный);
  • не проводить спринцевания, ванночки, примочки на половые органы и прочие антисептические процедуры;
  • отказаться от применения вагинальных свечей, таблеток;
  • мазок должен браться не ранее, чем через 2 недели после менструации;
  • за месяц до анализа исключить прием антибиотиков;
  • не мочиться перед забором материала на протяжении 2-х часов.

Для исследования могут использоваться заборы из влагалища, мочеиспускательного канала, шейки матки, цервикального канала. Перед началом процедуры делается тщательная обработка половых органов, при необходимости вход в вагину закрывается ватным тампоном. При анализе мочи берется ее средняя порция, помещаемая затем в стерильную баночку. Моча должна быть обработана в течение 2-х часов после забора и храниться при температуре не выше 20°С.

Правила проведения бакпосева на микрофлору у мужчин

В качестве материала для исследования может использоваться эякулят (сперма), кровь, моча, секрет простаты. Для получения максимально точного результата мужчинам следует придерживаться таких требований перед сдачей анализа:

  • воздержаться от сексуальных контактов за 1-2 перед тестированием на бакпосев;
  • исключить прием антибиотиков за 3-4 недели до сдачи анализа;
  • не мочиться за 4-5 часов до взятия пробы;
  • тщательно вымыть половые органы и сменить нижнее белье.

О любых изменениях в самочувствии следует незамедлительно сообщать врачу во избежание получения некорректных результатов анализа.

Бакпосев при беременности

Любая бактериальная инфекция, «дремлющая» в организме женщины, может отрицательно повлиять на течение беременности, привести к заражению плода, а в некоторых случаях даже спровоцировать выкидыш на ранних сроках. Чтобы обезопасить себя и будущего ребенка от различных патологий, необходимо осознанно подходить к планированию зачатия и при необходимости проводить соответствующую антибактериальную терапию.

Среди показаний для проведения бакпосева выделяют следующие:

  • наличие воспалительных заболеваний половых органов и мочеполовой системы;
  • выявление причин невынашиввания при предварительном диагнозе - бесплодие;
  • диагностика воспаления предстательной железы (у мужчин);
  • подготовительные действия к зачатию ребенка;
  • выбор правильной схемы лечения при наличии мочеполовых инфекций;
  • частая смена половых партнеров и пренебрежение механической контрацепцией (презерватив);
  • внематочная беременность (наступившая или присутствовавшая в прошлом).

Серьезную опасность для здоровья женщины, особенно в период беременности, представляет заболевание уреаплазмозом. Поскольку чаще всего оно протекает бессимптомно, вызывая впоследствии ряд серьезных осложнений (эндометрит, воспаление матки и т. д.), то своевременное диагностирование инфекции помогает провести необходимую терапию и снизить риск инфицирования ребенка в процессе вынашивания и родов.

Сроки готовности

Сроки готовности анализа зависят от вида исследуемого материала и могут варьироваться от 3 до 14 дней. При взятии мазка из урогенитального тракта продолжительность теста занимает в среднем 7 дней. Посевы на микрофлору (у мужчин и женщин) длятся 5-8 дней. Предварительный результат можно получить не ранее 3-х дней поле сдачи мазка.

При относительной длительности и специфики проведения бактериологического посева на сегодняшний день данный вид лабораторного исследования является одним из самых точных и эффективных способов диагностики, позволяющий не только определить тип болезнетворных организмов, но и спланировать схему борьбы с выявленным заболеванием.

Одновременно учитываются патогенез заболевания и места наибольшего скопления предполагаемых микроорганизмов, а также пути их выведения из организма. К примеру, при сепсисе или заболевании, на фоне которого развивается бактериемия, наиболее информативным материалом для исследования выступает кровь. Если имеются серьезные подозрения на дизентерию, у пациента берут на анализ фекалии.
При пневмонии проводится анализ мокроты, а при подозрении на анаэробную инфекцию материал для исследования отбирают из глубоких слоев пораженных тканей.
У всех пациентов материал для бактериологического исследования целесообразно брать до начала терапии антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами. Забранный для бактериологического исследования биологический материал собирают в стерильную емкость, соблюдая правила асептики, не используя дезинфицирующих растворов. В максимально сжатые сроки емкость доставляют в специальную лабораторию. Транспортировку материала, предположительно содержащего возбудителей опасных инфекций, осуществляют в закрытой посуде, которую упаковывают в специальные биксы. К подобному материалу обязательно прилагают сопроводительный документ, содержащий следующие сведения: наименование собранного материала и дату его забора, ФИО, возраст и адрес пациента, максимально точную дату начала его заболевания и предварительный клинический диагноз. Доставленный материал необходимо исследовать максимально быстро.
Начинается анализ с бактериоскопии посредством исследования под микроскопом специальным образом окрашенных мазков из взятого от больного материала. В ряде случаев уже это позволяет установить возбудителя заболевания. Чаще же бактериоскопию используют в качестве ориентировочного (предварительного) метода исследования. На основе получения такого быстрого результата можно сразу начать антибактериальную терапию.


Для профилактики распространения инфекционных заболеваний обследуют не только больного, но и контактных с ним лиц: родственников, медперсонал и др.

Бактериологическое исследование подразумевает получение чистой культуры возбудителя и установление его принадлежности к виду, роду и т. д. Данный метод включает в себя определенные этапы. Вначале выделяется чистая культура возбудителя с помощью посева на плотные питательные среды. Выбор питательной среды зависит от свойств предполагаемого возбудителя. На следующем этапе осуществляют исследование полученных колоний бактерий макроскопическим и микроскопическим методами. Затем из небольших фрагментов каждой из образовавшихся колоний готовят мазки, которые окрашивают по Грамму. Далее исследуют их под микроскопом, определяя свойства, присущие выделенной культуре, и проверяют ее чистоту.
Оставшуюся часть колонии переносят в специальные пробирки со скошенным агаром (плотной питательной средой) для накопления чистой культуры с целью последующего полного изучения данной колонии. Все пробирки с агаром ставят на 18-24 ч в термостат. На 2-м этапе бактериологического исследования зачастую учитывают количество образовавшихся колоний микроорганизмов. Это имеет огромное значение при наличии у пациента заболеваний, вызываемых условно-патогенной микрофлорой. На З-м этапе бактериологического исследования проводятся идентификация выделенной чистой культуры возбудителя и установление степени его чувствительности к антибиотикам и прочим химиотерапевтическим лекарственным препаратам. Идентификацию культуры осуществляют по морфологическим, биохимическим, тинкториальным, антигенным, культуральным и токсикогенным свойствам:
Поскольку в последнее время растет число лекарственно-устойчивых форм бактерий, для назначения конкретному больному рациональной химиотерапии непременно требуется определение антибиотикограммы. Она отражает чувствительность или устойчивость выделенной чистой культуры возбудителя определенного заболевания к химиотерапевтическим препаратам и антибиотикам. Для чего используют либо метод бумажных дисков, либо значительно более точный, но и более трудоемкий метод серийных разведений. В основе 1-го метода лежит выявление области подавления роста колоний микрофлоры вокруг дисков, пропитанных различными антибиотиками.
При использовании методики серийных разведений определенный антибиотик разводят в пробирках, наполненных жидкой питательной средой, и помещают в них равное количество микроорганизмов. Учет результатов данного вида исследования проводят по отсутствию или наличию роста бактериальной микрофлоры в этих пробирках. Полученная в результате антибиотикограмма нередко оказывает помощь и врачам-эпидемиологам для установления идентичности штаммов микроорганизмов.

{module директ4}

При определении у пациента возможного бактерионосительства исследования осуществляют неоднократно, поскольку в единичной порции собранного биологического материала можно и не обнаружить возбудителя.

Доставка материала от больного для бактериологических исследований проводится с соблюдением определенных правил.

  • Забор биоматериала проводится в одноразовый контейнер со средой Эймса. Данный контейнер получают в регистратуре соответствующего лечебного учреждения.
  • Срок доставки материала от больного в лабораторию при температуре окружающей среды 10-20 °С должен составлять не более 6 ч, при более низкой температуре, например 2-8 °С, - до 48 ч.
  • Заморозка собранного биоматериала исключается.

Для того чтобы провести бактериологическое исследование мочи, пациенту следует собрать ее среднюю порцию объемом 3-5 мл. Сбор материала производится в стерильный пластиковый одноразовый контейнер после тщательного туалета гениталий, без использования антисептиков. Микробы, содержащиеся в моче, активно размножаются при комнатной температуре. Данный факт нередко дает ложные результаты при определении степени их содержания в моче (бактериурии).
Анализ спермы для бактериологического исследования собирается пациентом в стерильную пластиковую одноразовую емкость. Срок доставки материала в бактериологическую лабораторию при комнатной температуре окружающей среды составляет 1-2 ч.
Мокроту целесообразно собирать в утренние часы, до приема пищи (натощак), но после проведения санации ротовой полости. Сбор материала для исследования проводится в стерильную пластиковую емкость.
Забор секрета простаты для бактериологического исследования проводится квалифицированным врачом-урологом после предварительного проведения массажа предстательной железы. Перед забором данного материала пациенту рекомендуется полное половое воздержание на протяжении как минимум 2 дней.


Если сбор материала от больного для исследования производится в стерильную пробирку с ватным тампоном, то перед тем как его вставить, необходимо обжечь края пробирки на спиртовке.

Забор проб грудного молока для последующего бактериологического исследования осуществляется только до акта кормления ребенка или спустя 2 ч после него. В качестве подготовки к проведению забора данного материала пациентка обмывает 2 грудные железы теплой водой с мылом и насухо вытирает их чистым полотенцем. Поверхность сосков и кончики пальцев обрабатываются ватным шариком, слегка смоченным 70%-ным этиловым спиртом. Первая порция молока объемом примерно 0,5 мл сливается. После чего, не касаясь соска руками, пациентка сцеживает по 0,5-1 мл молока из правой и левой молочных желез в отдельные стерильные емкости. Нельзя допускать длительного хранения или транспортировки грудного молока при комнатной температуре окружающей среды. В противном случае может произойти размножение микрофлоры молока, следствием чего станут значительные количественные погрешности в результатах бактериологического анализа.

Важно помнить, что при регистрации бактериологического анализа грудного молока необходимо указать следующее:

  • в какой емкости содержится материал из правой, а в какой - из левой грудных желез;
  • из какой именно железы последний раз кормили ребенка.

Забор синовиальной жидкости производится квалифицированным врачом в специально подготовленную для этого стерильную пластиковую емкость. Важно помнить, что в лабораторных условиях данная процедура не проводится.
Забор отделяемого из раны в специальную одноразовую емкость, содержащую среду Эймса, осуществляется только врачом.
Желчь для проведения бактериологического исследования забирается в процессе дуоденального зондирования. Ее сбор осуществляется в 3 стерильные пробирки. В ряде случаев забор желчи производится в ходе оперативного вмешательства посредством стерильного шприца в 1 пробирку. Данная процедура никогда не осуществляется в лабораторных условиях.
Забор материала из зева и носоглотки (мазки) производится до приема пищи. Причем пациенту следует исключить чистку зубов и полоскание ротовой полости.
Кал на баканализ собирают с помощью стерильной проволочной петли, обмотанной ватой, которую вводят в прямую кишку на глубину 8-10 см. Затем петлю сразу погружают в стерильную пробирку с питательной средой и отправляют в бактериологическую лабораторию.